三妙丸－脫皮甾酮含量的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定三妙丸中脫皮甾酮的含量。

本方法適用于三妙丸、牛膝等成藥。

將原藥中的有效成分提取后，所得溶液點(diǎn)樣展開(kāi)，經(jīng)薄層掃描法測(cè)定相應(yīng)峰面積，所得圖譜與對(duì)照品圖譜進(jìn)行對(duì)比分析，采用外標(biāo)二點(diǎn)法計(jì)算三妙丸中脫皮甾酮的含量。

1. 甲醇、正丁醇、乙醇、氧化鋁、乙酸乙酯（分析純)

2. 脫皮甾酮對(duì)照品

1 儀器

1.1 CS－9301雙波長(zhǎng)薄層掃描儀（日本島津)（Waters公司)

1.2 PBQ－型薄層鋪板儀（重慶)

2 薄層展開(kāi)條件

乙酸乙酯：乙醇＝4：1

3 薄層掃描條件

3.1波長(zhǎng)：雙波長(zhǎng)反射法鋸齒掃描，λs＝251nm，λ_R＝340nm

3.2狹縫：1.2×1.2mm，SX＝3，靈敏度中。

1 供試品溶液的制備

取干燥至恒重的三妙丸粗粉15g，精密測(cè)定，加乙醇150mL，于索氏提取器中水浴提取7小時(shí)，過(guò)濾后濾液水浴揮至少量時(shí)加沸水40mL，冷卻后用水飽和正丁醇萃至近無(wú)色時(shí)，合并萃取液，水浴上揮散至近干時(shí)加入氧化鋁1g，低溫烘干，研細(xì)后裝入制備好的氧化鋁（中性氧化鋁，25℃活化2h)柱中，柱內(nèi)徑0.8cm，柱長(zhǎng)7cm，樣品約高1cm，先用乙酸乙酯6mL，洗脫后棄去。再用乙醇洗脫收集黃色洗脫液棄去，收集隨后的無(wú)色乙醇洗脫液15mL，揮干，用甲醇定容至2mL，所得溶液作為供試品溶液，待用。

2 對(duì)照品溶液的配制

精密稱取脫皮甾酮對(duì)照品5.32mg，至5mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，所得溶液作為對(duì)照品溶液待用。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用定量毛細(xì)管分別精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μL分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，用乙酸乙酯－乙醇（4：1)飽和30min后展開(kāi)，晾干，紫外燈下定位，置薄層掃描儀中按上述掃描條件測(cè)定，將峰面積與進(jìn)樣量進(jìn)行線性回歸，標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取上述供試品溶液以及對(duì)照品溶液各一定體積，點(diǎn)于同一硅膠薄層板上，用乙酸乙酯（4：1)展開(kāi)，用外標(biāo)二點(diǎn)法按上述掃描條件進(jìn)行測(cè)定。

宋閆軍,尚聰敏. 牛膝及三妙丸中脫皮甾酮的薄層掃描測(cè)定.河南中醫(yī)藥學(xué)刊，2000，15（6)：9-10.