公開(公告)號
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CN1837243A
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公開(公告)日
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2006.09.27
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申請(專利)號
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CN200510110082.6
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申請日期
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2005.11.07
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專利名稱
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海螵蛸多糖CPS-1及其制備方法和用途
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主分類號
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C08B37/00(2006.01)I
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分類號
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C08B37/00(2006.01)I;A61K31/715(2006.01)I;A61P1/04(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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中國人民解放軍軍第二軍醫(yī)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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張建鵬;馮偉華;焦炳華;劉軍華;魏江洲;王 俊;徐紅麗
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地址
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200433上海市楊浦區(qū)翔殷路800號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海新天專利代理有限公司
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代理人
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衷誠宣
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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海螵蛸多糖CPS-1的制備方法,步驟如下: (1)制備水提取物溶液:將海螵蛸固體粉碎成粉末,加水煮沸8-10小時,趁熱抽濾得到濾液,將濾液濃縮,離心棄沉淀;上清液用氯仿與正丁醇的體積比為4∶1的sevage法萃取多次除蛋白,至水相不含蛋白質(zhì),得到水提取物溶液; (2)制備海螵蛸多糖粗品:將上述提取物溶液加乙醇沉淀過夜,離心棄上清,將沉淀復(fù)溶于蒸餾水,離心去不溶物,將上清再次醇沉,離心去上清;沉淀加蒸餾水溶解,流水透析至少36小時;將透析液冷凍干燥,得海螵蛸多糖粗品; (3)分離純化,制備海螵蛸多糖CPS-1:將所得海螵蛸多糖粗品熱水浴中溶于蒸餾水,離心收集上清,將不溶物再次熱水浴中溶于蒸餾水,離心棄沉淀,將兩次上清液合并,上樣于DEAESepharoseF.F離子交換柱,依次用蒸餾水、0.3mol/L氯化鈉溶液進(jìn)行洗脫,并用自動部分收集儀將洗脫液依次收集于試管中;使用體積比5∶1的硫酸-苯酚法分別對各個試管中的洗脫液取樣進(jìn)行顯色反應(yīng),然后用分光光度計測480nm處OD值;依次以管號為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),作洗脫曲線;根據(jù)洗脫曲線,將氯化鈉溶液洗脫峰部位的洗脫液合并并且濃縮之,流水透析至少36小時,冷凍干燥,得淡黃色固體;將淡黃色固體復(fù)溶于蒸餾水,用同樣方法依次上樣于SephacrylS-300分子凝膠柱和SepharoseCL-6B凝膠柱進(jìn)行分離純化,合并洗脫峰部位的洗脫液,然后取樣用HPLC檢測純度,觀察電腦生成的洗脫曲線,若為單一對稱峰,表明純度好,如果不是單一對稱峰,則將洗脫液濃縮后,再次用SephacrylS-300分子凝膠柱和SepharoseCL-6B凝膠柱進(jìn)行分離純化,直到HPLC的洗脫曲線為單一對稱峰;再將該洗脫液濃縮后冷凍干燥,即得本發(fā)明海螵蛸多糖CPS-1。
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摘要
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本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,是從海螵蛸中提取的多糖CPS-1及其制備方法和用途。制法為:將海螵蛸粉末水煮得提取液;將提取液醇沉,透析,冷凍干燥,得海螵蛸多糖粗品;再依次用DEAESepharose F.F離子交換柱、Sephacryl S-300分子凝膠柱、Sepharose CL-6B凝膠柱分離純化,得本發(fā)明海螵蛸多糖CPS-1。經(jīng)動物實(shí)驗(yàn),本發(fā)明多糖CPS-1具有治療潰瘍性結(jié)腸炎的作用,因此可用于制備治療潰瘍性結(jié)腸炎的藥物。
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國際公布
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