脂蛋白受體主要包括乳糜粒受體(CM-R)、極低密度脂蛋白受體(VLDL-R)、低密度脂蛋白受體(LDL-R)、高密度脂蛋白受體(HDL-R)和清道夫受體(scavenger receptor)等。脂蛋白受體的檢測(cè)與一般受體檢測(cè)方法的原理及操作基本類同。目前研究最多,應(yīng)用最廣的要屬LDL-R,其他脂蛋白受體如清道夫受體、VLDL-R等的檢測(cè)方法與LDL-R基本相似,多采用125Ⅰ標(biāo)記的配體檢測(cè)或是3HTdR摻入法等。本章以LDL-R為代表介紹脂蛋白的檢測(cè)方法。
低密度脂蛋白受體(LDL-R)廣泛分布于人與動(dòng)物的各種細(xì)胞和組織,如肝細(xì)胞,成纖維細(xì)胞,血管平滑肌細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞及腎上腺、卵巢等。LDL-R是一種跨膜糖蛋白,位于細(xì)胞表面被膜凹的漿膜部位。主要功能是參與LDL-R的代謝過程,與含有ApoB100、ApoE的LDL、β-VLDL等結(jié)合,并f1411.cn內(nèi)吞入細(xì)胞,LDL-R缺乏則導(dǎo)致血中膽固醇異常。家族性高膽固醇血癥(FH)是LDL-R基因突變引起的LDL-R缺乏以致膽固醇異常的顯性遺傳性疾病。其特征為血膽固醇顯著升高、黃色瘤和早發(fā)心肌梗塞。人群中雜合子型FH(LDf1411.cn/shiti/L-R減少)發(fā)生頻率為1/500,純合子型FH(LDL-R缺乏)較少見,發(fā)生頻率約為1/1000000,通常在兒童期即發(fā)生心肌梗塞。FH的發(fā)病率在我國(guó)也是比較高的,因此LDL-R的檢測(cè)對(duì)于篩選人群中的FH患者及預(yù)防冠心病、心肌梗塞等具有重要意義。
細(xì)胞表面的LDL-R的分析可通過以下幾種檢測(cè)方法進(jìn)行:檢測(cè)同位素或非同位素標(biāo)記的LDL與LDL-R的結(jié)合力(或率),推算受體最大結(jié)合濃度,在限制性生長(zhǎng)條件下檢測(cè)細(xì)胞分裂抑制率。判斷LDL受體活性;用抗體直接測(cè)定LDL-R量或者對(duì)受體直接進(jìn)行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和基因圖譜分析。