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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學全在線 > 理論教學 > 基礎(chǔ)學科 > 細胞和分子免疫學 > 正文:細胞因子及其受體生物活性檢測法
    

細胞因子及其受體的生物活性檢測法

 

  (六)抗體形成法

  IL-6可在體外刺激某些B淋巴細胞系產(chǎn)生和分泌免疫球蛋白,常用的指示細胞有分泌IgG的ARH-77、CESS和分泌IgM的SKW6.CL-4。在一定的條件下,待檢樣品中IL-6水平與培養(yǎng)細胞上清IgG或IgM水平正相關(guān),通過標準IL-6的對照可推算出待檢樣品中IL-6的活性。

表4-22 細胞因子生物學活性檢測方法(舉例)

被檢細胞因子

實驗系統(tǒng)

可干擾的因素
IL-1 D.10(小鼠T細胞) 增殖法(3H-TdR、MTT) 人IL-2;小鼠IL-2、IL-4、IL-7、GM-CSF、TNF等
  小鼠胸腺細胞 增殖法 TGF-β1、β2抑制作用
  IL-4(小鼠胸腺瘤) CTLL轉(zhuǎn)換法(增殖法) 小鼠IL-4
  黑素瘤細胞A352 增殖抑制法  
IL-2 CTLL(小鼠殺傷性T細胞系) 增殖法 小鼠IL-4
IL-3 KG1(髓樣白血病細胞) 增殖法  
  TF-1(前髓樣細胞) 增殖法 EPO、IL-5、IL-6、GM-CSF
  小鼠造血細胞系FDCP-1 增殖法 GM-CSF
  人巨核母細胞白血病細胞系Mo7E 增殖法 GM-CSF、IL-9
  骨髓半固體造血祖細胞集落形成 20α類固醇脫氫酶 GM-CSF
    集落種類和數(shù)量 GM-CSF、IL-1、IL-6、G-CSF、M-CSF
IL-4 小鼠B細胞 誘導(dǎo)CD23、MHCⅡ類 IFN-γ有抑制作用
    抗原表達  
  PHA刺激的小鼠T細胞 增殖法 IL-2
  IL-4依賴細胞株 增殖法 IL-2
  人IL-4R轉(zhuǎn)染CTLL 增殖法 IL-2
IL-5 抗Ig(或SAC)刺激B細胞誘導(dǎo)人或小鼠骨髓半固體培養(yǎng)中嗜酸性粒細胞成熟 增殖法 IL-3
  抗Ig處理的小鼠B細胞 IgM分泌  
  BCL-1(B淋巴瘤細胞) 增殖法 IL-4
IL-6 TF-1(前髓樣細胞) 增殖法 EPO、IL-3、IL-5、GM-CSF
  B9(小鼠雜交瘤細胞) 增殖法 小鼠IL-4、IL-11
  7TD1(小鼠雜交瘤細胞) 增殖法 IL-11
  BM60 增殖法  
  HepG2(肝細胞) Fibronogen產(chǎn)生 LIF
  CESS(EBV轉(zhuǎn)化人B細胞)   IgGβ1、TGF-β2有抑制作用
  DKW6.CL-4 IgM產(chǎn)生 TGFβ1、TGF-β2有抑制作用
IL-7 骨髓前B細胞 增殖法  
IL-8 中性粒細胞 軟瓊脂趨化法 其它化學趨化物質(zhì)
    小室趨化法 G-CSF、M-CSF
IL-9 Mo7E(巨核細胞白血病系) 增殖法 IL-3、GM-CSF
IL-11 7TD1(小鼠雜交瘤細胞系) 增殖法 IL-6
  B9(小鼠雜交瘤細胞系) 增殖法 小鼠IL-4、IL-6
  T1165 增殖法 IL-6
IL-12 PBMC IFN-γ產(chǎn)生 IFNα/β/γ
  PHA活化T淋巴母細胞 增殖法 IL-2、IL-4
  PBL LAK殺傷(與IL-2協(xié)同) IL-2、IL-6
  骨髓祖細胞 GM集落形成 IL-3;TGF-β有抑制作用
  TF-1(前髓樣細胞) 增殖法 EPO、IL-3、IL-5、IL-6
  小鼠造血細胞FDCP-1 增殖法 IL-3
  人巨核母細胞白血病細胞系Mo7E 增殖法 IL-3、IL-9
  AML-193 增殖法  
  造血祖細胞 粒細胞集落形成 IL-3、IL-9
  中性粒細胞 活化后超氧釋放 GM-CSF
  WEHI164亞克隆13或L929 殺傷作用 GM-CSF、IL-6
      TNF-α和TNF-β(LT)有相似的殺傷作用
PDGF 成纖維細胞和SS、WHG、WI26、WI28 增殖法 FGF(1、2、5)、EGF、TGF-β、IL-1、TNF等
INF-α/β/γ 上皮細胞如Hep-2、Wish 抵抗病毒(如VSV)的致病變作用 FN-α/β/γ有相似的生物學活性
TGF-β 成纖維細胞(半固體培養(yǎng)) 增殖法  
  成骨細胞單層培養(yǎng) 增殖法  
  PHA刺激PBMC 增殖抑制法  
  ConA/IL-1誘導(dǎo)胸腺細胞 增殖抑制法 IL-2、IL-4
  人黑素瘤細胞A375 增殖抵制法 IL-1、IL-2、IL-4

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