(六)抗體形成法
IL-6可在體外刺激某些B淋巴細胞系產(chǎn)生和分泌免疫球蛋白,常用的指示細胞有分泌IgG的ARH-77、CESS和分泌IgM的SKW6.CL-4。在一定的條件下,待檢樣品中IL-6水平與培養(yǎng)細胞上清IgG或IgM水平正相關(guān),通過標準IL-6的對照可推算出待檢樣品中IL-6的活性。
表4-22 細胞因子生物學活性檢測方法(舉例)
被檢細胞因子 |
實驗系統(tǒng) |
可干擾的因素 | |
IL-1 | D.10(小鼠T細胞) | 增殖法(3H-TdR、MTT) | 人IL-2;小鼠IL-2、IL-4、IL-7、GM-CSF、TNF等 |
小鼠胸腺細胞 | 增殖法 | TGF-β1、β2抑制作用 | |
IL-4(小鼠胸腺瘤) | CTLL轉(zhuǎn)換法(增殖法) | 小鼠IL-4 | |
黑素瘤細胞A352 | 增殖抑制法 | ||
IL-2 | CTLL(小鼠殺傷性T細胞系) | 增殖法 | 小鼠IL-4 |
IL-3 | KG1(髓樣白血病細胞) | 增殖法 | |
TF-1(前髓樣細胞) | 增殖法 | EPO、IL-5、IL-6、GM-CSF | |
小鼠造血細胞系FDCP-1 | 增殖法 | GM-CSF | |
人巨核母細胞白血病細胞系Mo7E | 增殖法 | GM-CSF、IL-9 | |
骨髓半固體造血祖細胞集落形成 | 20α類固醇脫氫酶 | GM-CSF | |
集落種類和數(shù)量 | GM-CSF、IL-1、IL-6、G-CSF、M-CSF | ||
IL-4 | 小鼠B細胞 | 誘導(dǎo)CD23、MHCⅡ類 | IFN-γ有抑制作用 |
抗原表達 | |||
PHA刺激的小鼠T細胞 | 增殖法 | IL-2 | |
IL-4依賴細胞株 | 增殖法 | IL-2 | |
人IL-4R轉(zhuǎn)染CTLL | 增殖法 | IL-2 | |
IL-5 | 抗Ig(或SAC)刺激B細胞誘導(dǎo)人或小鼠骨髓半固體培養(yǎng)中嗜酸性粒細胞成熟 | 增殖法 | IL-3 |
抗Ig處理的小鼠B細胞 | IgM分泌 | ||
BCL-1(B淋巴瘤細胞) | 增殖法 | IL-4 | |
IL-6 | TF-1(前髓樣細胞) | 增殖法 | EPO、IL-3、IL-5、GM-CSF |
B9(小鼠雜交瘤細胞) | 增殖法 | 小鼠IL-4、IL-11 | |
7TD1(小鼠雜交瘤細胞) | 增殖法 | IL-11 | |
BM60 | 增殖法 | ||
HepG2(肝細胞) | Fibronogen產(chǎn)生 | LIF | |
CESS(EBV轉(zhuǎn)化人B細胞) | IgGβ1、TGF-β2有抑制作用 | ||
DKW6.CL-4 | IgM產(chǎn)生 | TGFβ1、TGF-β2有抑制作用 | |
IL-7 | 骨髓前B細胞 | 增殖法 | |
IL-8 | 中性粒細胞 | 軟瓊脂趨化法 | 其它化學趨化物質(zhì) |
小室趨化法 | G-CSF、M-CSF | ||
IL-9 | Mo7E(巨核細胞白血病系) | 增殖法 | IL-3、GM-CSF |
IL-11 | 7TD1(小鼠雜交瘤細胞系) | 增殖法 | IL-6 |
B9(小鼠雜交瘤細胞系) | 增殖法 | 小鼠IL-4、IL-6 | |
T1165 | 增殖法 | IL-6 | |
IL-12 | PBMC | IFN-γ產(chǎn)生 | IFNα/β/γ |
PHA活化T淋巴母細胞 | 增殖法 | IL-2、IL-4 | |
PBL | LAK殺傷(與IL-2協(xié)同) | IL-2、IL-6 | |
骨髓祖細胞 | GM集落形成 | IL-3;TGF-β有抑制作用 | |
TF-1(前髓樣細胞) | 增殖法 | EPO、IL-3、IL-5、IL-6 | |
小鼠造血細胞FDCP-1 | 增殖法 | IL-3 | |
人巨核母細胞白血病細胞系Mo7E | 增殖法 | IL-3、IL-9 | |
AML-193 | 增殖法 | ||
造血祖細胞 | 粒細胞集落形成 | IL-3、IL-9 | |
中性粒細胞 | 活化后超氧釋放 | GM-CSF | |
WEHI164亞克隆13或L929 | 殺傷作用 | GM-CSF、IL-6 | |
TNF-α和TNF-β(LT)有相似的殺傷作用 | |||
PDGF | 成纖維細胞和SS、WHG、WI26、WI28 | 增殖法 | FGF(1、2、5)、EGF、TGF-β、IL-1、TNF等 |
INF-α/β/γ | 上皮細胞如Hep-2、Wish | 抵抗病毒(如VSV)的致病變作用 | FN-α/β/γ有相似的生物學活性 |
TGF-β | 成纖維細胞(半固體培養(yǎng)) | 增殖法 | |
成骨細胞單層培養(yǎng) | 增殖法 | ||
PHA刺激PBMC | 增殖抑制法 | ||
ConA/IL-1誘導(dǎo)胸腺細胞 | 增殖抑制法 | IL-2、IL-4 | |
人黑素瘤細胞A375 | 增殖抵制法 | IL-1、IL-2、IL-4 |