醫(yī)學(xué)全在線
醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) > 臨床經(jīng)驗(yàn) > 正文:標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)尿有形成分分析儀檢測(cè)尿液紅細(xì)胞的影響
    

標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)尿有形成分分析儀檢測(cè)尿液紅細(xì)胞的影響

標(biāo)本放置時(shí)間對(duì)尿有形成分分析儀檢測(cè)尿液紅細(xì)胞的影響:尿液有形成分檢查是最常用的尿液常規(guī)檢查項(xiàng)目之一。UF-100流式尿液有形成分分析儀除能計(jì)數(shù)RBC、WBC數(shù)量外,還能給出紅細(xì)胞均一型、非均一型和混合型等實(shí)用信息,對(duì)沁尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別血尿來(lái)源具有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。但普遍存在的現(xiàn)狀是尿液從采集到用UF-100檢測(cè),往往需要3-4h,甚至更長(zhǎng),我們?cè)趯?shí)際工作中發(fā)現(xiàn)尿液隨放置時(shí)間延長(zhǎng),RBC數(shù)量和形態(tài)會(huì)發(fā)生改變。本研究對(duì)尿液放置時(shí)間是否對(duì)RBC檢測(cè)

尿液有形成分檢查是最常用的尿液常規(guī)檢查項(xiàng)目之一。UF-100流式尿液有形成分分析儀除能計(jì)數(shù)RBC、WBC數(shù)量外,還能給出紅細(xì)胞均一型、非均一型和混合型等實(shí)用信息,對(duì)沁尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別血尿來(lái)源具有重要臨床應(yīng)用價(jià)值。但普遍存在的現(xiàn)狀是尿液從采集到用UF-100檢測(cè),往往需要3-4h,甚至更長(zhǎng),我們?cè)趯?shí)際工作中發(fā)現(xiàn)尿液隨放置時(shí)間延長(zhǎng),RBC數(shù)量和形態(tài)會(huì)發(fā)生改變。本研究對(duì)尿液放置時(shí)間是否對(duì)RBC檢測(cè)信息產(chǎn)生影響進(jìn)行試驗(yàn)觀察。

一、材料與醫(yī)師招聘方法

1.材料:(1)標(biāo)本來(lái)源:選擇血尿標(biāo)本(UF-100測(cè)定RBC數(shù)>25/μl)359例。其中經(jīng)腎穿刺活檢、泌尿系統(tǒng)檢查及詳細(xì)病史確診為腎小球病變138例(包括急、慢性腎小球腎炎,腎功能不全,腎病綜合征,IrA腎炎等),非腎小球疾病40例(包括尿路感染、輸尿管結(jié)石、泌尿系統(tǒng)腫瘤等),泌尿系統(tǒng)出血原因待查181例。

(2)儀器:流式尿液有形成分分析儀UF-100(日本Sysmex公司制造)及配套試劑(稀釋液A5015、鞘液G6004、雙色熒光染料A6002)、質(zhì)控品uF-CHECK、Olympus普通光學(xué)顯微鏡和相差顯微鏡。

2.方法:(1)用Sysmex的質(zhì)控品對(duì)儀器進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控測(cè)定,合格后進(jìn)行常規(guī)標(biāo)本測(cè)定。(2)留取新鮮尿液30m1分置3個(gè)專(zhuān)用試管內(nèi),充分混勻,室溫2O℃一25℃下檢測(cè)及存放。于即時(shí)、2h、4h時(shí),分別對(duì)每份標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定。記錄RBC計(jì)數(shù)及各項(xiàng)參數(shù)結(jié)果。(3)留取新鮮尿液10ml于刻度離心管中,用標(biāo)準(zhǔn)離心機(jī)400×g離心5min,棄去上清尿。殘留0.2ml,搖勻,用相差顯微鏡觀察尿液紅細(xì)胞形態(tài),計(jì)數(shù)變異RBC百分比。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,應(yīng)用t檢驗(yàn),判斷標(biāo)本在室溫條件下放置時(shí)間對(duì)檢測(cè)RBC計(jì)數(shù)及其相關(guān)參數(shù)的影響。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、結(jié)果

1.室溫條件下尿液放置時(shí)間對(duì)鑒別血尿來(lái)源結(jié)果的影響:以腎穿刺活檢和臨床綜合診斷結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),判斷腎病組和非腎病組尿液標(biāo)本在室溫條件下放置時(shí)間對(duì)檢測(cè)RBC變異型信息提示的影響,并計(jì)算敏感度和特異度,見(jiàn)表1(省略)。即刻、2h和4h診斷RBC變異型信息的敏感度分別為94.9%、85.5%和82.6%;特異度分別為82.5%、82.5%和70.0%.室溫條件下尿液放置時(shí)間對(duì)檢測(cè)RBC計(jì)數(shù)及其相關(guān)參數(shù)的影響:用UF-100測(cè)定359例標(biāo)本,根據(jù)RBC信息提示結(jié)果將標(biāo)本分為非均一型血尿組、混合型血尿組和均一型血尿組,分析尿液標(biāo)本在室溫條件下放置時(shí)間對(duì)UF-100檢測(cè)RBC計(jì)數(shù)及其相關(guān)參數(shù)的影響,見(jiàn)表2。

以新鮮尿液即時(shí)檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn),標(biāo)本在室溫條件下放置時(shí)間,對(duì)非均一型RBC組的影響較大,RBC計(jì)數(shù)結(jié)果在放置2h時(shí)就有改變,與即刻結(jié)果比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.49,P<0.01);反映RBC橫截面積大小的P70-Fsc參數(shù)和RBC形態(tài)大小變異程度的Fsc-DW參數(shù)隨放置時(shí)間延長(zhǎng)而降低;Non1ysedRBC%為未溶解RBC百分比,是指具有較高前向散射光強(qiáng)度的RBC比例,正常情況下儀器對(duì)NonlysedRBC%值的要求是不低于20%,否則判為檢測(cè)結(jié)果不可靠,需人工復(fù)檢,結(jié)果表明隨時(shí)間延長(zhǎng)該值逐漸降低(t=13.11,P<0.01),說(shuō)明RBC在放置過(guò)程中有部分溶解和破壞。243例非均一型血尿組標(biāo)本即時(shí)檢測(cè)時(shí)只有1例NonlysedRBC%值<20%,放置2h時(shí)增至19例,NonlysedRBC%最低值為7.4%;放置4h時(shí)增加至20例,其中有4例Non-lysedRBC%值<5%,最低值為0.4%;旌闲脱蚪M各參數(shù)的變化也有類(lèi)似的表現(xiàn),但其程度較非均一性組低。對(duì)均一型血尿組,除Fsc-DW參數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外(t=3.31,P<0.05)外,其余參數(shù)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示放置時(shí)間對(duì)非均一型紅細(xì)胞的影響較均一型紅細(xì)胞更敏感。

三、討論

“腎小球性”與“非腎小球性”血尿的鑒別對(duì)各種泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和治療具有十分重要的意義,因?yàn)槎叩牟∫蛲耆煌,采取進(jìn)一步檢查和治療的原則亦不同。來(lái)源于腎小球的RBC在體內(nèi)因血管內(nèi)壓力而受損,在腎小管各段又受不同滲透壓和
 

pH值作用,紅細(xì)胞多為非均一型(大小不一、形態(tài)多樣、影紅細(xì)胞等),容積變小,甚至有破裂。這些細(xì)胞在離體后隨放置時(shí)間延長(zhǎng),其數(shù)量和形態(tài)的變異性會(huì)因尿液滲透壓、pH值和溶質(zhì)成分的變化而進(jìn)一步發(fā)生改變,另外細(xì)菌的大量繁殖也會(huì)促使其變化J,尿結(jié)晶形成的增多也會(huì)導(dǎo)致儀器誤認(rèn),以至于給出錯(cuò)誤的信息。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí):UF-100對(duì)腎小球血尿診斷敏感度隨放置時(shí)間的延長(zhǎng)有所下降,從即時(shí)檢測(cè)時(shí)的94.9%降為2h時(shí)的85.5%,4h時(shí)的82.6%。非腎小球來(lái)源的血尿,因其紅細(xì)胞未經(jīng)過(guò)腎小球?yàn)V膜擠壓損傷,在腎小管濾液中流經(jīng)的時(shí)間也短,受濾液、pH值和滲透壓變化的影響較小,因此紅細(xì)胞形態(tài)基本保持一致或變化較小,尿液排出后放置4h,其數(shù)量和形態(tài)的改變盡管不大,但也有12.5%(5/40)的RBC信息提示從均一型轉(zhuǎn)向混合型甚至非均一型,這部分標(biāo)本經(jīng)再次留取新鮮尿液復(fù)查,并結(jié)合相差顯微鏡檢查,其變異RBC%值<40%,證實(shí)為均一型RBC。

RBC Fsc-DW參數(shù)反映RBC形態(tài)大小和變異程度,當(dāng)大小不等、形狀不同的RBC增多時(shí),F(xiàn)sc-DW值就變大,反之則變小。RBC均一型血尿組標(biāo)本在放置2h后,F(xiàn)sc-DW值逐漸升高,說(shuō)明這時(shí)體系中RBC處于大小不一、形態(tài)不等的狀態(tài),尤其是有菌尿和(或)結(jié)晶存在的情況下,尿中RBC更易變形,且體積往往變小,結(jié)晶的產(chǎn)生也常被儀器誤認(rèn),致使給出錯(cuò)誤的RBC信息提示,這將直接導(dǎo)致臨床的誤診。有研究報(bào)道對(duì)于這些改變可以通過(guò)觀察RBC-MFL及RBC-FLDWSD參數(shù)值是否偏高來(lái)判斷儀器對(duì)RBC提示信息是否可靠,因?yàn)镽BC沒(méi)有細(xì)胞核,熒光強(qiáng)度低,而細(xì)菌和結(jié)晶的熒光強(qiáng)度較RBC強(qiáng)。RBC非均一型血尿組組和混合型血尿組標(biāo)本在放置2h后,F(xiàn)sc-DW值逐漸降低,說(shuō)明這時(shí)體系中RBC的變異性有所減少。我們對(duì)這部分標(biāo)本用相差顯微鏡觀察,有部分標(biāo)本的變異RBC數(shù)減低,新鮮尿液即時(shí)觀察時(shí)所見(jiàn)的變異型RBC(棘形、鋸齒形、環(huán)形、口形、裂形等)在室溫放置2h以后,有些消失不見(jiàn),而出現(xiàn)較多影紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片等,可能原因是尿液在存放過(guò)程中受多種因素的影響,如尿pH值、比重、利尿劑的應(yīng)用(尿液稀釋滲透壓過(guò)低)、尿素分解形成堿性尿等,致使變異的RBC部分溶解、破裂或釋出血紅蛋白而成為影紅細(xì)胞,有些輕微皺縮變形的紅細(xì)胞因腫脹而變成形態(tài)正常紅細(xì)胞,此時(shí)用儀器檢測(cè),RBC的形態(tài)變異性減低,RBC計(jì)數(shù)結(jié)果降低,Non.1ysedRBC%值降低,RBC提示信息改變。

尿液標(biāo)本在室溫中放置,會(huì)造成UF-100對(duì)尿紅細(xì)胞提示信息改變、尿RBC參數(shù)改變,其中對(duì)非均一性RBC的影響較均一性RBC更敏感。鑒于此,使用UF-100檢測(cè)尿液RBC參數(shù)時(shí),尿液必須新鮮,且在2h內(nèi)完成。按照多數(shù)醫(yī)院的工作規(guī)律,患者清晨6時(shí)留取晨尿,8時(shí)送至檢驗(yàn)科,加上標(biāo)本檢測(cè)的前序工作,到上機(jī)檢測(cè)完畢,最快也要3~4h,這一問(wèn)題不解決,會(huì)直接影響UF-100尿液RBC的檢測(cè)質(zhì)量。


 
...
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠(chéng)聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學(xué)論壇 - 醫(yī)學(xué)博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
皖I(lǐng)CP備06007007號(hào)
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會(huì)員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗(yàn)證