| 公開(公告)號(hào) | CN1137135C |
| 公開(公告)日 | 2004.02.04 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN97112602.X |
| 申請(qǐng)日期 | 1997.05.16 |
| 專利名稱 | 來源于八棱絲瓜的核糖體失活蛋白 |
| 主分類號(hào) | C07K7/06 |
| 分類號(hào) | C07K7/06;C07K1/36;A61K38/08;A61P35/00 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院福建物質(zhì)結(jié)構(gòu)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 陳明晃;林玉娟;葉曉明 |
| 地址 | 350002 福建省福州市鼓樓區(qū)山頭角123號(hào) |
| 頒證日 | 2004.02.04 |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 福建;35 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種來源于八棱絲瓜的核糖體失活蛋白-八棱絲瓜蛋白1，其特征在于，N端氨基酸順序?yàn)椋篈sp-Val-Ser-Phe-Ser-，分子量為28KD，具有強(qiáng)烈抑制細(xì)胞內(nèi)核糖體蛋白質(zhì)合成的活性，該蛋白是由包括以下七個(gè)步驟分離得到的核糖體失活蛋白：(1)八棱絲瓜籽經(jīng)粉碎后，加鹽溶液抽提、勻漿兩次，置4℃過夜；(2)加1N鹽酸調(diào)pH3.8，靜置2小時(shí)，過濾或離心得上清液；(3)進(jìn)一步加固體硫酸銨分級(jí)沉淀，離心得40％-95％飽和度的硫酸銨沉淀；(4)上述硫酸銨沉淀對(duì)pH6.5，5mM磷酸鈉緩沖液透析24h，超速離心得上清液；(5)上清液上樣CM-52纖維素柱，用0-0.3M NaCl，pH6.5，5mM磷酸鈉緩沖液梯度洗脫，280nM實(shí)時(shí)檢測流出液，收集峰3；(6)合并峰3，對(duì)pH7.2，10mM磷酸鈉緩沖液透析，透析液加入DEAE纖維素-52攪拌后過濾；(7)濾液再上CM-52纖維素柱，用0-0.5M NaCl，pH7.2，10mM磷酸鈉緩沖液梯度洗脫，280nM實(shí)時(shí)檢測流出液，收集一尖峰，該峰即為純化的八棱絲瓜蛋白1。 |
| 摘要 | 從葫蘆科植物八棱絲瓜種子中分離出2種核糖體失活蛋白—八棱瓜蛋白1和2，其分子量都是28KD(SDS-PAGE檢測)。八棱瓜蛋白1的N端5個(gè)氨基酸殘基為DVSFS。采用了簡化的溫和的提取方法，獲得了高產(chǎn)率，高純度，高活性的蛋白。該蛋白具有作為引產(chǎn)藥物和抗病毒制劑的商業(yè)應(yīng)用，并可作為N-糖苷酶用于分子生物學(xué)和免疫學(xué)研究。 |
| 國際公布 |
