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用基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脫氧核苷的方法

公開(公告)號(hào) CN101067145A  
公開(公告)日 2007.11.07  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710038633.1  
申請(qǐng)日期 2007.03.29  
專利名稱 用基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脫氧核苷的方法  
主分類號(hào) C12P19/38(2006.01)I  
分類號(hào) C12P19/38(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 復(fù)旦大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 梁勝華  
地址 200433上海市邯鄲路220號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海正旦專利代理有限公司  
代理人 陸 飛;盛志范  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種用基因工程菌合成6-甲基嘌呤2′-脫氧核苷的方法,其特征在于包括如下步驟: (A)利用重組DNA技術(shù),構(gòu)建嘌呤核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌,得到高效表達(dá)嘌呤核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶的基因工程菌; (B)以嘧啶核苷磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶催化嘧啶脫氧核苷和6-甲基嘌呤合成6-甲基嘌呤2′-脫氧核苷; (C)6-甲基嘌呤2′-脫氧核苷的分離與純化。  
摘要 本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種以DNA重組技術(shù)構(gòu)建基因工程菌,并利用該基因工程菌合成6-甲基嘌呤-2′-脫氧核苷(6-Methylpurine-2′-Deoxyriboside,MePdR)的方法。包括如下步驟:(A)利用重組DNA技術(shù),構(gòu)建嘌呤核苷磷酸化酶和嘧啶核苷磷酸化酶表達(dá)載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌,得到高效表達(dá)嘌呤核苷磷酸化酶和胸腺嘧啶核苷磷酸化酶的基因工程菌。(B)以嘧啶核苷磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶催化嘧啶脫氧核苷和6-甲基嘌呤合成6-甲基嘌呤2′-脫氧核苷。(C)6-甲基嘌呤2′-脫氧核苷的分離與純化。利用本發(fā)明的方法催化合成MePdR,具有簡(jiǎn)單,高效,周期短,低成本,符合環(huán)保要求等特點(diǎn),適合于工業(yè)化生產(chǎn)。  
國(guó)際公布  
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