雌二醇緩釋貼片—雌二醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定雌二醇緩釋貼片中雌二醇（C₁₈H₂₄O₂)的含量。

本方法適用于雌二醇緩釋貼片中雌二醇的含量測定。

取本品除去鋁塑薄膜，乙酸乙酯浸泡，超聲處理使雌二醇溶解，加甲醇稀釋，濾過，取續(xù)濾液適量注入液相色譜儀，在280nm波長處檢測，記錄色譜圖。另取雌二醇對照品甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中含約25μg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，求出每片的平均含量，即得。

1. 甲醇

2. 乙酸乙酯

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按雌二醇峰計算不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇＋水=75 25

2.2 檢測波長：280nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取雌二醇對照品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中含約25μg的溶液，搖勻，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

本品1片，除去鋁塑薄膜，置100mL量瓶中，加乙酸乙酯5mL，浸泡30分鐘，超聲處理15分鐘使雌二醇溶解，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別取供試品及對照品溶液20μL注入液相色譜儀，在280nm波長處檢測，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算，求出每片的平均含量，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.830。