網(wǎng)站首頁(yè)
醫(yī)師
藥師
護(hù)士
衛(wèi)生資格
高級(jí)職稱(chēng)
住院醫(yī)師
畜牧獸醫(yī)
醫(yī)學(xué)考研
醫(yī)學(xué)論文
醫(yī)學(xué)會(huì)議
考試寶典
網(wǎng)校
論壇
招聘
最新更新
網(wǎng)站地圖
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 >> 藥學(xué)理論 >> 中國(guó)藥品專(zhuān)利文獻(xiàn) >> 正文:人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系及其建立方法專(zhuān)利檢索:專(zhuān)利號(hào)/專(zhuān)利人/發(fā)明人
    

人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系及其建立方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1252259C  
公開(kāi)(公告)日 2006.04.19  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200410019057.2  
申請(qǐng)日期 2004.04.20  
專(zhuān)利名稱(chēng) 肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系及其建立方法  
主分類(lèi)號(hào) C12N15/08(2006.01)I  
分類(lèi)號(hào) C12N15/08(2006.01)I;C12N13/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 南開(kāi)大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 葉麗虹;張曉東;秦宵然;朱惠芳;王洪輝  
地址 300071天津市衛(wèi)津路94號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 天津市學(xué)苑有限責(zé)任專(zhuān)利代理事務(wù)所  
代理人 解松凡  
國(guó)省代碼 天津;12  
主權(quán)項(xiàng) 一種人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系,其特征是所述人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系與親本細(xì)胞系H7402形成配對(duì)關(guān)系,所述人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系是用下述方法建立的:(1)接種SCID:將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人肝癌細(xì)胞H7402單細(xì)胞懸液,細(xì)胞數(shù)量為1~4×107/0.2ml接種于經(jīng)Cs137γ射線照射過(guò)的SCID鼠腋背部皮下;(2)確認(rèn)轉(zhuǎn)移部位:將荷瘤SCID鼠處死,對(duì)各個(gè)組織的病理切片進(jìn)行顯微鏡下觀察,確定其轉(zhuǎn)移部位為臟;(3)原代培養(yǎng):在接種人肝癌細(xì)胞H7402后55-67天,將荷瘤SCID鼠處死,無(wú)菌解剖,取出肺臟,進(jìn)行原代培養(yǎng),方法如下:用pH7.2的D-Hanks生理緩沖液漂洗組織塊3次,去除血液、脂肪、神經(jīng)組織、結(jié)締組織和壞死組織;將肺組織剪切成0.5-5mm3小塊;接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,使瓶底向上,在37℃孵箱內(nèi),空氣中含體積百分比為5%的CO2條件下培養(yǎng);2-4小時(shí)后,向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入8-10ml內(nèi)含20%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液,靜置培養(yǎng),原代培養(yǎng)每3天換液一次,待從組織塊生長(zhǎng)出大量的貼壁細(xì)胞,去除已漂浮的組織塊和殘留的血細(xì)胞;(4)傳代培養(yǎng):將去掉組織的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng),具體步驟如下:移去原代培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞培養(yǎng)液,向培養(yǎng)瓶中加入2ml質(zhì)量體積百分比為0.25%胰蛋白酶溶液,置37℃孵箱中2-3分鐘,觀察到細(xì)胞出現(xiàn)回縮、細(xì)胞間隙增大,吸除胰蛋白酶溶液,加入8-10ml內(nèi)含20%胎牛血清RPMIl640培養(yǎng)液,使之形成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),接種于新的培養(yǎng)瓶,當(dāng)細(xì)胞傳代到第三代時(shí),加入的RPMI1640培養(yǎng)液內(nèi)含胎牛血清為10%,細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)逐漸均一,即建立了一種來(lái)源于親本人肝癌細(xì)胞H7402的肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系。  
摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系及其建立方法,所述人肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系是用下述方法建立的:將人肝癌細(xì)胞H7402單細(xì)胞懸液接種于SCID鼠;確認(rèn)轉(zhuǎn)移部位為肺臟;原代培養(yǎng);傳代培養(yǎng),當(dāng)細(xì)胞傳代到第三代以后,將培養(yǎng)液中的胎牛血清濃度降為10%,細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)逐漸均一,即建立了一種來(lái)源于親本人肝癌細(xì)胞H7402的肝癌轉(zhuǎn)移亞克隆細(xì)胞系,并與親本細(xì)胞形成配對(duì)關(guān)系,為肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的研究提供新的實(shí)驗(yàn)材料;可用于篩選肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因;可用于篩選肝癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白;可用于篩選抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物;可用于腫瘤轉(zhuǎn)移分子機(jī)理的研究;可用于進(jìn)行腫瘤轉(zhuǎn)移DNA疫苗的研究。  
國(guó)際公布  
...
評(píng)論加載中...
網(wǎng) 名: (必填項(xiàng))
評(píng)論內(nèi)容:
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠(chéng)聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學(xué)論壇 - 醫(yī)學(xué)博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP備12017320號(hào)-1
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會(huì)員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗(yàn)證