醫(yī)學(xué)論文范文:存活素siRNA表達(dá)質(zhì)粒對化療藥物抑癌作用的影響

結(jié)果見表4。秋水仙堿單藥能有效地抑制MCF��7細(xì)胞的生長。當(dāng)它與mU6/Survivin質(zhì)粒合用時，比較秋水仙堿單藥組各對應(yīng)濃度點，其細(xì)胞增殖抑制率明顯增大(P<0.01);與mU6/Survivin單質(zhì)粒組的細(xì)胞增殖抑制率相比較，其細(xì)胞增殖抑制率明顯增大(P<0.01)。然而，計算mU6/Survivin質(zhì)粒與不同濃度秋水仙堿的二者合用效應(yīng)Q值時發(fā)現(xiàn)，在本實驗采用的濃度范圍內(nèi)，所有對應(yīng)濃度點的Q值均<1，顯示出它們的合用不但沒有加合作用，反而具有一定程度的拮抗作用。DNA電泳結(jié)果則顯示mU6/Survivin質(zhì)粒在MCF��7細(xì)胞中促進(jìn)秋水仙堿誘導(dǎo)的DNA裂解(圖1)。

3 討論

順鉑、環(huán)磷酰胺、5�睩u和秋水仙堿都是廣譜的抗腫瘤化療藥物。順鉑是一種鉑金屬化合物，能與DNA鏈中鳥嘌呤發(fā)生交聯(lián)，使DNA形成鏈內(nèi)和鏈間交叉聯(lián)結(jié)，破壞DNA功能[4��5]。環(huán)磷酰胺是一種烷化劑，其需先經(jīng)分解為活化形式磷酰胺氮芥才有抑癌活性。磷酰胺氮芥與DNA鏈交叉連結(jié)，導(dǎo)致DNA的改變或斷裂而破壞DNA功能，阻礙DNA復(fù)制[6]。5�睩u是RNA鏈中重要組成部分尿嘧啶的類似物，取代尿嘧啶參與DNA的合成[7]。秋水仙堿則是一種微管蛋白結(jié)合劑，阻遏微管蛋白聚合，而微管蛋白在細(xì)胞有絲分裂紡錘體組裝中扮演重要角色[8]。

DNA復(fù)制和有絲分裂是細(xì)胞周期過程中的關(guān)鍵步驟。面對化療藥物造成的破壞，出于自我保護(hù)需要，腫瘤細(xì)胞第一反應(yīng)是要盡可能修復(fù)缺陷，維護(hù)其基因組的完整性。通過改變藥物引起的損傷DNA的修復(fù)能力，破壞凋亡信號通路，改變與腫瘤耐藥相關(guān)蛋白和酶的表達(dá)等等方式，對化療藥物治療產(chǎn)生耐藥從而使化療效果下降。例如，大約40%的乳腺癌患者表達(dá)藥物載體蛋白P�瞘p, P�瞘p的表達(dá)升高誘導(dǎo)某些化療藥物的耐藥性，是一種典型的多藥耐藥蛋白。又如，順鉑誘導(dǎo)存活素 mRNA和蛋白質(zhì)增加，可能與其腫瘤耐藥相關(guān)[9]。但如果損傷實在無法修復(fù)，腫瘤細(xì)胞的第二反應(yīng)則是動員相關(guān)機制誘導(dǎo)細(xì)胞實行死亡程序。

相關(guān)文獻(xiàn)顯示，存活素表達(dá)與腫瘤放療化療耐受相關(guān)，化療藥物治療后存活素表達(dá)水平明顯升高[10]。存活素及其家族在多藥耐受細(xì)胞中過表達(dá)[11]，調(diào)節(jié)存活素表達(dá)可以影響P�瞘p的穩(wěn)定性和活性[12]。本實驗結(jié)果顯示，siRNA表達(dá)質(zhì)粒mU6/survivin剔降MCF��7細(xì)胞中存活素的表達(dá)，對靶向DNA合成復(fù)制和損傷后修復(fù)的藥物如順鉑、環(huán)磷酰胺和5�睩u的抗癌活性具有顯著的加強作用，可見，降低和逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞中存活素的過表達(dá)，可能意味著降低了腫瘤細(xì)胞的抗藥性能，使腫瘤化療藥物的細(xì)胞毒性得到了充分體現(xiàn)。

與此同時，存活素調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的分裂和凋亡[13],其siRNA誘導(dǎo)凋亡或使細(xì)胞對藥物或死亡配體/受體誘導(dǎo)的凋亡敏感[14]，增強腫瘤對放療的敏感性[15]，抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲性[16]，部分逆轉(zhuǎn)腫瘤的惡性表征。本課題組的結(jié)果還顯示，mU6/survivin能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞多核化和核巨型化，導(dǎo)致細(xì)胞裂亡[17]。由此可見，mU6/survivin沉默MCF��7細(xì)胞中存活素的表達(dá)，啟動和引導(dǎo)腫瘤細(xì)胞執(zhí)行各種死亡通路，可能是其增強腫瘤化療藥物抗癌效果的作用機制之一醫(yī)學(xué) 全在.線提供f1411.cn。

有報道顯示，存活素過表達(dá)通過影響微管動力學(xué)和抑制凋亡提高對微管靶向藥物的耐受性[18]。本結(jié)果顯示，剔降MCF��7細(xì)胞中存活素的表達(dá)，雖然從表面數(shù)值看來，秋水仙堿抑癌效果比單藥或單純質(zhì)粒作用要強一些，但二者藥效不具加合性。也就是說，存活素表達(dá)缺失不能增強癌細(xì)胞MCF��7對秋水仙堿細(xì)胞毒性的敏感度，奇怪的是，這種缺失卻增強了秋水仙堿誘導(dǎo)的MCF��7癌細(xì)胞DNA裂解的涂布現(xiàn)象。由此看來，mU6/survivin對秋水仙堿抗癌作用的影響不能單從短期作用的細(xì)胞毒性角度得以精確分析和反映，或許存活素 siRNA 對微管靶向藥物的影響來得更慢一些。

總而言之，siRNA表達(dá)質(zhì)粒mU6/survivin使腫瘤對化療藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性更加敏感。在應(yīng)用siRNA 干擾等技術(shù)解除腫瘤細(xì)胞中存活素的功能的基礎(chǔ)上，進(jìn)行腫瘤化療藥物治療，可以成為未來腫瘤治療學(xué)發(fā)展的一個方向。本實驗的數(shù)據(jù)可以為腫瘤治療新方法新概念的建立提供實驗依據(jù)。

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