| 公開(公告)號 | CN1557964A |
| 公開(公告)日 | 2004.12.29 |
| 申請(專利)號 | CN200410016012.X |
| 申請日期 | 2004.01.19 |
| 專利名稱 | 一種芯片原位聚合酶鏈反應(yīng)檢測目標(biāo)基因的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院上海微系統(tǒng)與信息技術(shù)研究 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 趙建龍;高秀麗;楊劍波;景奉香 |
| 地址 | 200050上海市長寧區(qū)長寧路865號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 潘振甦 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種芯片原位PCR檢測目標(biāo)基因的方法，其特征在于根據(jù)目標(biāo)基因設(shè)計一對特異性引物，上游引物的5’端連接有15-20個堿基長的多聚胸腺嘧啶結(jié)構(gòu)，這種上游引物的5’端再經(jīng)氨基修飾后點于醛基修飾的玻片上，然后以待測樣品的基因組脫氧核糖核酸為模板，在芯片上進(jìn)行原位PCR反應(yīng)，利用DNA聚合酶的特異性來實現(xiàn)對特定目的片段的擴(kuò)增，在引物延伸過程中加入地高辛標(biāo)記的dUTP，隨后采用傳統(tǒng)酶標(biāo)技術(shù)對延伸產(chǎn)物進(jìn)行檢測，使檢測結(jié)果通過底物顏色呈現(xiàn)于尼龍膜或硝酸纖維膜表面，檢測結(jié)果可直接目測或用廉價的光學(xué)掃描儀讀取數(shù)據(jù)，從而實現(xiàn)樣品的處理、標(biāo)記同步化和原位檢測。 |
| 摘要 | 一種利用基因芯片的檢測方法，是在芯片表面進(jìn)行原位PCR反應(yīng)對待測基因進(jìn)行檢測的方法。將普通PCR反應(yīng)中的上游引物連接poly(T)的臂結(jié)構(gòu)后，5’端氨基修飾后連接于醛基修飾的玻片等載體上，在芯片表面上進(jìn)行的一種芯片原位PCR反應(yīng)。利用本發(fā)明能有效解決目前基因芯片雜交中小片斷探針和待測大片段不能有效雜交的問題，實現(xiàn)了樣品處理和標(biāo)記同步化和原位檢測。本發(fā)明可用于SNP檢測、轉(zhuǎn)基因植物檢測、疾病檢測等方面。 |
| 國際公布 |
