醫(yī)學(xué)全在線
搜索更多精品課程:
熱 門:外科內(nèi)科學(xué)婦產(chǎn)科兒科眼科耳鼻咽喉皮膚性病學(xué)骨科學(xué)全科醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)生理學(xué)病理學(xué)診斷學(xué)急診醫(yī)學(xué)傳染病學(xué)醫(yī)學(xué)影像藥 學(xué):藥理學(xué)藥物化學(xué)藥物分析藥物毒理學(xué)生物技術(shù)制藥生藥學(xué)中藥學(xué)藥用植物學(xué)方劑學(xué)衛(wèi)生毒理學(xué)檢 驗(yàn):理化檢驗(yàn) 臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)護(hù) 理:外科護(hù)理婦產(chǎn)科護(hù)理兒科護(hù)理 社區(qū)護(hù)理五官護(hù)理護(hù)理學(xué)內(nèi)科護(hù)理護(hù)理管理學(xué)中 醫(yī):中醫(yī)基礎(chǔ)理論中醫(yī)學(xué)針灸學(xué)刺法灸法學(xué)口 腔:口腔內(nèi)科口腔外科口腔正畸口腔修復(fù)口腔組織病理生物化學(xué):生物化學(xué)細(xì)胞生物學(xué)病原生物學(xué)醫(yī)學(xué)生物學(xué)分析化學(xué)醫(yī)用化學(xué)其 它:人體解剖學(xué)衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)人體寄生蟲學(xué)儀器分析健康評(píng)估流行病學(xué)臨床麻醉學(xué)社會(huì)心理學(xué)康復(fù)醫(yī)學(xué)法醫(yī)學(xué)核醫(yī)學(xué)危重病學(xué)中國(guó)醫(yī)史學(xué)
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 精品課程 > 生理學(xué) > 南華大學(xué) > 正文:生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo):第八章
    

生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-第二篇:第八章

生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)第二篇:第八章:第八章 循環(huán)系統(tǒng)第一節(jié) 電解質(zhì)及藥物對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?(1)掌握straud離體心的灌流方法。(2)觀察鈉、鉀、鈣三種離子與腎上腺素、異丙腎上腺素去甲腎上腺素、 Ach、 強(qiáng)心甙、氨茶堿等對(duì)離體心臟的作用。[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物]蟾蜍或青蛙性別不拘[藥品、器材]生物信息記錄儀、張力傳感器、蛙類手術(shù)器械一套、玻璃分針、濾紙、棉球、澆杯2個(gè)、縫線、滴管2支、蛙心夾 、鐵支架、雙凹夾2個(gè)、試管夾

第八章  循環(huán)系統(tǒng)

第一節(jié)  電解質(zhì)及藥物對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響

  [實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

   (1)掌握straud離體心的灌流方法。

(2)觀察鈉、鉀、鈣三種離子與腎上腺素異丙腎上腺素、去甲腎上腺素、 Ach、 強(qiáng)心甙、氨茶堿等對(duì)離體心臟的作用。

  [實(shí)驗(yàn)動(dòng)物]

蟾蜍或青蛙性別不拘

  [藥品、器材]

生物信息記錄儀、張力傳感器、蛙類手術(shù)器械一套、玻璃分針、濾紙、棉球、澆杯2個(gè)、縫線、滴管2支、蛙心夾 、鐵支架、雙凹夾2個(gè)、試管夾、蛙心插管、任氏液、0.65%NaCl、3%CaCl2、1%KCI,1:10 000腎上腺素、1:100 000Ach、1:10000異丙腎上腺素、25:1000氨茶堿(2.5%)、25:100 000毒K(0.025%)。

   [觀察指標(biāo)]

心功能:心跳頻率、幅度,心搏曲線和舒縮程度

  [方法、步驟]

1.離體蛙心制備

取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓后,仰臥固定在蛙板上,從劍突下將胸部皮膚向上剪開,然后剪開胸骨和胸膜,暴露心臟(圖8-1)。

在主動(dòng)脈干下方引兩根線,一條在主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用,另一根則在動(dòng)脈圓錐上方,糸一松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心插管。

圖8-1暴露蛙心

左手持左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線,用眼科剪在松結(jié)上方左主動(dòng)脈根部剪一小斜口,右手將盛有少許任氏液,大小適宜的蛙心插管由此剪口處插入動(dòng)脈圓錐,當(dāng)插管頭到達(dá)動(dòng)脈圓錐時(shí),再將插管稍向后退,并轉(zhuǎn)向心室中央方向,在心室收縮期插入心室,判斷蛙心插管是否進(jìn)入心室可根據(jù)插管內(nèi)的任氏液液面能否隨心室的舒縮而上下波動(dòng)。如蛙心插管已進(jìn)入心室,則將預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊,并固定在蛙心插管的側(cè)鉤上以免蛙心插管滑出心室。剪斷主動(dòng)脈左右分支。

輕輕提起蛙心插管以抬高心臟,用一線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎,結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓,以免傷及靜脈竇,在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織,將蛙心游離出來。

用新鮮的任氏液反復(fù)換洗蛙心插管內(nèi)含血的任氏液,直至蛙心插管內(nèi)無血液殘留為止,此時(shí)離體蛙心已制備成功,可供實(shí)驗(yàn)。

2.儀器裝置 

按圖8-2連接實(shí)驗(yàn)裝置,依儀器使用方法調(diào)試好記錄儀。將蛙心插管固定在鐵支架上,用蛙心夾在心室舒張期夾住心尖,并將蛙心夾的線頭連至張力傳感器的應(yīng)變片上,此線應(yīng)有適宜的緊張度。

 


圖8-2 實(shí)驗(yàn)記錄裝置

3.觀察項(xiàng)目:

(1)描記正常蛙心搏動(dòng)曲線,注意觀察心跳頻率、幅度及心室舒縮程度。

(2)把蛙心插管內(nèi)的任氏液全部更換為0.65%NaCl溶液,觀察心跳變化。

(3)把0.65%NaCl吸出,用新鮮任氏液反復(fù)換洗數(shù)次,待曲線恢復(fù)正常時(shí),在任氏液內(nèi)滴加3%CaCl2 1~2滴,觀察心功能變化。

  (4)將含有CaCl2任氏液吸出,用新鮮的任氏液反復(fù)換洗,等曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加1%KCI 1~2滴,觀察心功能變化。

   (5)速將含有KCI的任氏液吸出,用新鮮的任氏液反復(fù)換洗,等待曲線恢復(fù)正常后,再在任氏液中加1:10000腎上腺素溶液1~2滴,觀察心功能的變化。

   (6)腎上腺素的任氏液吸出,用新鮮的任氏液反復(fù)換洗,待曲線恢復(fù)正常后,再在任氏液中加入1:100000的Ach1~2滴,觀察心功能變化。

   (7)將含有Ach的任氏液吸出,用新鮮的任氏液反復(fù)換洗,待曲線恢復(fù)正常后,再在任氏液中加入1:10000異丙腎上腺素1~2滴,觀察心功能的變化。

   (8)將含有異丙腎上腺素的任氏液吸出,用新鮮的任氏液反復(fù)換洗,待曲線恢復(fù)正常后,再將插管內(nèi)任氏液換成鈣離子任氏液,觀察心功能變化。

   (9)當(dāng)心力出現(xiàn)衰竭時(shí),加入25:100 000的毒K 0.3ml觀察心功能變化,然后重復(fù)(8)。

   (10)當(dāng)心力出現(xiàn)衰竭時(shí),加入25:10 000氨茶堿0.3ml,觀察心功能變化。

  [注意事項(xiàng)]

(1)制備蛙心標(biāo)本時(shí),勿傷及靜脈竇。

(2)上述各實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,一旦出現(xiàn)變化就應(yīng)立即用新鮮任氏液換洗,以免心肌受損,但必須待心功能恢復(fù)正常后方能進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。

(3)蛙心插管液面應(yīng)保持恒定,以免影響結(jié)果。

(4)滴加藥品和換取新鮮任氏液須及時(shí)標(biāo)記,以便觀察分析。

(5)吸新鮮任氏液和吸蛙心插管內(nèi)廢液的滴管應(yīng)區(qū)分專用,不可混淆使用,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

   (6)藥物作用不明顯時(shí),可適量增加,密切觀察藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

   [思考題]

   (1)正常蛙心搏動(dòng)曲線各個(gè)組成部分,分別反映了什么?

   (2)分析加入各種離子或藥品后心搏曲線變化的原因。

(胡  弼)

第二節(jié)  急性犬失血性休克及救治

  

 &nwww.med126.combsp; [實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

(1)用放血的方法復(fù)制犬失血性休克模型。

(2)觀察失血前和失血性休克后血流動(dòng)力學(xué)改變和微循環(huán)變化。

(3)探討失血性休克的發(fā)生機(jī)理,熟悉救治措施。

(4)觀察補(bǔ)充血容量和給血管活性藥物治療后血流動(dòng)力學(xué)改變和微循環(huán)變化。

  [實(shí)驗(yàn)動(dòng)物]

家犬,性別不拘。

  [藥品、器材]

3%戊巴比妥鈉、125單位/ml肝素生理鹽水、生理鹽水、微循環(huán)灌流液(臺(tái)氏液加1%明膠)、5%葡萄糖液、酚妥拉明,手術(shù)器械,10ml、20ml、50ml注射器,100ml燒杯、儲(chǔ)血瓶,輸尿管插管、動(dòng)脈導(dǎo)管及壓力傳感器、靜脈導(dǎo)管及壓力傳感器、呼吸傳感器、微循環(huán)觀察裝置(灌流盒、連續(xù)變倍顯微鏡),生物信息采集處理儀,AVL血?dú)夥治鰞x。

   [觀察指標(biāo)]

(1)血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo):動(dòng)脈血壓、脈壓差、心率、中心靜脈壓。

(2)微循環(huán)指標(biāo):微血管內(nèi)血流速度、微血管直徑、毛細(xì)血管數(shù)/固定視野內(nèi)、白細(xì)胞附壁及嵌塞。

(3)尿量(滴或ml/min)。

(4)呼吸頻率與幅度。

(5)休克前和休克后血?dú)夂退釅A指標(biāo)變化:動(dòng)脈血pH、PaO2、PaCO2、AB、SB和BE。

   [方法、步驟]

(1)取成年家犬一只,稱重后靜脈注射3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)全身麻醉。

(2)將麻醉犬仰臥固定于犬實(shí)驗(yàn)臺(tái),頸前部和腹股溝部備皮。作長(zhǎng)6~8cm的頸部正中切口,分離出氣管,在甲狀軟骨下2~3cm處作倒“T”形切口,插入Y型氣管插管并固定,Y型管一側(cè)與呼吸傳感器相連,信號(hào)傳入生物信息采集處理儀記錄呼吸變化。

(3)分離左頸總動(dòng)脈,插入動(dòng)脈導(dǎo)管,壓力信號(hào)經(jīng)壓力傳感器傳入生物信號(hào)采集處理儀,記錄動(dòng)脈血壓和脈壓差。分離右頸外靜脈,插入靜脈導(dǎo)管(插入導(dǎo)管長(zhǎng)度約15cm左右,相當(dāng)于上腔靜脈入右心房口處) ,壓力信號(hào)經(jīng)壓力傳感器傳入生物信號(hào)采集處理儀,記錄中心靜脈壓。

(4)在左側(cè)腹股溝部觸及股動(dòng)脈搏動(dòng)后,沿動(dòng)脈走行方向作約4cm長(zhǎng)切口,分離出左股動(dòng)脈和靜脈,分別作股動(dòng)脈和股靜脈插管,兩插管經(jīng)三通與儲(chǔ)血瓶和輸液瓶相連通,以備放血和輸液。插管操作完畢先從輸液瓶向股靜脈緩慢輸入生理鹽水(5~10滴/分),保執(zhí)業(yè)獸醫(yī)持靜脈暢通。

  (5)在恥骨聯(lián)合上作下腹部正中切口(切口長(zhǎng)約5cm),找到膀胱,排空尿液后,將膀胱從腹腔拉出,在背面膀胱三角區(qū)找到雙側(cè)輸尿管入口,分離雙側(cè)輸尿管并插入輸尿管插管,記錄每分鐘尿滴數(shù)。

(6)在右側(cè)腹直肌旁作約6cm長(zhǎng)切口,鈍性分離肌層,打開腹腔后,輕輕拉出一段游離度較大的小腸腸袢,放置在微循環(huán)恒溫灌流盒內(nèi),使腸系膜置于灌流盒載物臺(tái)上,用顯微鏡觀察腸系膜微循環(huán)。

(7)放血前記錄觀察指標(biāo):觀察記錄血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)、微循環(huán)指標(biāo)、尿量、呼吸、血?dú)夂退釅A指標(biāo)。

(8)放血復(fù)制失血性休克;

①記錄各項(xiàng)指標(biāo)后,將與股動(dòng)脈插管相連的三通向儲(chǔ)血瓶開放,降低儲(chǔ)血瓶高度并松開動(dòng)脈夾,快速放血,在15分鐘內(nèi)使平均動(dòng)脈壓降至40mmHg。調(diào)節(jié)儲(chǔ)血瓶高度以長(zhǎng)期維持血壓在40mmHg。為防止血液凝固,儲(chǔ)血瓶?jī)?nèi)應(yīng)在股動(dòng)脈插管前加入肝素生理鹽水5mg。

②根據(jù)實(shí)驗(yàn)時(shí)間決定維持40mmHg血壓時(shí)間的長(zhǎng)短,維持時(shí)間不應(yīng)少于30分鐘,在此段時(shí)間內(nèi)應(yīng)觀察記錄好各項(xiàng)指標(biāo)的變化。

(9)失血性休克救治:

①用動(dòng)脈夾夾閉股動(dòng)脈近心端停止放血,三通開關(guān)向輸液瓶開放。將儲(chǔ)血瓶?jī)?nèi)的血液倒入瓶口有雙層過濾紗布的輸液瓶?jī)?nèi),快速?gòu)墓伸o脈輸回血液及與失血量等量的生理鹽水(250滴/分)。

②輸血輸液后,觀察記錄各項(xiàng)指標(biāo)以及微循環(huán)恢復(fù)狀況。

③用酚妥拉明10mg加入100ml 5%葡萄糖溶液中靜脈滴注,100滴/分。輸注完畢后,觀察記錄各項(xiàng)指標(biāo)以及微循環(huán)變化。

  [注意事項(xiàng)]

(1)盡量減少手術(shù)性出血,勿使用手術(shù)刀和剪刀分離血管和肌層。

(2)牽拉腸袢要輕,以免損傷腸系膜影響微循環(huán)觀察或引起低血壓。

(3)壓力傳感器內(nèi)應(yīng)事先充盈肝素生理鹽水并排盡氣泡,安置高度應(yīng)與心房水平一致。

(4)觀察微循環(huán)時(shí),應(yīng)始終固定視野,先選好標(biāo)志血管,分清動(dòng)脈、靜脈和毛細(xì)血管,畫出觀察視野圖并標(biāo)明動(dòng)脈、靜脈和毛細(xì)血管。

   [思考題]

(1)如果不給失血性休克家犬輸回原血,或者臨床上救治失血性休克病人又暫時(shí)得不到血液,你將如何進(jìn)行救治?請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)救治方案。

(2)為防止缺血缺氧對(duì)組織細(xì)胞損害,還可選擇哪些藥物?

(3)本實(shí)驗(yàn)中是否存在缺血-再灌注損傷?

 (孫文清  金海燕)

第三節(jié)  藥物的量效關(guān)系與競(jìng)爭(zhēng)性拮抗

   [實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

   (1)觀察應(yīng)用酚妥拉明前后,不同劑量新福林對(duì)離體主動(dòng)脈的收縮作用,加深對(duì)激動(dòng)劑、拮抗劑、量效關(guān)系和競(jìng)爭(zhēng)性拮抗的理解。

   (2)了解離體血管實(shí)驗(yàn)方法。

  [實(shí)驗(yàn)動(dòng)物]

家兔(1.8~2.5kg),性別不拘。

  [藥品、器材]

生物信號(hào)采集處理儀、張力傳感器、離體血管浴槽裝置一套、超級(jí)恒溫水浴器、氧氣鋼瓶、手術(shù)器械一套,培養(yǎng)皿、燒杯、1毫升注射器、萬能支架、克氏液、砝碼等,酚妥拉明:10-5M,新福林10-8M、10-7M、10M-6 、10M-5、10M-4、10M-3、10-2M、。

   [觀察指標(biāo)]

用藥前后血管環(huán)張力變化。

   [方法、步驟]

   (1)準(zhǔn)備好灌流系統(tǒng),調(diào)節(jié)浴槽水溫于37.4℃,調(diào)節(jié)恒溫浴槽中克氏液為20毫升,標(biāo)記好液面高度,連接并調(diào)好張力傳感器和生物信號(hào)采集處理儀。

   (2)取家兔一只,于耳緣靜脈注射空氣處死。迅速打開胸腔,摘除心肺,找到并取出整段胸主動(dòng)脈(約6厘米),放入盛有預(yù)先冰冷的充氧克氏液的培養(yǎng)皿中。用克氏液將淤血沖洗干凈,仔細(xì)剝離血管壁結(jié)締組織,然后將血管剪成寬約4毫米的血管環(huán)。用兩個(gè)不銹鋼的鉤將血管環(huán)置于浴槽內(nèi),一端固定于浴槽底部,另一端與傳感器相連(圖8-3),控制通氧速度為每秒1~2個(gè)氣泡。

 


圖8-3 離體血管描記裝置

  (3)血管環(huán)取靜息張力5克平衡約45分鐘后,走一段基線,從10-8M濃度開始,依次加入濃度按對(duì)數(shù)值等距遞增的新福林溶液0.2毫升(稀釋100倍),至收縮達(dá)最大值(增加劑量不再使收縮加強(qiáng))為止。換入新鮮克氏液沖洗3~4次,重新平衡約20分鐘,使血管張力恢復(fù)到基線位置。預(yù)先加入酚妥拉明10-5M(終濃度)0.2毫升。然后重復(fù)上述給藥步聚,觀察收縮幅度的變化。

   (4)實(shí)驗(yàn)完畢,打印記錄結(jié)果,測(cè)量每次加新福林后收縮曲線高度,換算為收縮力,以克表示。

將結(jié)果填入下表:

表8-1  不同濃度新福林引起血管環(huán)收縮幅度(克)

10-8

10-7

10-6

10-5

10-4

10-3

10-2

用酚妥拉明前

用酚妥拉明后

   (5)以血管環(huán)收縮幅度為縱坐標(biāo),藥物對(duì)數(shù)濃度為橫坐標(biāo),將應(yīng)用酚妥拉明前后新福林引起血管環(huán)收縮的兩條量效曲線繪入同一坐標(biāo)紙上。

   [注意事項(xiàng)]

1.制備血管環(huán)時(shí),不要用鑷子用力夾,不要過分牽拉,以免損傷血管內(nèi)皮。

2.浴槽內(nèi)的的溫度控制必須在37.0土2℃,氧氣供給量不宜過大。

3.平衡要好,整個(gè)操作期間不能有振動(dòng),否則需重新平衡15分鐘以上。

4.本實(shí)驗(yàn)屬于定量觀察,每次所加液量、藥量必須準(zhǔn)確。

   [思考題]

   (1)什么是激動(dòng)劑?什么是拮抗劑?

   (2)何謂競(jìng)爭(zhēng)性拮抗?其量效關(guān)系曲線將如何改變?

(廖端芳  謝志忠)

...
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠(chéng)聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學(xué)論壇 - 醫(yī)學(xué)博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
皖I(lǐng)CP備06007007號(hào)
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會(huì)員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗(yàn)證