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魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑

公開(公告)號(hào) CN1173741C  
公開(公告)日 2004.11.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN00113924.X  
申請(qǐng)日期 2000.09.20  
專利名稱 魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑  
主分類號(hào) A61K39/395  
分類號(hào) A61K39/395;A61P43/00  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 黃威權(quán);夏永娟;李元;李別虎  
地址 710032 陜西省西安市長(zhǎng)樂(lè)西路17號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 陜西電子工業(yè)專利事務(wù)所  
代理人 程曉霞  
國(guó)省代碼 陜西;61  
主權(quán)項(xiàng) 魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑,其特征是按照如下方法制備:將鰻弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛(ài)德華菌進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng),再將培養(yǎng)后的菌液腹腔注射免疫小Balb/c,取免疫后小鼠脾細(xì)胞和SP2/0骨髓細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,將細(xì)胞融合的細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng),用酶聯(lián)免疫反應(yīng)法檢測(cè)陽(yáng)性克隆,將確定為陽(yáng)性的孔以有限稀釋法,進(jìn)行克隆化,再將陽(yáng)性克隆的雜交瘤細(xì)胞株擴(kuò)增培養(yǎng),腹腔注射接種到Balb/c小鼠制備出腹水型單抗;將以上腹水型單抗以酶聯(lián)免疫反應(yīng)法進(jìn)行效價(jià),亞類及交叉試驗(yàn),挑選效價(jià)為10-5~1×10-7的單克隆抗體,以每只小鼠10~100μg的量,腹腔注射免疫小鼠;然后進(jìn)行細(xì)胞融合,篩選出能穩(wěn)定分泌抗獨(dú)特型單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,將細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng),調(diào)整為1×106個(gè)/ml,以每只小鼠0.5ml的量,腹腔注射接種到Balb/c小鼠,制備腹水型單克隆抗體;用以上鰻弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛(ài)德華菌的抗獨(dú)特型單抗以1∶  
摘要 魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單克隆抗體疫苗制劑,涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將鰻弧菌、創(chuàng)傷弧菌、溶藻弧菌、遲緩愛(ài)德華菌免疫小鼠,進(jìn)行細(xì)胞融合,再克隆化,制備出特異性很強(qiáng),且效價(jià)較高的單抗,進(jìn)行純化,再免疫小鼠,制備抗獨(dú)特型單抗,挑選出保護(hù)率較高的抗獨(dú)特型單抗以一定比例配制成魚病多聯(lián)抗獨(dú)特型單抗疫苗制劑。對(duì)養(yǎng)殖魚起很好的免疫保護(hù)作用,不污染環(huán)境,不會(huì)通過(guò)食物鏈對(duì)人類造成損害。  
國(guó)際公布  
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