方法名稱(chēng)： |
牛黃上清片—大黃酚的含量測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本 方法采用高效液相色譜法測(cè)定牛黃上清片中大黃酚的含量。 本方法適用于牛黃上清片中大黃酚的測(cè)定。 |
方法原理： |
用反相高效液相色譜法分析大黃酚，在254nm處檢測(cè)大黃酚的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2. 三氟醋酸(分析純) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 色譜柱:ODS C18 (250 mm ×4. 6 mm ,5μm) 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：甲醇 0.1 %三氟乙酸 = 82 18，流速:1.0 mL/min 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm 2.3柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1.供試品溶液的制備 取本品10 片,去包衣,精密稱(chēng)定,研細(xì),精密稱(chēng)取約2 片的重量,置圓底燒瓶中,甲醇40ml ,水浴;回流1.5 h ,過(guò)濾,濾液置100 ml 容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,取上清液5 ml ,離心5 min ,濾過(guò),濾液作為供試品溶液。 2.對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取大黃素對(duì)照品適量,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度，制成含大黃酚10mg/L的溶液，搖均，即得。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱(chēng)取大黃素對(duì)照品適量,置25 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成大黃酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再分別配制成5 種不同濃度的大黃素對(duì)照品溶液。依次進(jìn)樣，每次5μL，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸,得回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取上述供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測(cè)器測(cè)定大黃酚的吸收度，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
方國(guó)民，任軍. 牛黃上清片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究. 安徽醫(yī)藥，2003，7（5)：329-330 |
