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藥物分析西藥分析—熒光分析法 | |||||
來源:醫(yī)學全在線 更新:2007-5-16 考研論壇 | |||||
所用的儀器為熒光計或熒光分光光度計,按各藥品項下的規(guī)定,選定激發(fā)光波長和發(fā)射光波長,并配制對照品溶液和供試品溶液。 由于不易測定絕對熒光強度,故熒光分析法都是在一定條件下,用對照品溶液測得濃度的線性范圍后,再在每次測定前,用一定濃度的對照品溶液校定儀器的靈敏度;然后在相同的條件下,讀取對照品溶液及其試劑空白與供試品溶液及其試劑空白的讀數(shù),用下式計算供試品濃度: R<[i]>-R<[ib]> C<[i]>=──────×C<[r]> R<[r]>-R<[rb]> 式中 C<[i]>為供試品溶液的濃度; C<[r]>為對照品溶液的濃度; R<[i]>為供試品溶液的讀數(shù); R<[ib]>為供試品溶液試劑空白的讀數(shù); R<[r]>為對照品溶液的讀數(shù); R<[rb]>為對照品溶液試劑空白的讀數(shù)。 因熒光分析法中的濃度與讀數(shù)的線性較窄,故(R<[i]>-R<[ib]>)/(R<[r]>-R<[rb]>)應為0.50~2.0;如有超過,應在調(diào)節(jié)溶液濃度后再測。醫(yī)學全.在線f1411.cn 對易被光分解的品種 ,可選擇一種激發(fā)光和發(fā)射光波長與之近似而對光穩(wěn)定的物質溶液,例如藍色熒光可用硫酸奎寧的稀硫酸溶液,黃綠色熒光可用熒光素鈉水溶液,紅色熒光可用羅丹明B水溶液等,先與對照品溶液比較測定其讀數(shù)關系,并在測定供試品溶液時用以代替對照品溶液,以校定儀器的靈敏度。 熒光分析法因靈敏度高,故干擾因素也多。溶劑不純會帶入較大誤差,應先作空白檢查,必要時,應用玻璃磨口蒸餾器蒸餾后再用。溶液中的懸浮物對光有散射作用,必要時,應用垂熔玻璃濾器濾過或用離心法除去。所用的玻璃儀器與測定池等也必須保持高度潔凈。溫度對熒光強度有較大的影響,測定時應控制溫度一致。溶液中的溶氧有降低熒光作用,必要時可在測定前通入惰性氣體除氧。 |
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文章錄入:凌云 責任編輯:凌云 | |||||
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