消銀片—苦參堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定消銀片中苦參堿(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

本方法適用于中成藥消銀片。

將供試品加氯仿氨水提取，過濾，濾液揮干，加乙腈和磷酸溶液稀釋定容，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，檢測苦參堿(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

1. 乙腈（色譜純)

2 .0.1%磷酸溶液

3 .三乙胺

4 .氯仿

5 .氨水

1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

Hypersil ODS柱 (250 × 4.6mm，5µm)，理論板數(shù)按苦參堿計算應不低于2000。

1.3紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 40 60

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取消銀片20片，剝?nèi)ヌ且潞�，稱重，研細。精密稱取本品粉末適量。

2.對照品溶液的制備

取苦參堿對照品約20mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加流動相適量溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密稱取苦參堿對照品約10mg，置50mL量瓶中，加流動相適量至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

3. 標準溶液的制備

精密量取對照品儲備液1、3、5、7、9mL分別置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品分別加入30mL氯仿及氨水1mL，振搖，放置過夜，濾過，分用20mL氯仿分三次洗滌容器及殘渣，洗液與濾液合并，揮干，加流動相適量溶解，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 標準曲線的繪制

精密吸取上述標準溶液10µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定苦參堿的吸收值，以對照品溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定苦參堿的吸收值，計算其含量。

劉宇，吳玉山，陳曉偉等. 高效液相色譜法測定苦參堿含量.黑龍江醫(yī)藥. 2003，16(5)：429-430.