公開(公告)號(hào)
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CN101129405A
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公開(公告)日
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2008.02.27
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200710062487.6
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申請(qǐng)日期
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2007.07.31
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專利名稱
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一種治療習(xí)慣性流產(chǎn)的生物學(xué)制劑
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主分類號(hào)
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A61K35/14(2006.01)I
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分類號(hào)
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A61K35/14(2006.01)I;A61P15/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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崔 澂
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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崔 瀓;楊彥忠
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地址
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050081河北省石家莊市中山西路450號(hào)白求恩軍醫(yī)學(xué)院訓(xùn)練部教務(wù)科
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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石家莊冀科專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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李羨民;郭紹華
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國省代碼
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河北;13
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主權(quán)項(xiàng)
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一種治療習(xí)慣性流產(chǎn)的生物學(xué)制劑,其特征在于,它以男性外周血為原材料,并按下述步驟進(jìn)行: a.培養(yǎng)男性外周血T細(xì)胞: 抽取健康成年男性外周血50mi;玻璃球脫纖維Hanks液1.5倍稀釋,分離淋巴細(xì)胞,收集單個(gè)核細(xì)胞;Hanks液清洗,用RPMI-1640完全培養(yǎng)液重懸、計(jì)數(shù),并調(diào)整細(xì)胞濃度至2×106/ml,加入植物血凝素(PHA),使終濃度為100μg/ml;37℃培養(yǎng)72h;收集培養(yǎng)液的上清,4℃保存?zhèn)溆茫? b.制備T細(xì)胞exosomes: 取上述外周血T細(xì)胞培養(yǎng)上清,以1500g離心10min去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片;分子量100 000超濾管過濾濃縮5倍后;以30mg/ml蔗糖/D2O為密度墊,以100 000g超速低溫離心75min,收集底部的緩沖墊;PBS稀釋,100 000g超速低溫離心75min,獲得exosomes;0.22μm無菌濾膜過濾分裝,-80℃保存?zhèn)溆谩?
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摘要
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一種治療習(xí)慣性流產(chǎn)的生物學(xué)制劑,屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。其技術(shù)方案是,抽取健康成年男性外周血;玻璃球脫纖維Hanks液1.5倍稀釋,分離淋巴細(xì)胞,收集單個(gè)核細(xì)胞;Hanks液清洗,用RPMI-1640完全培養(yǎng)液重懸、計(jì)數(shù),并調(diào)整細(xì)胞濃度至2×106/ml,加入植物血凝素,37℃培養(yǎng)72h;收集培養(yǎng)液的上清,以離心超濾及蔗糖密度梯度離心法制備T細(xì)胞exosomes;用無菌濾膜過濾分裝,-80℃保存即得成品。本發(fā)明能有效地誘導(dǎo)機(jī)體的免疫耐受,克服了免疫細(xì)胞過繼療法誘導(dǎo)免疫耐受的諸多不足,使臨床應(yīng)用更為簡(jiǎn)單易行;制劑可大規(guī)模工業(yè)化制備,使質(zhì)量控制更為穩(wěn)定、可控性更強(qiáng)。將其應(yīng)用于治療習(xí)慣性流產(chǎn),取得良好的療效。
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國際公布
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