臨床免疫學及檢驗授課教案-理論課教案:酶免疫技術

授課內容(章，節(jié))

題 目

第二十章 酶免疫技術

授課教師單位

廣醫(yī)附一院

教研室

檢驗科

職稱

主任技師

授課方式

大課面授

授課時數(shù)

2

授課對象 檢驗系2003本科班

授課時間

2006.09.19

授課地點

12-2A

采用教材版本

《臨床免疫學檢驗》呂世靜主編

教學目的與要求：

1  掌握：酶免疫測定的基本原理，ELISA技術類型，試劑

和材料，ELISA技術要點

2 熟悉：酶標抗體的制備，常用酶和底物的理化性質，方

法的標準化，酶標儀的使用

3  了解：酶免疫技術的發(fā)展和應用。

授課內容(要點)

時間

分配

1  酶免疫技術和分類概念   （10 min)

2  酶免疫測定的基本原理，ELISA技術類型，試劑和材料，ELISA技術要點  （40 min)

3 酶標抗體的制備，常用酶和底物的理化性質，方法的標準化，酶標儀的使用。  （20 min)

4 斑點-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法。（5 min)

5 f1411.cn/shouyi/ 酶免疫技術的發(fā)展和應用。  （5 min) 

2學時

講課重點和難點（采用何種方式或方法來解決)

重點：酶免疫測定的基本原理，ELISA技術類型，試劑和材

料，ELISA技術要點

難點：酶免疫測定的基本原理

介紹學生閱讀有關參考文獻，增加知識面，拓展視野，加深理解，易于記憶。

1)周光炎.免疫學，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學檢驗——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學檢驗，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

教學過程設計：（授課中對以下內容采取的措施)

1  采用提問的方式，復習標記免疫技術的概念和分類，帶出酶免疫技術概念和分類。

2  應用板書寫出反應方程式，以解釋酶免疫均相法和異相法，讓學生理解兩種方法的異同點。

3  利用動畫演示均相法的檢測原理：均相酶免疫放大法和克隆酶法，形象展示兩種方法的異同點。

4  通過圖片展示異相法中ELISA法所必備的試劑，用流程圖解釋ELISA操作流程，用表格講授酶與作用的底物及顯色的關系。

5  用板書、動畫解釋免疫吸附劑、酶標記抗體的制備過程，在講授過程中，應詳細解釋每一步的影響因素與注意事項，例如包被的條件、封閉的作用等等。

6 利用直觀圖、動畫等多媒體技術，解釋ELISA的檢測原理，本內容是學生撐握的難點，重點要展示微觀反應原理。

7 利用視頻技術，展示ELISA檢測技術的操作過程和檢測流程。

8 用實際臨床例子，講解ELISA標準操作程序及各個環(huán)節(jié)的影響因素。

9 簡單介紹斑點-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法。

10 簡單介紹酶免疫技術的進展，例如酶免疫測定儀及自動化進展。

2．啟發(fā)引導學生思維：

1)ELISA方法類型、測定原理與熒光免疫技術中的異同點。

2) 提問學生：熒光免疫技術中熒光素與抗體之間的反應模式。比較ELISA方法中酶標記抗體的制備的異同點。

3) 學生在充分理解EILSA反應原理及特點的基礎上，引導學生設計臨床測定不同標志物的方法。

4)針對不同的ELISA反應類型，根據(jù)其反應原理，臨床中如何防止假陽性和假陰性？

3．采用英語專業(yè)詞匯：

1) 酶免疫技術（Enzyme Immunoassay,EIA)

2) 酶免疫組織化學技術（Enzyme Immunohistochemistry Techenique, EIHCT)

3)辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)

4)堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)

5)b－半乳糖苷酶(b－galactosidase , b－Gal)

6) 酶增強免疫測定技術（enzyme－multipled  Immunoassay,EMIT)

7) 克隆酶供體免疫分析技術（cloned enzyme donor Immunoassay,CEDID)

8) 酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme－Linked Immunosorbent Assay,ELISA)

9)膜載體的酶免疫測定技術（Membranced-Based Enzyme Immunoassay)

10) 免疫滲濾試驗（Immunofiltration assay,IFA)

11) 免疫層析試驗（Immunochromatography assay,ICA)

12) 免疫印跡法（Immunoblotting test,IBT)

13) 生物素－親和素系統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗（Biotin-Avidin System

ELISA)

14) 酶免疫測定的應用（Application of Enzyme Immunoassay)

4．指導學生自學：

1) 自學斑點-ELISA、BAS-ELISA 、免疫層析法和免疫印跡法的原理、影響因素及臨床應用。

2)自學酶免疫f1411.cn/kuaiji/組化技術的原理及技術類型。

3)自學常用酶和底物的選擇。

5．學科進展內容：

 簡單扼要介紹酶在自動化測定中（化學發(fā)光)的應用。

課堂提問設計：

1 結合學生對熒光免疫的理解提問：酶免疫技術和熒光免疫技術的基本原

理？

2 結合學生對熒光標記抗體制備的理解提問：兩種酶標記抗體的制備方法

的異同。

3 講授ELISA技術類型時，提問熒光免疫反應的技術類型，兩者進行對比。

教師與學生互動的設計：

講授與提問結合，以臨床實例舉例說明問題，由淺入深，引導學生，提高學生學習興趣，調動學生學習積極性。

教學方法與手段（采用何種直觀教具和數(shù)量)(請打√)

板書設計

1  酶標記免疫技術：Ag+Ab^E-----AgAb^E―――測量E，

或：Ag^E+Ab-----Ag^EAb―――測量E，

2     

免疫吸附劑的制備――抗體固定原理

  封閉的原理

   Y  Y 

3  鉤狀效應的原理及圖示

√CAI課件 √動畫  √視頻   √網(wǎng)絡

其它：

課時具體安排：

1 酶免疫技術概念、分類，均相免疫技術的概念分類和原理，8min

2 酶免疫測定的基本原理，ELISA技術類型和反應原理，影響因素20min。

3 ELISA的技術要點：免疫吸附劑、酶標記抗原或抗體、反應條件的選擇，

20min

4操作標準化: 加樣、保溫、洗滌、比色和影響ELISA測定的因素20min。

5斑點ELISA、免疫印跡法、重組免疫結合試驗、親和素-生物素系統(tǒng)的原

理、方法類型及影響因素。12min

教學改革措施（授課形式、課堂提問、思考題、復習提綱、測試題)

1)面授與提問結合，強調須掌握和熟悉的內容，可課后給予思考題及測試題。

2)建議學生上網(wǎng)，通過我們自行制作的網(wǎng)絡課件，加深對課程內容的理解。

3)建議學生上網(wǎng)，通過我們的網(wǎng)絡課件中的“測評系統(tǒng)”進行自我測評，通過測

評考核學生自己對課程內容的掌握程度。

4)對尚未理解的內容，學生可在網(wǎng)上直接進行提問，教師可在某時間段進行問題

解答，通過師生互動，掌握課程內容。

輔導的問題與難點：

1酶免疫技術各類型的反應原理。

2 ELISA試劑制造過程對結果的影響。

備課主要參考資料（圖書、文獻)：

1)周光炎.免疫學，第六版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

2)吳健民.免疫學檢驗——理論與臨床.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

3)吳世靜.免疫學檢驗，第二版. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2003

授課教師對此次授課的自我評價：

本課是臨床免疫檢驗課程中基礎理論的主干課，要求教師有較扎實標記免疫技術理論基礎和臨床應用經驗。此次講授自己能緊緊抓住酶免疫技術特點這一主線，重點放在反應原理和臨床應用的講授上。通過多媒體中的圖片、動畫、視頻播放等更形象地展示抗原抗體反應的微觀過程，通過彩圖及流線圖更清晰地講解ELISA的操作過程和影響因素。最后，結合臨床經驗介紹實際項目的檢測。

講授過程邏輯性強，條理性好，語言表達清晰，能適當介紹相關的專業(yè)英語詞匯。在基礎理論講授的同時，向學生介紹臨床實際檢測中結果的判斷及臨床用藥情況對ELISA檢測的影響，溶血標本、細菌污染標本對結果的影響，以及目前EILSA檢測項目中常涉及到的醫(yī)療法律方面的知識等內容，從而擴大學生的知識面。在授課形式上，PPT結合多媒體播放及適當?shù)陌鍟�有機的結合，使內容更形象、更生動、更具體，學生更易于理解。同時檢驗學生進行網(wǎng)絡學習，加深對課程內容的理解。

學生評價：

條理清楚,邏輯性強,講授深入淺出,能將晦澀難懂的內容講授得通俗易懂.講課形式生動活潑,并結合臨床實際,使學生更加容易理解.加入新進展內容,擴大知識面。

教研室主任評價：

教案書寫要求：文字通暢，書寫工整或電腦打印。