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抗血小板聚集、低免疫原性重組葡激酶突變體及其制備方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1286974C  
公開(kāi)(公告)日 2006.11.29  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200410016443.6  
申請(qǐng)日期 2004.02.19  
專利名稱 抗血小板聚集、低免疫原性重組葡激酶突變體及其制備方法  
主分類號(hào) C12N9/70(2006.01)I  
分類號(hào) C12N9/70(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I;A61K38/43(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 復(fù)旦大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 宋后燕;蘇華波  
地址 200433上海市邯鄲路220號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海正旦專利代理有限公司  
代理人 包兆宜  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種抗血小板聚集、低免疫原性重組葡激酶突變體,其特征在于,改變野生型Sak環(huán)狀區(qū)1的34-37位基酸,將野生型Sak肽鏈的Asp33-Gly34-Lys35-Gly36替換為Asp33-Gly34-Arg35-Gly36,命名為DGR;或替換為Asp33-Gly34-Arg35-Gly36-Asp,命名為RL1。  
摘要 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種抗血小板聚集、低免疫原性的重組葡激酶突變體和制備方法。本發(fā)明分析了重組葡激酶單體、微纖溶酶—葡激酶—微纖溶酶復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu),設(shè)計(jì)了新型葡激酶突變體分子結(jié)構(gòu)。通過(guò)PCR定點(diǎn)突變構(gòu)建突變體基因后,與原核表達(dá)載體pLY-4重組,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,篩選高表達(dá)工程菌。經(jīng)發(fā)酵擴(kuò)增,破碎細(xì)菌,離心收集后,經(jīng)二步法純化,凍干得產(chǎn)品基本維持野生型葡激酶纖溶活性,能抑制血小板聚集,有顯著的防治血栓形成的功能,且免疫原性顯著降低。  
國(guó)際公布  
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