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丁公藤—總東莨菪內酯的含量測定方法—HPLC法

  
方法名稱:
  丁公藤—總東莨菪內酯的含量測定—HPLC法
應用范圍:
  測定丁公藤中總東莨菪內酯的含量
方法原理:
 本品粉末加乙醇回流提取,加3mol/L鹽酸溶液加熱水解,氯仿萃取后經液相色譜儀分離,在310nm處測定峰面積,外標法計算含量。
儀器設備及實驗條件:
 

儀器設備  日本島津LC-6A高效液相色譜儀,CR4-AX數(shù)據(jù)處理機,SPD-6A紫外檢測器;

色譜條件  色譜柱:日本島津CLC-ODS1(6mm×150mm,5μm)色譜柱,日本島津CLC-ODS1(6mm×10mm,5μm)保護柱;流動相:0.5%冰醋酸甲醇-水(26:55);流速:0.9mL/min;柱溫:50℃;檢測波長:310nm;內標:丙酮;記錄儀衰減4;紙速:4mm/min;進樣量:20μL。
試樣制備:
 

對照品溶液的制備  精密稱取東莨菪內酯對照品50mg50mL量瓶中,加甲醇定容。精密吸取4mL,置10mL量瓶中,加丙酮1mL,甲醇定容,避光冷藏。

供試品溶液的制備  精密稱取樣品粗粉約1g(過60目篩),加乙醇150mL,加熱回流8h,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2mL溶解,移置20mL具塞試管中,水浴中揮干,殘渣加鹽酸(3mol/L)10mL溶解,水浴中水解3h,取出放冷,移置分液漏斗中,容器用水適量洗滌3次(10,5,5mL),加氯化鈉2g溶解,氯仿提取4次(每次10mL),合并提取液,加無水硫酸鈉1g,靜置1h以上,濾過,濾液揮干,殘渣加甲醇2mL溶解,移入10mL量瓶中,甲醇洗滌容器并稀釋至刻度,避光冷藏。
操作步驟:
  按供試品溶液的制備方法制備,分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液各20μL,注入高效液相色譜儀,測定峰面積,計算含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:f1411.cn)
備注:
 
參考文獻:
  李梅,陸敏儀.HPLC法測定丁公藤中總東莨菪內酯量.中國中藥雜志.1999.24(1):41-43,64
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