| 公開(公告)號 | CN1303218C |
| 公開(公告)日 | 2007.03.07 |
| 申請(專利)號 | CN200310122706.7 |
| 申請日期 | 2003.12.19 |
| 專利名稱 | 過氧化物酶體增長因子活化受體拮抗劑和激動劑的篩選方法 |
| 主分類號 | C12Q1/34(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/34(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院上海藥物研究所;上海先導(dǎo)藥業(yè)有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 沈 旭;蔣華良;沈建華;陳 晴;陳 靜;郭紅霞;陳 帥;羅小民;莊賢韓 |
| 地址 | 201203上海市浦東張江高科技園區(qū)祖沖之路555號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海開祺知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 張 萍;費開逵 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種PPAR拮抗劑和激動劑的篩選方法，其特征在于利用酵母雙雜交系統(tǒng)，采用酵母AH109基因組自帶的MEL1基因作為雙雜交的報告基因，通過測定α-半乳糖苷酶的活性來檢測小分子化合物對PPAR與其共激活因子相互作用程度的影響，從而篩選PPAR拮抗劑和激動劑，包括如下步驟：(1)小鼠共激活因子CBP和酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4AD融合蛋白的表達(dá)質(zhì)粒pGADT7-CBP的構(gòu)建；(2)PPARγLBD和酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4BD融合蛋白的質(zhì)粒pGBKT7-PPARγLBD的構(gòu)建；(3)將質(zhì)粒pGBKT7-PPARγLBD與質(zhì)粒pGADT7-CBP轉(zhuǎn)入酵母細(xì)胞AH109，得到酵母PPARγLBD-CBP AH109(保藏號為CGMCC No.1075，菌種于2003年12月15日保藏在北京中關(guān)村中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心)；(4)通過測定α-半乳糖苷酶的活性篩選化合物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及利用酵母雙雜交系統(tǒng)，通過測定α-半乳糖苷酶的活性大小篩選PPAR拮抗劑和激動劑的方法。該方法包括(1)CBP和酵母GAL4AD融合蛋白(pGADT7-CBP)的質(zhì)粒構(gòu)建；(2)PPARγLBD和酵母GAL4BD融合蛋白(pGBKT7-PPARγLBD)的質(zhì)粒構(gòu)建；(3)將質(zhì)粒pGBKT7-PPARγLBD與質(zhì)粒GADT7-CBP依次轉(zhuǎn)入酵母細(xì)胞AH109；(4)通過測定α-半乳糖苷酶的活性篩選化合物。 |
| 國際公布 |
