這一反應(yīng)過(guò)程，可用以下簡(jiǎn)圖（圖8-1)說(shuō)明。圖中黑圈表示標(biāo)記抗原，白圈表示非標(biāo)記抗原，長(zhǎng)條代表抗體，每個(gè)抗體有兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)記抗原與非標(biāo)記抗原對(duì)抗體有同等的結(jié)合能力。
圖8-1 放射免疫分析原理示意圖
從圖中可見(jiàn)，當(dāng)標(biāo)記抗原與抗體量一定時(shí)，結(jié)合率（B/B+F)隨抗原量增加而降低。在實(shí)際工作中，以B/T的值為縱座標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫座標(biāo)，繪成曲線，即競(jìng)爭(zhēng)性抑制曲線，或稱準(zhǔn)確曲線。將未知濃度的樣品按同樣條件操作，所得結(jié)合率（%)與標(biāo)準(zhǔn)曲線相比，即可查出樣品中待測(cè)抗原的濃度。
放射免疫分析典型的操作程序如下：首先配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，并各取一定體積；于其中加入一定量的標(biāo)記抗原和特異性抗體；在一定條件下使之反應(yīng)平衡后，采取適當(dāng)方法將B與F分離；分別測(cè)量其放射性；繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖8-2)。對(duì)樣品中抗原的測(cè)定，則可在同樣條件下操作，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得含量。
圖8-2 標(biāo)準(zhǔn)曲線左：橫座標(biāo)為等份刻度； 右：橫座標(biāo)為對(duì)數(shù)刻度
由此可見(jiàn)，要成功地進(jìn)行放射免疫分析，必須解決好以下3個(gè)關(guān)鍵性技術(shù)問(wèn)題：
�。�1)標(biāo)記抗原：要求其純度高、免疫化學(xué)活性好、比放射性強(qiáng)、用量適當(dāng)。
�。�2)制備抗體：要求其特異性高、選用的稀釋度適當(dāng)。
（3)分離B與F：理想的分離方法應(yīng)當(dāng)是分離完全、穩(wěn)定可靠、操作簡(jiǎn)單、適用范圍廣。
