動脈粥樣硬化:第二節(jié)　載脂蛋白B族

體外實驗表明，載脂蛋白B是難溶于水的蛋白質(zhì)。目前所知，ApoB族可分為兩個亞類，即ApoB₄₈和ApoB₁₀₀。ApoB主要成份是B₁₀₀，其次為B₄₈，其他形式如ApoB₇₅，ApoB₄₁，ApoB₃₆等均為ApoB₁₀₀的不同降解產(chǎn)物。

一、ApoB100

從1966年Margoli和Landgon開始研究ApoB₁₀₀的結(jié)構(gòu)，不同實驗室以特異性蛋白水解酶或化學(xué)裂解法研究ApoB的結(jié)構(gòu)，所得ApoB純度均不盡人意。作者曾于1986年采用特殊的沉淀抽提法獲得高純度的血清ApoB₁₀₀純品，以化學(xué)裂解法在國內(nèi)首先報道了ApoB₁₀₀純品的氨基酸組成，與Ologsson報道的結(jié)果基本一致，如表3-1所示。

表1 人的ApoB₁₀₀的氨基酸組成

1986年楊朝諭采用生物化學(xué)方法,得到人LDL的ApoB₁₀₀純品并測出了ApoB₁₀₀一級結(jié)構(gòu)的氨基酸排列順序,其結(jié)果與從cDNA推導(dǎo)的序列完全一致,從而解決了二十余年懸而未決的難題。

ApoB₁₀₀是單鏈糖蛋白，分子量為510kD，主要在肝臟，少數(shù)在小腸合成。ApoB₁₀₀包括27個（或24)氨基酸信號肽和4536個氨基酸殘基的成熟單體蛋白。1986年ApoB₁₀₀的全部氨基酸殘基排列順序結(jié)構(gòu)已闡明。ApoB₁₀₀分子中含有25個Cys殘基，其中有11個Cys殘基集中分布在前面500氨基酸組成區(qū)域，形成鏈內(nèi)二硫健，所以N端高度交聯(lián)成典型球形結(jié)構(gòu)，Cys殘基通過硫脂鍵與軟脂酸硬脂酸以共價鍵相結(jié)合，使ApoB牢固地連接著脂質(zhì)成份。ApoB₁₀₀中對脂類結(jié)合的必要的結(jié)構(gòu)區(qū)域在2035～2506和4002～4527氨基酸殘基之間，這兩個結(jié)構(gòu)區(qū)域重復(fù)出現(xiàn)兩性親脂α-螺旋區(qū)段。另有一種結(jié)合脂質(zhì)的重要結(jié)構(gòu)是含疏水和親水性氨基酸交替排列兩性親脂β-折疊結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)分布在整個分子序列中，但集中于四個富含脯氨酸域，這種富含脯氨酸的重復(fù)序列是ApoB₁₀₀所特有的，使ApoB₁₀₀能夠?qū)⒘字瑐?cè)鏈深埋其間并使之緊密結(jié)合。由于ApoB₁₀₀的兩性α-螺旋和富含脯氨酸的疏水肽及可被脂�；�的Cys殘基形成特殊結(jié)構(gòu)，使得ApoB₁₀₀能夠與單層極性脂牢固地結(jié)合并有許多脂質(zhì)結(jié)合區(qū)，并使其在VLDL和LDL從分泌到被清除的整個過程中，ApoB₁₀₀不在脂質(zhì)白分子間轉(zhuǎn)換，這是與其他載脂蛋白不同之處。LDL上的ApoB₁₀₀結(jié)構(gòu)如圖3-1所示。

圖3-1 LDL上的ApoB₁₀₀結(jié)構(gòu)圖

ApoB₁₀₀生理功能有：①合成裝配和分泌富含甘油三酯的VLDL；②是LDL的結(jié)構(gòu)蛋白；③是LDL受體的配體，調(diào)節(jié)LDL從血漿中的清除速率。

二、ApoB48

Apof1411.cn/yishi/B₄₈因分子量是ApoB₁₀₀的48%而得名。存在于CM中，不與其他脂蛋白分子交換。ApoB₄₈在小腸合成，是組裝CM所必需的載脂蛋白。由小腸細(xì)胞分泌后進(jìn)入淋巴液，并通過胸導(dǎo)管再進(jìn)入血液循環(huán)，CM再分布到毛細(xì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞，主要是骨骼肌和脂肪組織的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，脂肪酶可水解CM中甘油三酯的80%～90%，剩下的脂蛋白顆粒則稱為CM殘粒，再送到肝臟，被肝脂酶進(jìn)一步水解代謝，最后被能識別ApoE的殘粒受體攝取。該殘粒受體是LDL受體，還是LDL受體相關(guān)蛋白或其他蛋白質(zhì)，目前還不清楚。

ApoB₄₈在血漿中生物半壽期僅5～10min，因為分解速度很快，在血清中的濃度很低，約相當(dāng)于ApoB₁₀₀的0.1%。經(jīng)SDS-PAGE電泳染色在VLDL組分中，仍可檢出痕量的ApoB₄₈。攝入含脂肪豐富的食物后，ApoB₄₈/ApoB₁₀₀比值明顯增加。