方法名稱： |
黃柏-小檗堿與黃柏堿的含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于黃柏中小檗堿與黃柏堿的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加1%醋酸-甲醇溶液水浴回流提取，經(jīng)液相色譜分離，分別在284nm和345nm處測(cè)定峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 HP1100 Series 高效液相色譜儀；HP G1315A二極管陣列檢測(cè)器；HP Chem Station 4.0 色譜工作站。 色譜條件 Merck-Lichrospher RP-C18色譜柱 (250mm×4.6mm，5μm)，流動(dòng)相為乙腈-0.3%磷酸二乙胺梯度洗脫{15/85（0～10min)；35/65（10～25min)}，檢測(cè)波長(zhǎng)：284nm（用于檢測(cè)黃柏堿)；345 nm（用于檢測(cè)小檗堿)；流速：0.8ml·min - 1；柱溫：25℃。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取黃柏堿、小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇溶解并定容，分別制成濃度為黃柏堿128μg·mL-1，小檗堿408μg·mL-1 的溶液，備用。精密吸取上述對(duì)照品溶液各1mL，置2mL 容量瓶中，充分混勻，制成對(duì)照品混和溶液，即得。 供試品溶液的制備 取黃柏藥材粉末約0.5g，精密稱定，加1%醋酸-甲醇溶液30ml，稱重，水浴回流提取2次，每次1h，冷卻后稱重，加溶劑補(bǔ)足重量，過濾，合并濾液，水浴蒸干溶劑，殘?jiān)约状既芙獠⒍ㄈ葜?0ml，即得。 |
操作步驟： |
在選定的色譜條件下，分別吸取對(duì)照品和供試品溶液各10μl進(jìn)樣，測(cè)定峰面積值，按外標(biāo)法計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
祝晨，林朝展，莫建霞.HPLC測(cè)定黃柏藥材中小檗堿與黃柏堿的含量. 中藥新藥與臨床藥理. 2004，15(4)：262～264 |
