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玻璃酸酶測定法,執(zhí)業(yè)藥師考試網(wǎng)輔導藥物分析西藥分析 | |||||
| 來源：醫(yī)學全在線 更新：2007-5-17 考研論壇 | |||||
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(1) 醋酸－醋酸鉀緩沖液 取醋酸鉀14g與冰醋酸20.5ml,加水使成1000ml。 (2) 磷酸鹽緩沖液 取磷酸二氫鈉2.5g、無水磷酸氫二鈉1.0g與氯化鈉8.2g，加水使成1000ml。 (3) 水解明膠 取明膠50g，加水1000ml，在121℃加熱90分鐘，然后冷凍干燥。 (4) 水解明膠稀釋液 取磷酸鹽緩沖液與水各250ml，加水解明膠330mg，搖勻，在0～4℃保存。如溶液不發(fā)生渾濁，可繼續(xù)使用。 (5) 血清貯備液 取新鮮牛血清或凍干牛血清(先用水溶解并稀釋至標示量體積)1份，加醋酸－醋酸鉀緩沖液9份稀釋，再以4mol/L鹽酸溶液調節(jié)pH值至3.1，放置18～24小時后再用。在0～4℃保存，可應用30日。 (6) 血清溶液醫(yī)學全.在.線網(wǎng)站f1411.cn 血清貯備液中血清總固體(取牛血清適量，置裝有潔凈砂粒并在105℃干燥至恒重的坩堝中，置水浴上蒸干后，再在105℃干燥至恒重)在8％左右者,取1份,用醋酸－醋酸鉀緩沖液3份稀釋；血清總固體在5％左右者，取1份，用醋酸-醋酸鉀緩沖液2份稀釋；臨用時配制。 (7) 玻璃酸鉀貯備液 取預先經(jīng)五氧化二磷減壓干燥48小時的玻璃酸鉀，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液。在0℃以下保存，可應用30日。 (8) 玻璃酸鉀溶液 取玻璃酸鉀貯備液1份,用磷酸鹽緩沖液1份稀釋。臨用時配制。 標準品溶液的制備 取玻璃酸酶標準品適量，精密稱定，加冷的水解明膠稀釋液制成每1ml中含1.5單位的溶液。臨用時配制。 供試品溶液的制備 按估計單位精密稱取供試品適量，加冷的水解明膠稀釋液制成每1ml中含1.5單位的溶液。臨用時配制。 標準曲線的制備醫(yī)學全在線www.med126.com 取大小相同的試管12支，按順序加入標準品溶液0.00、0.10、0.20、0.30、0.40與0.50ml，每份2支；再依次相應加入水解明膠稀釋液0.50、 0.40、0.30、0.20、0.10與0.00ml，每隔30秒鐘順序加入玻璃酸鉀溶液0.50ml，使每一管的總體積為1.00ml,搖勻，置37 ±0.5水浴中；每管準確保溫30分鐘后，每間隔30秒鐘順序取出，立即順序加入血清溶液4.0ml, 搖勻，在室溫放置30分鐘，搖勻，在640nm的波長處測定吸收度；同時以磷酸鹽緩沖液0.50ml代替玻璃酸鉀溶液,加水解明膠稀釋液0.50ml,搖勻，按上述方法自 “置37±0.5℃的水浴中”起同樣操作，作為空白。以吸收度為縱座標，標準品溶液的單位數(shù)為橫座標繪制標準曲線。 測定法 取大小相同的試管6支，依次加供試品溶液0.20、0.30與0.40ml,每份2支;再依次相應加入水解明膠稀釋液0.30、0.20與 0.10ml，照標準曲線的制備項下，自“每隔30秒鐘順序加入玻璃酸鉀溶液0.50ml”起，依法測定，自標準曲線上查得單位數(shù)后，分別除以供試品的重量(mg), 算出6份供試品的平均數(shù)，即為玻璃酸酶的效價單位。 |
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| 文章錄入：凌云 責任編輯：凌云 | |||||
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