Hitachi 7170A全自動(dòng)生化分析儀是日立公司系列儀器之一，由于其質(zhì)量穩(wěn)定，故障率低，目前在國(guó)內(nèi)使用較廣。從2002年開(kāi)始，儀器開(kāi)始配備離子選擇電極(ISE)模塊。ISE試劑由稀釋液、參比液和內(nèi)標(biāo)液組成，采用間接測(cè)定法檢測(cè)離子，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。常規(guī)工作中，使用ISE測(cè)定的樣本量較多，內(nèi)標(biāo)液耗量很大，遠(yuǎn)高于稀釋液與醫(yī)生招聘網(wǎng)參比液，但原裝配套試劑價(jià)格高昂。因此，為降低檢驗(yàn)成本，本文作者研制ISE的內(nèi)標(biāo)液，經(jīng)過(guò)幾個(gè)月的測(cè)試和驗(yàn)證，試劑穩(wěn)定性好，結(jié)果可靠。
ISE已在臨床生物化學(xué)領(lǐng)域得到十分廣泛的應(yīng)用，可分為直接測(cè)定法與間接測(cè)定法兩種。大型生化分析儀上的ISE模塊多用間接電位法檢測(cè)：樣本與標(biāo)準(zhǔn)液要用指定離子強(qiáng)度和pH值的緩沖液作定量稀釋，再進(jìn)入電極管道，測(cè)量其電位，應(yīng)注意問(wèn)接ISE法與直接ISE法相比結(jié)果會(huì)偏低，因?yàn)樵谧鲩g接ISE法時(shí)，將一定量體積的總血漿進(jìn)行稀釋，而實(shí)際上只有93％ 的血漿水(含有電解質(zhì))加到稀釋液中。目前檢測(cè)項(xiàng)目一般是K+、Na+、C1-。需要用到3種試劑：參比液、內(nèi)標(biāo)液、稀釋液。儀器還需要使用外部標(biāo)準(zhǔn)液定標(biāo)，質(zhì)控液做質(zhì)控，以及清洗液保養(yǎng)。內(nèi)標(biāo)液是ISE試劑重要組成部分，其主要作用是抑制偏差產(chǎn)生。分析開(kāi)始后，內(nèi)標(biāo)液先加入稀釋槽中，吸到流路測(cè)定其相對(duì)參比電極的電位，反應(yīng)后期被加到稀釋槽清洗稀釋槽。這樣，被測(cè)液體經(jīng)常與內(nèi)標(biāo)液同時(shí)測(cè)定，以內(nèi)標(biāo)液為基準(zhǔn)進(jìn)行修正。
本研究是根據(jù)ISE測(cè)定K+、Na+、C1-的原理，選擇NaC1、KC1和NaHCO3配制內(nèi)標(biāo)液的無(wú)機(jī)離子濃度和滲透壓。由于常用的鹽酸、硫酸等對(duì)離子濃度會(huì)造成影響。因此，采用甲醛作為防腐劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，對(duì)結(jié)果無(wú)影響。BIS-Tris常用于蛋白電泳的緩沖系統(tǒng)，組成不連續(xù)液系統(tǒng)，對(duì)蛋白質(zhì)的分辨率比連續(xù)液獲得的要高。本研究中BIS-Tris和硼酸組成內(nèi)標(biāo)液的緩沖系統(tǒng)，一方面調(diào)節(jié)pH值，另一方面是內(nèi)標(biāo)液主要的離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)劑。另外，考慮內(nèi)標(biāo)液離子濃度不高，對(duì)溶液的pH值、滲透壓及防腐劑要求較高，由于電極反應(yīng)性受標(biāo)準(zhǔn)液pH值、離子強(qiáng)度、滲透壓等的影響，所以配內(nèi)標(biāo)液時(shí)，要加適量的磷酸鹽，可作為穩(wěn)定劑，使自配內(nèi)標(biāo)液和原裝內(nèi)標(biāo)液在pH值、冰點(diǎn)滲透壓、電極反應(yīng)性完全一致，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
考慮本研究中內(nèi)標(biāo)液的改變是檢測(cè)系統(tǒng)的改變，因此初步做3種基本的性能評(píng)估：精密度、準(zhǔn)確度和可報(bào)告范圍。結(jié)果顯示，自配內(nèi)標(biāo)液的pH值、電導(dǎo)率、滲透壓、無(wú)機(jī)離子與進(jìn)口原裝內(nèi)標(biāo)液基本一致；精密度評(píng)估中自配內(nèi)標(biāo)X靶、s和CV與原裝內(nèi)標(biāo)液非常接近；準(zhǔn)確度評(píng)估兩者數(shù)據(jù)無(wú)差異(P>0．05)；線性評(píng)估中可直接判斷該測(cè)定方法可報(bào)告范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及范圍，說(shuō)明白研試劑評(píng)估選用的線性范圍與儀器ISE的設(shè)計(jì)要求一致，能滿足臨床需求。實(shí)驗(yàn)證明，自配內(nèi)標(biāo)液所測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、精密度高、穩(wěn)定性好，完全可以代替原裝內(nèi)標(biāo)液，大大降低成本，同時(shí)也為同類儀器的其他試劑的開(kāi)發(fā)提供線索和參考。
