| 公開(公告)號 | CN1285737C |
| 公開(公告)日 | 2006.11.22 |
| 申請(專利)號 | CN200410046626.2 |
| 申請日期 | 2004.08.03 |
| 專利名稱 | 硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 湖南大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 譚蔚泓;王柯敏;龔 萍;何曉曉 |
| 地址 | 410082湖南省長沙市河西岳麓山湖南大學(xué)化學(xué)生物傳感與計(jì)量學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 湖南兆弘專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 趙 洪 |
| 國省代碼 | 湖南;43 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法，其特征在于檢測的具體過程為：1)、雜交：連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼磁性納米探針與含有SARS病毒基因片斷及其它非SARS病毒基因片斷的樣品進(jìn)行雜交；2)、磁分離：利用硅殼磁性納米顆粒的磁性分離作用將SARS病毒基因組從混合樣品中分離和純化出來；3)、PCR擴(kuò)增：以純化的SARS病毒基因組作為模板，通過一對特定的引物5’-GATGGTAATA AGATA GCTGA CAAGT-3’和5’-CATCC ACGAA TTCAT GATCA-3’進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到100bp的擴(kuò)增產(chǎn)物；4)、熒光檢測，連接有5’-TCATAGAGCC TGTGTTGTAG ATTGCGGACA TACTT-Biotin-3’cDNA片斷的硅殼熒光納米探針和擴(kuò)增產(chǎn)物以及修飾有5’-Biotin-CATCCACGAATTCATGATCA ACATCCCTAT TTCT-3’cDNA片斷的玻璃芯片以一種類似三明治結(jié)構(gòu)的模型進(jìn)行雜交，而后用激光共聚焦熒光顯微鏡對芯片進(jìn)行掃描檢測。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種硅殼納米顆粒檢測SARS病毒基因組片斷的方法，其特點(diǎn)是構(gòu)建了用于SARS病毒檢測的三明治模型，利用自制的修飾有與SARS病毒基因組特有序列互補(bǔ)的cDNA片斷的硅殼磁性納米探針對含有SARS病毒基因組的樣本進(jìn)行病毒基因組的提取與純化，再在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR擴(kuò)增)對病毒基因片斷進(jìn)行擴(kuò)增的基礎(chǔ)上，用修飾有與SARS病毒基因片斷特異序列互補(bǔ)的cDNA片斷的硅殼熒光納米探針及玻璃芯片對SARS病毒基因片斷進(jìn)行檢測。本發(fā)明的檢測方法具有快捷，靈敏度和特異性高，穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國際公布 |
