注射用鹽酸去甲萬古霉素—鹽酸去甲萬古霉素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定注射用鹽酸去甲萬古霉素中鹽酸去甲萬古霉素（C₆₅H₇₃Cl₂N₉O₂₄ ·HCl)的含量。

本方法適用于注射用鹽酸去甲萬古霉素。

供試品加水溶解并定量稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長280nm處檢測鹽酸去甲萬古霉素吸收值，計算出其含量。

1. 三乙胺緩沖液

2. 乙腈

3. 四氫呋喃

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按去甲萬古霉素峰計算不低于1500。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：梯度洗脫，見下表：

流動相A：三乙胺緩沖液 乙腈 四氫呋喃=96 3 1

流動相B：三乙胺緩沖液 乙腈 四氫呋喃=70 29 1

2.2 檢測波長：280nm

2.3 柱溫：室溫

1. 三乙胺緩沖液

取三乙胺6mL，加水2000mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.2

2. 稱取供試品

取裝量差異項下的內(nèi)容物，精密稱取適量。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取適量，加水溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將供試品加水使溶解后，并制成每1mL含1.0mg的溶液，搖勻，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長280nm處測定去甲萬古霉素的吸收值，計算出其含量。每1mg的C₆₅H₇₃Cl₂N₉O₂₄相當于1000去甲萬古霉素單位。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.468。