我們在前期試驗中將增強型綠色熒光蛋白(EGFP)基因與真核表達載體pcDNA3.1(+)連接,構建重組質粒pcDNA3.1(+)–EGFP,鞘內直接注射將重組質粒注入大鼠的蛛網膜下腔,綠色熒光顯示新構建的質粒雖未整合入神經元細胞,但被蛛網膜下腔上皮細胞攝取并表達。隨后又將前腦啡肽原(PENK)基因與真核表達載體pcDNA3.1(+)連接,鞘內直接注射將重組質粒注入坐骨神經慢性壓迫模型大鼠的蛛網膜下腔,產生較好和較長時間的鎮(zhèn)痛效果。為了進一步研究前腦啡肽基因在體內被體細胞攝取表達的部位。
本實驗將人前腦啡肽基因(PENK)連接到綠色熒光載體(pEGFPC3)上,構建pEGFPC3PENK載體,為后續(xù)疼痛基因治療的體內外實驗奠定了分子生物學基礎。
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