4．Dig標(biāo)記探針雜交后處理液
用ddH2O溶液并定容至1000ml。
用ddH2O溶解并定容至1000ml。
配制同上。
左旋咪唑有消除內(nèi)源性磷酸酶的作用。
九、原位雜交信號顯示
目前應(yīng)用原位雜交方法中，信號的顯示主要有放射自顯影，酶底物及免疫金銀等方法，在此歸納有關(guān)的主要試劑。
1．A-B顯影液
稱取上述試劑，按配方分別溶于50ml ddH2O中，于顯影前，在室溫將兩者（A液及B液)按1：1混合，稍加搖動促進(jìn)混合，即可將貼有切片標(biāo)本的切片放入顯影液，于室溫避光（可暗室)反應(yīng)5～15min。顯影時間和溫度相關(guān)，需自己根據(jù)情況摸索。終止反應(yīng)只需將顯影液倒出，自來水沖洗即可。倒出的AB顯影液可暫時不扔，光鏡下觀察，若明顯顯影不夠，還可重新或繼續(xù)顯影。AB顯影液要求臨用前配制，在顯影時才將AB二液混合。否則，A液過久會產(chǎn)生黃色沉淀，增加背景。
AB液用于免疫金銀法中，使金標(biāo)記顆粒信號放大，形成棕黑色沉淀。
2．DAB-H2O顯色液
配制方法見附錄一。
該液用于標(biāo)本被標(biāo)記上辣根過氧化物酶（HRP)的方法。產(chǎn)物為棕黃色。
3．NBT-BCIP顯色液
配制方法，詳見附錄一。
該液用于有堿性磷酸酶標(biāo)記物的方法中。產(chǎn)物為紫藍(lán)色。
4．Kodak D-19顯影液
配制：先將500ml水中加溫50℃，按上述配方順序加藥，同時充分?jǐn)嚢�，每加一種藥完全溶解后，再加另一種藥品，否則，所配的顯影液易產(chǎn)生混濁而效果差，最后補(bǔ)足水至1000ml充分混合，室溫或4℃避光保存。最好包上紙。
該液用于放射自顯影時的顯影。
5．Kodak F-5定影液（酸性堅(jiān)膜定影液)
※：28%醋酸為3份冰醋酸和8份水混合液。
配制：同Kodak D-19顯影液。
