生物化學(xué)與分子生物學(xué):第五節(jié)　膽色素代謝

膽色素(bilepigment)是含鐵卟啉化合物在體內(nèi)分解代謝的產(chǎn)物，包括膽紅素(bilirubin)膽綠素(biliverdin)、膽素原(bilinogen)和膽素(bilin)等化合物。其中，除膽素原族化合物無色外，其余均有一定顏色，故統(tǒng)稱膽色素。膽紅素是膽汁中的主要色素，膽色素代謝以膽紅素代謝為主心。肝臟在膽色素代謝中起著重要作用。

一、膽紅素的生成及轉(zhuǎn)運

(一)膽紅素的來源

體內(nèi)含卟啉的化合物有血紅蛋白、肌紅蛋白、過氧化物酶、過氧化氫酶及細(xì)胞色素等。成人每日約產(chǎn)生250?50mg膽紅素，膽紅素來源主要有：①80%左右膽紅素來源于衰老紅細(xì)胞中血紅蛋白的分解。②小部分來自造血過程中紅細(xì)胞的過早破壞。③非血紅蛋白血紅素的分解。

(二)膽紅素的生成

體內(nèi)紅細(xì)胞不斷更新，衰老的紅細(xì)胞由于細(xì)胞膜的變化被網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞識別并吞噬，在肝、脾及骨髓等網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中，血紅蛋白被分解為珠蛋白和血紅素。血紅素在微粒體中血紅素加氧酶(beme oxygenase)催化下，血紅素原卟啉IX環(huán)上的α次甲基橋(＝CH-)的碳原子兩側(cè)斷裂，使原卟啉IX環(huán)打開，并釋出CO和Fe3＋和膽綠素IX(biliverdin)。Fe3＋可被重新利用，CO可排出體外。線性四吡咯的膽綠素進一步在胞液中膽綠素還原酶(輔酶為NADPH)的催化下，迅速被還原為膽紅素。(圖11－10)。

圖11－10　膽紅素的生成

血紅素加氧酶是膽紅素生成的限速酶，需要O2和NADPH參加，受底物血紅素的誘導(dǎo)。而同時血紅素又可作為酶的輔基起活化分子氧的作用。

用X線衍射分析膽紅素的分子結(jié)構(gòu)表明，膽紅素分子內(nèi)形成氫鍵而呈特定的卷曲結(jié)構(gòu)分子中Ⅲ、Ⅳ兩個吡咯環(huán)之間是單鍵連接。因此，Ⅲ環(huán)與Ⅳ環(huán)能自由旋轉(zhuǎn)。在一定的空間位置，Ⅲ環(huán)上的丙酸基的羧基可與Ⅳ環(huán)，Ⅰ環(huán)上亞氨基的氫和Ⅰ環(huán)上的羰基形成氫鍵；Ⅳ環(huán)上的丙酸基的羧基也與Ⅱ環(huán)、Ⅲ環(huán)上亞氨基的氫和Ⅱ環(huán)上的羰基形成氫鍵。這6個氫鍵的形成使整個分子卷曲成穩(wěn)定的構(gòu)象。把極性基團封閉在分子內(nèi)部，使膽紅素顯示親脂、疏水的特性。

(三)膽紅素在血液中的運輸

在生理pH條件下膽紅素是難溶于水的脂溶性物質(zhì)，在網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞中生成的膽紅素能自由透過細(xì)胞膜進入血液，在血液中主要與血漿白蛋白或α1球蛋白(以白蛋白為主)結(jié)合成復(fù)合物進行運輸。這種結(jié)合增加了膽紅素在血漿中的溶解度，便于運輸；同時又限制膽紅素自由透過各種生物膜，使其不致對組織細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，每個白蛋白分子上有一個高親和力結(jié)合部位和一個低親和力結(jié)合部位。每分子白蛋白可結(jié)合兩分子膽紅素。在正常人每100ml血漿的血漿白蛋白能與20-25mg膽紅素結(jié)合，而正常人血漿膽紅素濃度僅為0.1-1.0mg/dl，所以正常情況下，血漿中的白蛋白足以結(jié)合全部膽紅素。但某些有機陰離子如磺胺類、脂肪酸、膽汁酸、水楊酸等可與膽紅素競爭與白蛋白結(jié)合，從而使膽紅素游離出來，增加其透入細(xì)胞的可能性。過多的游離膽紅素可與腦部基底核的脂類結(jié)合，并干擾腦的正常功能，稱膽紅素腦病或核黃疸。因此，在新生兒高膽紅素血癥時，對多種有機陰離子藥物必需慎用。

二、膽紅素在肝臟中的代謝

(一)肝細(xì)胞對膽紅素的攝取

血中膽紅素以“膽紅素－白蛋白”的形式送輸?shù)礁闻K，很快被肝細(xì)胞攝取。肝細(xì)胞攝細(xì)胞攝取血中膽紅素的能力很強。實驗證明，注射具有放射性的膽紅素后，大約只需18分鐘就可從血漿中清除50%。肝臟能迅速從血漿中攝取膽紅素，是由于肝細(xì)胞內(nèi)兩種載體蛋白棗Y蛋白和Z蛋白所起的重要作用。這兩種載體蛋白(以Y蛋白為主)能特異性結(jié)合包括膽紅素在內(nèi)的有機陰離子。當(dāng)血液入肝，在狄氏(Disse)間隙中肝細(xì)胞上的特殊載體蛋白結(jié)合膽紅素，使其從白蛋白分子上脫離，并被轉(zhuǎn)運到肝細(xì)胞內(nèi)。隨即與細(xì)胞液中Y和Z蛋白結(jié)合，主是與Y蛋白結(jié)合，當(dāng)Y蛋白結(jié)合飽合時，Z蛋白的結(jié)合才增多。這種結(jié)合使膽紅素不能返流入血，從而使膽紅素不斷向肝細(xì)胞內(nèi)透入。膽紅素被載體蛋白結(jié)合后，即以“膽紅素－Y蛋白”(膽紅素－Z蛋白)形式送至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。這是一個耗能的過程，而且是可逆的。如果肝細(xì)胞處理膽紅素的能力下降，或者生成膽紅素過多，超過了肝細(xì)胞處理膽紅素的能力，則已進入肝細(xì)胞的膽紅素還可返流入血，使血中膽紅素水平增高。��

圖11－11　葡萄糖醛酸膽紅素的生成

Y蛋白是一種堿性蛋白，由分子量為22000和27.000的兩個亞基組成，約占肝細(xì)胞胞液蛋白質(zhì)總量的5%。它也是一種誘導(dǎo)蛋白，苯巴比妥可誘導(dǎo)Y蛋白的合成。甲狀腺素、溴酚磺酸鈉(BSP)和靛青綠(ICG)等可競爭結(jié)合Y蛋白，影響膽紅素的轉(zhuǎn)運。Y蛋白能與上述多種物質(zhì)結(jié)合，故又稱“配體結(jié)合蛋白”(ligadin)。由于新生兒在出生7周后Y蛋白才達(dá)到正常成人水平，故易產(chǎn)生生理性的新生兒非溶血性黃疸，臨床上可用苯巴比妥治療。

Z蛋白是一種酸性蛋白，分子量為12，000，與膽紅素親和力小于Y蛋白。當(dāng)膽紅素濃度較低時，膽紅素優(yōu)先與Y蛋白結(jié)合。在膽紅素濃度高時，則Z蛋白與膽紅素的結(jié)合量增加。

(二)肝細(xì)胞對膽紅素的轉(zhuǎn)化作用

肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中有膽紅素-尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（bilirutin-UDp glucuronyl transferase,BR-UDPGA-T)，它可催化膽紅素與葡萄糖醛酸以酯鍵結(jié)合，生成膽紅素葡萄糖醛酸酯。由于膽紅素分子中有兩個丙酸基的羧基均可與葡萄糖醛酸C1上的羥基結(jié)合、故可形成兩種結(jié)合物，即膽紅素葡萄糖醛酸－酯和膽紅素葡萄糖醛酸二酯（圖11－11)。在人膽汁中的結(jié)合膽紅素主要膽紅素葡萄糖醛酸二酯(占70-80%)，其次為為膽紅素葡萄糖醛酸－（占20-30％)，也有小部分與硫酸根、甲基、乙�；�、甘氨酸等結(jié)合。

膽紅素經(jīng)上述轉(zhuǎn)化后稱為結(jié)合膽紅素，結(jié)合膽紅素較未結(jié)合膽紅素脂溶性弱而水溶性增強，與血漿白蛋白親和力減小，故易從膽道排出，也易透過腎小球從尿排出。但不易通過細(xì)胞膜和血腦屏障，因此不易造成組織中毒，是膽紅素解毒的重要方式。

(三)肝臟對膽紅素的排泄作用

膽紅素在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)經(jīng)結(jié)合轉(zhuǎn)化后，在細(xì)胞漿內(nèi)經(jīng)過高爾基復(fù)合體、溶酶體等作用，運輸并排入毛細(xì)膽管隨膽汁排出。毛細(xì)膽管內(nèi)結(jié)合膽紅素的濃度遠(yuǎn)高于細(xì)胞內(nèi)濃度，故膽紅素由肝內(nèi)排出是一個逆濃度梯度的耗能過程，也是肝臟處理膽紅素的一個溥弱環(huán)節(jié)，容易受損。排泄過程如發(fā)生障礙，則結(jié)合膽紅素可返流入血，使血中結(jié)合膽紅素水平增高。

糖皮質(zhì)激素不僅能誘導(dǎo)葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的生成，促進膽紅素與萄萄糖醛酸結(jié)合，而且對結(jié)合膽紅素的排出也有促進作用。因此，可用此類激素治療高膽紅素血癥。

肝臟對膽紅素的攝取、轉(zhuǎn)化和排出可見圖11－12。

圖11－12　肝細(xì)胞內(nèi)膽紅素代謝示意圖

三、膽紅素在腸道中的轉(zhuǎn)變

結(jié)合膽紅素隨膽汁排入腸道后，自回腸下段至結(jié)腸，在腸道細(xì)菌作用下，由β-葡萄糖醛酸酶催化水解脫去葡萄糖醛酸，生成未結(jié)合膽紅素，后者再逐步還原成為無色的膽素原族化合物，即中膽素原(meso-bilirutinogen)、糞膽素原(stercobilinogen)及尿膽素原(urobilinogen)。糞膽素原在腸道下段或隨糞便排出后經(jīng)空氣氧化，可氧化為棕黃色的糞膽素，它是正常糞便中的主要色素(圖11-13)。正常人每日從糞便排出的膽素原約40?80mg。當(dāng)膽道完全梗阻時，因結(jié)合膽紅素不能排入腸道，不能形成糞膽素原及糞膽素，糞便則呈灰白色。臨床上稱之為白陶土樣便。

圖11－13　膽紅素在腸內(nèi)的變化

生理情況下，腸道中約有10-0%的膽素原可被重吸收入血，經(jīng)門靜脈進入肝臟。其中大部分(約90%)由肝臟攝取并以原形經(jīng)膽汁分泌排入腸腔。此過程稱為膽色素的腸肝循環(huán)(entero�瞙epatic circulation of bile pigments)。在此過程中，少量(10%)膽素原可進入體循環(huán)，可通過腎小球濾出，由尿排出，即為尿膽素原。正常成人每天從尿排出的尿膽素原約0.5-4.0mg，尿膽素原在空氣中被氧化成尿膽素，是尿液中的主要色素，尿膽素原、尿膽素及尿膽紅素臨床上稱為尿三膽。

膽紅素的生成及代謝可總結(jié)為圖11－14。

圖11－14　正常膽紅素的代謝

四、血清膽紅素與黃疸

正常血清中存在的膽紅素按其性質(zhì)和結(jié)構(gòu)不同可分為兩大類型。凡未經(jīng)肝細(xì)胞結(jié)合轉(zhuǎn)化的膽紅素，即其側(cè)鏈上的丙酸基的羧基為自由羧基者，為未結(jié)合膽紅素；凡經(jīng)過肝細(xì)胞轉(zhuǎn)化，與葡萄糖醛酸或其它物質(zhì)結(jié)合者，均稱為結(jié)合膽紅素。

血清中的未結(jié)合膽紅素與結(jié)合膽紅素，由于其結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同，它們對重氮試劑的反應(yīng)(范登堡試驗Van den Bergh test)不同，未結(jié)合膽紅素由于分子內(nèi)氫鍵的形成，第10位碳橋被埋在分子的中心，這個部位是線性四吡咯結(jié)構(gòu)的膽紅素轉(zhuǎn)變?yōu)槎�吡咯并與重氮試劑結(jié)合的關(guān)鍵部分。不破壞分子內(nèi)氫鍵則膽紅素不能與重氮試劑反應(yīng)。必須先加入酒精或尿素破壞氫鍵后才能與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色偶氮化合物，稱為范登堡試驗的間接反應(yīng)。所以未結(jié)合膽紅素又稱“間接反應(yīng)膽紅素”或“間應(yīng)膽紅素”。而f1411.cn/zhuyuan/結(jié)合膽紅素不存在分子內(nèi)氫鍵，能迅速直接與重氮試劑反應(yīng)形成紫紅色偶氮化合物，故又稱“直接反應(yīng)膽紅素”或“直應(yīng)膽紅素”。

除上述兩種膽紅素外，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)還存在著“第三種膽紅素”，稱為δ－膽紅素。它的實質(zhì)是與血清白蛋白緊密結(jié)合的結(jié)合膽紅素。正常血清中它的含量占總膽紅素的20-30%。它的出現(xiàn)可能與肝臟功能成熟有關(guān)。當(dāng)肝病初期，它與血清中其它兩種膽紅素一起升高，但肝功能好轉(zhuǎn)時它的下降較其它兩種為緩慢，從而使其所占比例升高，有時可高達(dá)60%。

正常人血漿中膽紅素f1411.cn/Article/的總量不超過1mg/dl，其中未結(jié)合型約占4/5，其余為結(jié)合膽紅素。凡能引起膽紅素的生成過多，或使肝細(xì)胞對膽紅素處理能力下降的因素，均可使血中膽紅素濃度增高，稱高膽紅素血癥(hyperbilirubinemia)。膽紅素是金黃色色素，當(dāng)血清中濃度高時，則可擴散入組織，組織被染黃，稱為黃疸(jaundice)。特別是鞏膜或皮膚，因含有較多彈性蛋白，后者與膽紅素有較強親和力，故易被染黃。粘膜中含有能與膽紅素結(jié)合的血漿白蛋白，因此也能被染黃。黃疸程度與血清膽紅素的濃度密切相關(guān)。一般血清中膽紅素濃度超過2mg/dl時，肉眼可見組織黃染；當(dāng)血清膽紅素達(dá)7～8mg/dl以上時，黃疸即較明顯。有時血清膽紅素濃度雖超過正常，但仍在2mg/dl以內(nèi)，肉眼尚觀察不到鞏膜或皮膚黃染，稱為隱性黃疸。應(yīng)注意黃疸系一種常見體征，并非疾病名稱。凡能引起膽紅素代謝障礙的各種因素均可形成黃疸。根據(jù)其成因大致可分三類：①因紅細(xì)胞大量破壞，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)產(chǎn)生的膽紅素過多，超過肝細(xì)胞的處理能力，因而引起血中未結(jié)合膽紅素濃度異常增高者，稱為溶血性黃疸或肝前性黃疸；②因肝細(xì)胞功能障礙，對膽紅素的攝取結(jié)合及排泄能力下降所引起的高膽紅素血癥，稱為肝細(xì)胞性或肝原性黃疸；③因膽紅素排泄的通道受阻，使膽小管或毛細(xì)膽管壓力增高而破裂，膽汁中膽紅素返流入血而引起的黃疸，稱梗阻性黃疸或肝后性黃疸。三種類型黃疸的血、尿、糞的改變情況總結(jié)如表11－3。

表11-3　黃疸時血、尿、糞的改變