第十二章 神經(jīng)系統(tǒng)
第一節(jié) 神經(jīng)干動作電位及其傳導速度的測定
[實驗目的]
掌握神經(jīng)干標本制備、動作電位(actionn potential ,AP)及其傳導速度的測定與計算方法,了解其測定原理與相關(guān)儀器使用方法;觀察、識別蟾蜍坐骨神經(jīng)干雙相和單相動作電位,測定其傳導速度;分析機械損傷或局麻藥、低溫對神經(jīng)干AP及其傳導速度的影響;
[實驗對象]
蟾蜍或青蛙。
[藥品、器材]
PCLAB生物信號采集處理系統(tǒng)一套、神經(jīng)標本盒、蛙類手術(shù)器械、濾紙、棉球、縫合線、任氏液、燒杯、滴管等。
[觀察指標]
蟾蜍或青蛙坐骨神經(jīng)干雙相、單相動作電位及其傳導速度
[方法、步驟]
(1)制備坐骨神經(jīng)干標本
破壞腦脊髓:取蟾蜍一只用自來水沖洗干凈,左手握蟾蜍,小指和無名指夾住后肢,拇指按壓背部,中指放在胸腹部,用食指下壓頭部前端使頭前俯(圖12-1),右手持金屬探針由枕骨沿正中線向脊柱端觸劃,當觸到凹陷處即枕骨大孔處,可將探針由此垂直刺入皮膚入枕骨大孔后,將針折向前方插入顱腔并左右攪動搗毀腦組織,而后退針至刺入點皮下,針尖向后刺入脊椎管搗毀脊髓,當四肢松軟、呼吸消失則表示腦脊髓完全毀壞,否則應按上法重復操作。
圖12-1 破壞蟾蜍腦脊髓的方法
剪除軀干上部及內(nèi)臟: 在骶髂關(guān)節(jié)水平以上lcm處用粗剪刀剪斷脊柱,左手執(zhí)鑷子夾緊脊柱斷端(骶骨端)并稍向上提起,使蟾蜍的頭與內(nèi)臟自然下垂,右手持大剪刀,沿兩側(cè)將蟾蜍的頭、前肢和內(nèi)臟全部剪除并棄置污物桶內(nèi)(圖12-2),僅保留后肢,腰背部脊柱及由它發(fā)出的坐骨神經(jīng)叢(呈灰白色)。
圖12-2 剪除軀干上部及內(nèi)臟
去皮:左手持粗鑷夾住脊柱斷端,不要夾住或觸及神經(jīng),右手捏住其上的皮膚邊緣向下撕去背部的皮膚后,剪去大小腿的全部皮膚。將手和用過的剪子、鑷子、蛙板等全部手術(shù)器械用自來水沖洗凈,再行以下操作。
分離兩腿:沿正中線將脊柱剪分為兩半(勿損傷坐骨神經(jīng)),并從恥骨聯(lián)合中央剪開兩側(cè)大腿,使兩腿完全分離,將兩腿浸于盛有任氏液的燒杯中。
游離坐骨神經(jīng):取一后肢,腹面向上認清坐骨神經(jīng)及其走向后,在靠近脊柱處穿線結(jié)扎,并在結(jié)扎線上剪斷神經(jīng),線頭保留約1cm。用鑷子夾住線頭,提起坐骨神經(jīng)進行分離,沿坐骨神經(jīng)溝(股二頭肌與半膜肌之間的裂隙處)分離出大腿部的坐骨神經(jīng)并用玻璃針輕輕勾起坐骨神經(jīng)干,剪斷所有分支,分離至月國窩處可見有兩條分支,即脛神經(jīng)和腓神經(jīng)。剪去任一分支(腓神經(jīng)較淺,易分離,常保留),繼續(xù)分離留下的另一分支(也可兩支都分離),直至腳趾端。用線結(jié)扎,在結(jié)扎線的遠端,剪斷腓神經(jīng),也保留一小段線頭(約1cm),全長須在8厘米以上。將此完全游離的坐骨神經(jīng)干置于盛有任氏液的燒杯中備用。按同樣的方法,分離另一根坐骨神經(jīng)干備用。
(2)連接實驗裝置(圖12-3)
將引導電極、刺激輸出線分別插入計算機主機輸入2、刺激輸出并與神經(jīng)標本盒相應電極相連。
(3)用任氏液棉球擦拭干凈神經(jīng)標本盒全部電極,鑷子夾住神經(jīng)干標本兩頭的線頭,將標本安放在電極上(粗端放在刺激電極上,細端放在引導電極上)。
(4)觀察坐骨神經(jīng)干雙相動作電位。開機,雙擊PCLAB圖標進入生物信號采集處理系統(tǒng)。按前面介紹的使用方法調(diào)試好儀器后,點擊“刺激”按鈕,系統(tǒng)開始采樣,適當調(diào)整各通道放大倍數(shù)及X、Y軸壓縮比,即可產(chǎn)生雙向動作電位。如改刺激參數(shù)為刺激個數(shù)為2,并適當增加時間間隔至1秒,即可觀察到神經(jīng)干的2個雙向動作電位。
圖12-3 實驗裝置示意圖
(5)測定神經(jīng)興奮傳導速度。抬起放大器面板上,S—R按鈕,并調(diào)整第四通道放大倍數(shù),可在第四通道上觀察到比第二通道在時間上稍有延遲的第二個動作電位,同時測定神經(jīng)興奮傳導速度(V= d/T,V:神經(jīng)干AP傳導速度;d:R1與R2之間的距離;T:兩個AP起點的間隔時間):①測量正常AP傳導速度, ②將標本置于4℃任氏液中浸泡5分鐘后,觀察AP變化測定其傳導速度。
(6)調(diào)換標本方向,觀察AP有無變化。
(7)保持刺激電極與引導電極間距離不變,改變兩引導電極(R1與 R2)間距離觀察雙相AP變化。
(8)對調(diào)兩引導電極的位置,觀察雙相AP變化。
(9)在兩引導電極之間滴一滴普魯卡因,觀察AP波形變化。
(10)用鑷子將兩引導電極之間的神經(jīng)夾傷,觀察AP波形的改變。
(11)實驗結(jié)束后,選取“文件”下的打印,打印實驗結(jié)果。
[注意事項]
(1)神經(jīng)干應盡可能分離得長一些,全長須在8cm以上。
(2)神經(jīng)干分離過程中慎勿損傷神經(jīng)組織,以免影響實驗效果。
(3)神經(jīng)干兩端要用細線扎住,然后浸于任氏液中備用。
(4)實驗時應蓋上神經(jīng)標本盒的盒蓋并接地,以防干擾與神經(jīng)干燥。
(5)坐骨神經(jīng)干標本可直接從剪斷軀干開始制備。
(6)指導圖12-3中S1 S2:刺激電極;R1R2:引導電極。
[思考題]
(1)神經(jīng)干雙相和單相AP產(chǎn)生、傳導和引導原理如何?本實驗采用方法是細胞外記錄方法,此外還有何種方法記錄AP?
(2)神經(jīng)干AP與單一神經(jīng)纖維的AP有何區(qū)別?何謂神經(jīng)干復合AP?
(3)為什么一般情況下記錄到的雙相動作電位的波形是不對稱的?
(4)低溫、標本倒向、改變兩引導電極間距離、對調(diào)兩引導電極的位置、改變刺激電極和引導電極間的距離、用藥物阻斷或機械損傷等分別對神經(jīng)干AP的波形、傳導速度有何影響?為什么?
(5)何謂雙向AP、單向AP,二者有何區(qū)別?本實驗采用什么方法引導觀察單向AP,另有什么方法引導出單向AP?
高治平 劉建芝
第二節(jié) 減壓神經(jīng)放電與動脈血壓變化
[實驗目的]
學習哺乳類動物在體神經(jīng)干動作電位的引導和血壓直接測量方法,觀察機械刺激、電刺激、藥物及神經(jīng)體液因素對家兔血壓的影響,分析減壓神經(jīng)放電的頻率、幅度、聲音與動脈血壓的變化的相互關(guān)系。
[實驗動物]
家兔。
[藥品、器材]
生物信號采集處理系統(tǒng)一套、血壓換能器1個、手術(shù)器械一套、動脈插管1個、兔手術(shù)臺1個、雙極銀絲引導電極1根、鐵支柱2個、試管夾、雙凹夾2個、滴管1支、玻璃分針1個、25%氨基甲酸乙酯(或3%戊巴比妥鈉)1瓶、生理鹽水1瓶、肝素生理鹽水1瓶、液體石蠟(加溫38—40℃)1瓶、1:10000去甲腎上腺素1瓶、利血平注射液1支(或1:10000乙酰膽堿等藥)、50ml注射器1個、1ml注射器2個、10ml注射器1個、紗布、紗帶、縫合線等。
[觀察指標]
(1)兔減壓神經(jīng)放電頻率、幅度,監(jiān)聽放電聲音(類似火車開動樣的轟隆聲)。
(2)兔動脈血壓。
[方法、步驟]
(1)連接實驗裝置:將血壓換能器、生物電引導電極與生物信息采集處理系統(tǒng)相連接。
(2)用50ml注射器抽取肝素生理鹽水,從三通側(cè)管注入血壓換能器及其相連接的動脈插管內(nèi),排盡管內(nèi)空氣。
(3)麻醉與固定 :秤量動物體重,用20%氨基甲酸乙酯(1g/kg)緩慢注入耳緣靜脈,待動物麻醉后,將其仰臥(前肢背位交叉)固定于兔手術(shù)臺上。
(4)分離減壓神經(jīng)、血管、氣管
頸前部備皮后,頸部正中切開4-6cm,用止血鉗分離皮下組織,分開胸舌骨肌,暴露氣管,用左手拇指和食指捏住右側(cè)切口的皮膚和肌肉,其余三指從皮膚外面略向上向外翻,暴露與氣管平行的血管神經(jīng)束,束內(nèi)有頸總動脈、迷走神經(jīng)(最粗)、交感神經(jīng)(次之)和減壓神經(jīng)(最細)。仔細辨認三根神經(jīng),用玻璃分針將減壓神經(jīng)從血管神經(jīng)束中分離出來1.5-2cm,分離須干凈,動作要輕柔細致,并用溫生理鹽水浸濕過的細絲線在其下方穿過備用。用同樣方法依次分離游船右側(cè)交感神經(jīng)、迷走神經(jīng)、氣管、兩頸總動脈,分別穿線備用。
(5)做人工皮兜(也可不做)
用血管鉗把神經(jīng)周圍的皮膚提起,做成人工皮兜,向皮兜內(nèi)滴入38—40℃液體石蠟浸泡神經(jīng),保護神經(jīng)以防干燥和溫度降低,另外,液體石蠟還具有絕緣作用。
(6)行氣管插管、左頸總動脈插管術(shù),記錄血壓。
氣管插管:在甲狀軟骨下2—3cm,兩氣管環(huán)間做倒“T”形切口,向下插入氣管插管,用棉線結(jié)扎固定,便于呼吸通暢。
動脈插管:結(jié)扎左頸總動脈遠心端后(保留結(jié)扎線),在其近心端夾一動脈夾,動脈夾與結(jié)扎之間應相距3cm左右。在結(jié)的下方用眼科剪作一1/2斜切口,向心臟方向插入已灌滿肝素生理鹽水的動脈插管,扎緊插管尖端并固定于其側(cè)管,以防插管滑出,松開動脈夾觀察插管內(nèi)液面是否有隨心跳波動。
(7)用玻璃分針輕輕挑起減壓神經(jīng)放置于引導電極上,將電極固定于支架上,調(diào)節(jié)好引導電極于合適的位置,使電極與神經(jīng)良好接觸,電極不能與周圍組織接觸,但又不過度牽拉神經(jīng)。然后,將接地線夾在附近切開的組織上。
(8)開機,雙擊生物信號采集處理系統(tǒng)圖標。按使用方法調(diào)試準備好儀器后,點擊“開始”按鈕,系統(tǒng)開始采樣,適當調(diào)整各通道放大倍數(shù)及X、Y軸壓縮,在觀察到理想的波形曲線時。(注意:應聽到清晰的轟隆轟隆的神經(jīng)放電比聲音,如聲音太小不清楚,可調(diào)節(jié)音箱音量旋鈕,放大音量,或加大第一通道的放大倍數(shù),一般在10000至20000倍即可)。
(9)觀察正常血壓曲線:辨認血壓波的一級波和二級波,有時可見三級波。一級波(心搏波)由心室舒縮引起血壓波動,心縮時上升,心舒時下降,頻率與心率一致;二級波(呼吸波),是呼吸運動引起的血壓波動,吸氣時,血壓先降后升,呼吸時血壓先升后降;三級波(不常出現(xiàn))可能是血管運動中樞緊張性的周期性變化的結(jié)果。
(10)觀察分析正常減壓神經(jīng)放電集群的特點,并監(jiān)聽其聲音。
(11)向下牽拉右頸總動脈遠心端結(jié)扎線5—10秒,觀察減壓神經(jīng)放電頻率、幅度、聲音與血壓變化相互關(guān)系。
(12)從耳緣靜脈注射1:10000去甲腎上腺素0.2 -0.3m1,觀察減壓神經(jīng)放電的頻率、幅度、聲音與血壓變化相互關(guān)系。
(13)從兔耳緣靜脈注射利血平2m1或1:10000乙先膽堿0.3 m1,觀察減壓神經(jīng)放電頻率、幅度聲音與血壓變化相互關(guān)系。
(14)用動脈夾夾閉右頸總動脈5—10秒,觀察減壓神經(jīng)放電頻率、幅度、聲音與血壓變化相互關(guān)系(注:從此步開始,如操作不便,可取下減壓神經(jīng),僅觀察下列因素對血壓的影響)。
(15)電刺激減壓神經(jīng)(刺激幅度:1—2v,刺激時間:5-10s),觀察血壓的變化。結(jié)扎剪斷之,分別刺激中樞端與外周端,觀察血壓的變化,為什么?
(16)電刺激迷走神經(jīng)(刺激幅度:1—2v,刺激時間:5-10s),觀察血壓的變化。結(jié)扎剪斷之,分別刺激中樞端與外周端,觀察血壓的變化,為什么?
(17)結(jié)扎剪斷和刺激交感神經(jīng)對兔耳血管網(wǎng)的影響。比較觀察左右兩耳血管網(wǎng)的數(shù)目和充血情況,然后結(jié)扎并于近心端剪斷左交感神經(jīng),稍等片刻,比較觀察左耳血管網(wǎng)與右耳有何不同?然后電刺激左交感神經(jīng)頭端(外周端)觀察其血管網(wǎng)的變化,稍侯片刻,再觀察左耳血管網(wǎng)又有何變化?為什么?
(18)從右頸總動脈緩慢放血20ml-50ml(或維持血壓在40mmHg一定時間),觀察右耳血管網(wǎng)(及血壓)的變化。然后快速補液(37℃生理鹽水或5%的葡萄糖溶液)觀察血壓和右耳血管網(wǎng)及其顏色的變化。
[注意事項] 找準減壓神經(jīng)是實驗成敗的關(guān)鍵。
(1)麻醉不宜過淺,否則動物掙扎,拉斷神經(jīng)或產(chǎn)生肌電干擾。
(2)減壓神經(jīng)纖細,分離、勾起神經(jīng)時,動作要輕柔細致,切勿盲目牽拉,以免損傷神經(jīng),影響放電。
(3)分離要干凈,神經(jīng)上不能附有結(jié)締組織膜。引導電極與神經(jīng)干須緊密接觸并懸空,避免觸碰周圍組織,影響放電。
(4)實驗過程中,可滴少量38—40℃的液體石蠟于減壓神經(jīng)起到絕緣和防止干燥的作用。
(5)引導電極兩極間距為2mm左右,并要干燥,以防短路而影響電位記錄。
(6)引導電極的導線要用屏蔽線,方可抗干擾。電極導線不宜過長,避免與電源線或其它干擾源的導線相交,以防產(chǎn)生干擾。
(7) 實驗過程中,如發(fā)現(xiàn)電位幅度逐漸減小或50HZ干擾信號,應檢查神經(jīng)是否干燥,動物局部和全身溫度是否過低等,適當給予相應處理。
(8)實驗步驟10-13,均必須待減壓神經(jīng)放電及血壓灰復正常后,方可進行下一步驟。
[思考題]
(1)夾閉、牽拉頸總動脈后,減壓神經(jīng)放電、血壓各有何變化? 為什么?
(2)注入去甲和利血平后,減壓神經(jīng)放電、血壓各有何變化? 為什么?
(3)觀察心縮期與心舒期血壓和減壓神經(jīng)放電的變化,分析減壓神經(jīng)放電與血壓的相互關(guān)系。
(4)根據(jù)實驗結(jié)果分析斷減壓神經(jīng)是傳入神經(jīng)還是傳出神經(jīng),并說明減壓反射的調(diào)節(jié)方式、調(diào)節(jié)過程與生理意義。
(5)本實驗或機能學動物實驗中所采用的動脈血壓測量法是屬直接測量法,還是屬間接測量法?
(6)請分析電刺激內(nèi)臟大神經(jīng)時,血壓變化如何?為什么?
高治平 劉建芝
第三節(jié) 香煙的毒性作用
[實驗目的]
觀察煙對小鼠的毒性作用,以明確吸煙對人體的危害。
[實驗動物]
小鼠。
[藥品、器材]
水煙斗、火柴、1.0ml注射器、10.0m1量筒,香煙、生理鹽水。
[觀察指標]
小鼠的肌肉活動、呼吸、末梢循環(huán)情況,最后是否死亡。
[方法、步驟]
(1)量筒量取生理鹽水4.0m1置于煙斗內(nèi),搖勻后,先用注射器抽取1.0ml液體(對照組用),然后,將香煙插于水煙斗上并點燃,于煙斗嘴處用洗耳球抽吸促使繼續(xù)燃燒(如圖5-1),使煙霧經(jīng)煙斗內(nèi)溶液過濾,此時,煙霧內(nèi)部分水溶性毒物如尼古丁(煙鹼)等,即溶于水中。
(2)取小鼠2只,觀察正常情況后,甲鼠腹腔注射煙過濾液0.5m1,乙鼠則腹腔注射吸煙前煙斗內(nèi)溶液0.5m1做對照,逐步觀察并比較兩小鼠的表現(xiàn)(肌肉活動、呼吸、末梢循環(huán))。
實驗結(jié)果填入下表:
表5-1 香煙濾液對小鼠的毒性作用
肌肉活動 | 呼吸 | 末梢循環(huán) | 死亡 | |
甲鼠 乙鼠 |
[思考題]
含有尼古丁的煙過濾液為什么可使小鼠出現(xiàn)一系列中毒表現(xiàn)?
圖5-1 a煙斗嘴 b生理鹽水 c點燃的香煙
(黃紅林 謝志忠)
第四節(jié) 有機磷酸酯類的中毒與解救
[實驗目的]
(1)觀察實驗動物在有機磷酸酯類中毒時的癥狀,以及中毒時血液膽堿酯酶活力的抑制情況。
(2)根據(jù)阿托品、解磷定對有機磷酸酯類中毒的解救效果及對血液膽堿酯酶活力的影響,分析兩藥的解毒原理。
[實驗動物]
家兔2只,性別不拘。
[藥品、器材]
30%精制敵百蟲溶液、0.2%高級職稱考試網(wǎng)硫酸阿托品溶液、2.5%解磷定溶液、二甲苯。家兔固定箱、注射器、預先加草酸鉀的試管、試管架、刀片、干棉球、瞳孔尺與木夾。
[參考指標]
見表4-1。
[方法、步驟]
(1)取家兔2只,以甲、乙編號,稱其體重,觀察活動情況和呼吸(頻率、幅度、是否困難等)
、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌張力、有無震顫等,分別加以記錄。
&nbs執(zhí)業(yè)藥師p; (2)將2只家兔分別固定于箱內(nèi),以蘸有二甲苯的棉球涂擦耳殼,使血管擴張。
當充血明顯時,用刀片切割耳靜脈(切口不要過大、過深),讓血液自然流出,滴入預先置有少量草酸鉀結(jié)晶的試管中,立即搖勻,供測定血液膽堿酯酶活力之用,如取血后切口流血不止,可用干棉球按住,再夾上木夾止血。
(3)將2只家兔同樣給予有機磷酸酯類藥物。腹腔注射30%敵百蟲1.0mg/Kg,密切注意給藥后家兔各項生理指標的變化,加以記錄,中毒癥狀明顯后,再按上述方法取血,留待膽堿酯酶活力測定。
(4)立即給甲兔由耳緣靜脈注射0.2%硫酸阿托品溶液1.0 ml/kg,給乙兔由耳緣靜脈注射2.5%解磷定2.0ml/kg,然后每隔5min,再檢查各項生理指標1次,觀察2只家兔的情況有無好轉(zhuǎn),特別注意甲兔和乙兔的區(qū)別。待有關(guān)中毒癥狀明顯消減以后,再由2只家兔的靜脈取血,測定血液膽堿酯酶活力。
實驗結(jié)果按表4-1的內(nèi)容逐項填寫。
表4-1 有機磷酸酯類中毒與解救的實驗結(jié)果
兔號 | 體重(kg) | 用藥情況 | 瞳孔(mm) | 唾液 | 呼吸 | 大小便 | 肌張力 | 震顫 | 結(jié)果 |
甲 | 用藥前敵百蟲阿托品 | ||||||||
乙 | 用藥前敵百蟲解磷定 |
[注意事項]
(1)敵百蟲屬于劇毒類殺蟲劑,且可從皮膚吸收,如與手等接觸后,應立即用水清洗。
(2)給家兔實施腹腔注射敵百蟲后,15min時仍未出現(xiàn)中毒癥狀,可再追加1/3劑量的敵百蟲溶液。
(3)本實驗為分析阿托品和解磷定的作用機制而設。應切記,在臨床實際中,須將阿托品與解磷定配合使用,才能獲得最好的解毒效果。
[思考題]
試根據(jù)本次實驗結(jié)果,分析有機磷酸酯類的中毒機制及阿托品和解磷定的解毒原理。
附:全血膽堿酯酶活力的比色測定法
一、原理
血液膽堿酯酶催化乙酰膽堿的水解。在一定條件下,水解的乙酰膽堿量與酶的活力有關(guān)。故加入一定量的乙酰膽堿,使之與血液作用后,測定剩余乙酰膽堿之量,便可知已水解的乙酰膽堿量,從而測出膽堿酯酶的活力。
剩余乙酰膽堿的測定是利用乙酰膽堿與羥胺作用生成羥肟酸,后者在酸性條件下又與三價鐵離子作用,生成紅棕色的羥肟酸鐵絡合物。
二、器材
試管、試管架、吸管、恒溫水浴、光電比色計。
三、試劑
(1)2/15mol/L磷酸氫二鈉溶液:稱取Na2HPO4·12H2O 23.87g,用蒸餾水溶解并稀釋至500m1。
(2)2/15mol/L 磷酸二氫鉀溶液:稱取KH2P04 9.08g,用蒸餾水溶解并稀釋至500 ml。
(3)pH7.2磷酸鹽緩沖液:取2/15 mol/L磷酸氫二鈉溶液72ml,與2/15mol/L磷酸氫二鉀溶液28ml混和即成。
(4)0.1mol/LpH4.5醋酸鹽緩沖液:先由每升冰醋酸5.78m1之水溶液28ml和每升含醋酸鈉(不含結(jié)晶水)8.20g之水溶液22ml混和,成為0.1 mol/L pH4.5之醋酸鹽緩沖液,再用蒸餾水稀釋到l/100倍。
(5)0.07mol/L乙酰膽堿底物貯存液:快速稱取氯化乙酰膽堿0.127g(或溴化乙酰膽堿0.158g),溶于0.001mol/L PH4.5醋酸鹽緩沖液10m1中。在冰箱中可保存4周。
(6)0.007 mol/L乙酰膽堿底物應用液:臨用前取0.07 mol/L乙酰膽堿底物貯存液,用pH7.2磷酸鹽緩沖液稀釋到1/10倍。
(7)堿性羥胺溶液:臨用前20分鐘內(nèi)取等量的14%氫氧化鈉溶液和14%鹽酸羥胺溶液,混和即成。
(8)33.3%(V/V)鹽酸溶液:取比重為1.18的鹽酸50ml,加蒸餾水100ml。
(9)10%三氯化鐵溶液:稱取FeCl3·6H2O 10g,用0.1 mol/L 鹽酸溶解,使成100ml。
四、實驗方法
按表4-2進行操作,每加一種試劑后均須充分搖勻,保溫時間須嚴格控制。
表4-2 比色測定法的實驗操作步驟
步驟 | 操 作 | 標準管(m1) | 測定管(m1) | 空白管(m1) |
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 | pH7. 2磷酸鹽緩沖液 全血 37℃水浴預熱3min 乙酰膽堿底物應用液 37℃水浴預熱20min 堿性羥胺溶液 乙酰膽堿底物應用液 室溫靜置2min 33.3%鹽酸溶液 10%三氯化鐵溶液 | 1.0 0.1 1.0 4.0 — 2.0 2.0 | 1. 0 0.1 1.0 4.0 — 2.0 2.0 | l.0 0.1 — 4.0 1.0 2.0 2.0 |
用濾紙過濾,于15min內(nèi)用分光光度計比色,在525nm處比色,以空白管校正光密度到0點,讀取各管吸光度計算
標準管吸光度—測定管吸光度=全血ChE活力單位數(shù)
標準管吸光度
注:以1m1血液在規(guī)定條件下能分解lμmo1乙酰膽堿為1個膽堿酯酶活力單位。
(黃紅林 謝志忠)