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0引言
隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和生活方式改變，妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)發(fā)病率逐漸上升，已經(jīng)成為威脅母嬰健康的嚴(yán)重疾�。�1］. 第三屆國(guó)際妊娠期糖尿病工作會(huì)議將GDM定義為妊娠期首次發(fā)生或發(fā)現(xiàn)的不同程度的糖代謝異常 ［2-3］. GDM對(duì)母嬰影響較大，使自然流產(chǎn)增加達(dá)15%~30%，妊娠高血壓綜合征發(fā)病率為正常孕婦的3~5倍，羊水過(guò)多發(fā)病率為13%~36%，巨大胎兒發(fā)病率為25%~40%，還會(huì)增加孕婦感染、酮癥酸中毒及早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、圍產(chǎn)兒死亡、胎兒畸形等發(fā)病率，而且孕婦將來(lái)患糖尿病機(jī)會(huì)增加，大約50%以上最終成為糖尿病患者［4］. 但GDM發(fā)病機(jī)制仍不清楚. 我們觀察中藥麥冬在改善胰島素抵抗（IR)狀態(tài)中的作用，探討其防治GDM的機(jī)制，為GDM防治提供理論指導(dǎo)及實(shí)驗(yàn)證據(jù).
1材料和方法
1.1材料
選妊娠10 d大鼠（暨南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體質(zhì)量180~220 g. 中藥麥冬購(gòu)于廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，西藥羅格列酮購(gòu)于暨南大學(xué)附屬華僑醫(yī)院. 胰島素放射免疫試劑盒采用北京北方生物技術(shù)研究所產(chǎn)品. 腫瘤壞死因子（TNFα)、瘦素（leptin)及PCR markers引物由華美生物工程公司提供，逆轉(zhuǎn)錄酶、Tag酶及緩沖液購(gòu)自Promega公司醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站f1411.cn.
1.2方法
1.2.1動(dòng)物模型建立將上述大鼠高熱量飼料(碳水化合物50%,蛋白質(zhì)13%,動(dòng)物油脂肪30%,纖維素在內(nèi)的其他成分7%)喂養(yǎng)8 wk后，給予鏈脲佐菌素(STZ) 35 mg/kg［STZ用0.1 mol/L檸檬酸-檸檬酸鈉溶液(pH 4.0)稀釋成10 mL/L的溶液］一次性尾靜脈注射,注射后72 h,測(cè)空腹血糖(FBG)穩(wěn)定在13.5 mmol/L以上者為造模成功.
1.2.2胰島素抵抗評(píng)價(jià)采用鉗夾試驗(yàn)檢測(cè)大鼠胰島素敏感性，判斷IR模型是否復(fù)制成功. 步驟：①插管前大鼠禁食12 h，第2日上午8：00時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，用藥大鼠插管前停藥24 h，水合氯醛(10 mL／kg)腹腔注射麻醉. 無(wú)菌狀態(tài)下分離暴露大鼠右側(cè)頸靜脈和左頸動(dòng)脈，進(jìn)行插管，然后取1.5 mL血液進(jìn)行血漿胰島素檢測(cè). ②將大鼠頸靜脈導(dǎo)管接到三通管一端，另二端分別接上輸注胰島素和葡萄糖的輸液管,頸動(dòng)脈導(dǎo)管接一裝有肝素生理鹽水(5萬(wàn)U／L)的注射器. 先取頸動(dòng)脈血樣測(cè)定基礎(chǔ)血糖，然后以恒定速度輸注胰島素，每5 min測(cè)定血糖一次，當(dāng)血糖值超出(基礎(chǔ)值±0.5)mmol／L的范圍時(shí)，輸注葡萄糖，使血糖值控制在5.5 mmol／L. l h后當(dāng)連續(xù)3次血糖值均在上述范圍時(shí)，則達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài). 連續(xù)上述過(guò)程，直至120 min為止. ③在鉗夾期間60~120 min,每隔5 min測(cè)定1次,12個(gè)GIR值求平均值.
1.2.3分組正常大鼠組（對(duì)照組)，隨機(jī)將40只妊娠糖尿病胰島素抵抗大鼠分為4組（n=10)：GDM大鼠組、GDM大鼠＋麥冬組、GDM大鼠＋羅格列酮和GDM大鼠＋羅格列酮+麥冬組.
1.2.4給藥及標(biāo)本采集
①給藥: 治療組給予麥冬灌胃，0.25 g/(kg·d). 西藥對(duì)照組給予羅格列酮灌胃，5 mg/(kg·d). 空白對(duì)照組及正常對(duì)照組均給予同體積的生理鹽水灌胃. 正常及空白對(duì)照組大鼠以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng). ②標(biāo)本采集: 從靜脈采血后于實(shí)驗(yàn)的第12 wk處死動(dòng)物，并立即取腹腔脂肪組織. 按實(shí)驗(yàn)需要制備血清及石蠟切片等.
