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動(dòng)脈粥樣硬化:第三節(jié) 基因序列的突變分析

目前對于基因序列的突變分析國內(nèi)外多采用直接測序方法,直觀又準(zhǔn)確。例如,1996年Sakai等報(bào)道了對高α脂蛋白血癥患者CETP基因內(nèi)含子10和內(nèi)含子14片段序列的突變分析。其方法為:采取患者全血根據(jù)Kunkel等方法準(zhǔn)備基因DNA;CETP基因內(nèi)含子10的splice donor位點(diǎn)的PCR擴(kuò)增引…

目前對于基因序列的突變分析國內(nèi)外多采用直接測序方法,直觀又準(zhǔn)確。例如,1996年Sakai等報(bào)道了對高α脂蛋白血癥患者CETP基因內(nèi)含子10和內(nèi)含子14片段序列的突變分析。其方法為:采取患者全血根據(jù)Kunkel等方法準(zhǔn)備基因DNA;CETP基因內(nèi)含子10的splice donor位點(diǎn)的PCR擴(kuò)增引物為:5"-CCCTGCGAATTCTTCTTCTGAGGAGTGGAC-3’和5"-ATAAf1411.cn/zhuyuan/TTGCATCCATTGGTGGTGTTSTTGGC-3’,內(nèi)含子14的splice donor位點(diǎn)的PCR擴(kuò)增引物為:5’-CTTCTGTGCTCCAGGGAGGACTCACCATGG-3’和5’-GGCACCCAGTTTCCCCTCCAGCCCACACAT-3’其中分別含有用于克隆的EcorI和Bamwww.med126.comHI酶切后,亞克隆人BluescriptllKS(一)中;最后根據(jù)Sanger雙脫氧核苷酸終點(diǎn)法測定DNA序列。

(章曉聯(lián))

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