公開(公告)號 | CN1706937A |
公開(公告)日 | 2005.12.14 |
申請(專利)號 | CN200410020708.X |
申請日期 | 2004.06.09 |
專利名稱 | 一種海綿細胞的微載體三維培養(yǎng)方法 |
主分類號 | C12N5/06 |
分類號 | C12N5/06;C12N11/00 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 張 衛(wèi);趙權(quán)宇;虞星炬;金美芳 |
地址 | 116023遼寧省大連市中山路457號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 沈陽科苑專利商標(biāo)代理有限公司 |
代理人 | 許宗富;周秀梅 |
國省代碼 | 遼寧;21 |
主權(quán)項 | 一種海綿細胞的微載體三維培養(yǎng)方法,其特征在于:1)在改進人工海水中接種微載體和海綿細胞進行培養(yǎng);改進人工海水的水溶液中包括:Na+300~500mM,SO42-5.0~10.0mM,HCO3-0.1~0.5mM,K+5.0~15.0mM,TrisHCl10.0~30.0mM,Cl-300~500mM,Mg2+20~60mM,Ca2+5.0~20mM,SiO32-5~150μM,F(xiàn)e3+30~120μM,Zn2+0.5~4μM,C6H5O73-30~120μM,pH7.6~8.2,PHA的重量濃度為5~2.5%;2)在海綿細胞培養(yǎng)5~8天后,向上述改進人工海水中添加有機碳源、有機氮源和維生素C,使它們的濃度分別為5~20μM,形成新的培養(yǎng)液體系;3)在步驟2)之后,每隔2~3天更換培養(yǎng)液體積的50~80%,用改進的人工海水替換并添加有機碳源和氮源使其最終濃度達到20~50μM,添加維生素C使其最終濃度達到10~20μM,在此條件下海綿細胞能進行正常生長。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及海洋無脊椎動物細胞的培養(yǎng),具體地說是一種海綿細胞的微載體三維培養(yǎng)方法;1)在改進人工海水中接種微載體和海綿細胞進行培養(yǎng);改進人工海水的水溶液中包括:Na+,SO42-,HCO3-,K+,Tris HCl,Cl-,Mg2+,Ca2+,SiO32-,F(xiàn)e3+,Zn2+,C6H5O73-,pH 7.6~8.2,PHA;2)在海綿細胞培養(yǎng)5~8天后,向上述改進人工海水中添加有機碳源、有機氮源和維生素C,形成新的培養(yǎng)液體系;3)在步驟2)之后,每隔2~3天更換培養(yǎng)液,并添加有機碳源和氮源,維生素C,在此條件下海綿細胞能進行正常生長。本發(fā)明優(yōu)點為:可大規(guī)模生產(chǎn)藥源,可選材料更廣泛,應(yīng)用前景好。 |
國際公布 |