嚴(yán)格來說，LAK細(xì)胞并非是一個獨立的淋巴群或亞群，而是NK細(xì)胞或T細(xì)胞體外培養(yǎng)時，在高劑量IL-2等細(xì)胞因子誘導(dǎo)下成為能夠殺傷NK不敏感腫瘤細(xì)胞的殺傷細(xì)胞，稱為淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（lymphokine activated killer cells,LAK)。目前應(yīng)用LAK細(xì)胞過繼免疫療法（adoptivf1411.cneimmunotherapy)與直接注射IL-2等細(xì)胞因子聯(lián)合治療某些腫瘤，已獲得一定的療效。
1.LAK的發(fā)現(xiàn) 1982年Grimm等首先報道外周血單個核細(xì)胞（PBMC)中加入IL-2體外培養(yǎng)4-6天，能誘導(dǎo)出一種非特異笥的殺傷細(xì)胞，這類細(xì)胞可以殺傷多種對CTL、NK不敏感的腫瘤細(xì)胞。目前尚未發(fā)現(xiàn)LAK細(xì)胞特有的表面標(biāo)志，許多實驗表明，LAK細(xì)胞的前體細(xì)胞是NK細(xì)胞和T細(xì)胞。
2.LAK的臨床應(yīng)用 1984年11月Rosenberg研究組經(jīng)美國食品和藥品檢驗局（Us Food and Drug Administration,FDA)批準(zhǔn)下，首次應(yīng)用IL-2與LAK協(xié)同治療25例腎細(xì)胞癌、黑素瘤、肺癌、結(jié)腸癌等腫瘤患者。治療用LAK細(xì)胞數(shù)量在0.6-18.4*1010，IL-2用量2.8*105-3.32*106U/kg。其中11例腫瘤縮小超過50%，1例黑素瘤完全消退。1988年該研究組總結(jié)了IL-2與LAK細(xì)胞協(xié)同治療222例腫瘤患者，其中16便患者腫瘤轉(zhuǎn)移灶完全消退，26例患者腫瘤消退50%以上，該療法對轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌、黑素瘤、結(jié)腸癌和非何杰金氏淋巴瘤患者的療效較顯著。有報道乳腺癌、膀胱癌局部應(yīng)用IL-2進(jìn)行治療也獲得明顯療效。
由于IL-2用量大，在治療過程中可出現(xiàn)毒副反應(yīng)，最常見和最嚴(yán)重的毒副作用是出現(xiàn)毛細(xì)血管滲漏綜合征（capillary leak syndrome,CLS)，主要表現(xiàn)為全身性水腫和多器官功能失調(diào)，可引起胸腹腔積液、肺間質(zhì)水腫和充血性心力衰竭。引地盧CLS的機理可能與內(nèi)皮細(xì)胞損傷和產(chǎn)生血管活性物質(zhì)有關(guān)。
1986年Rosenberg研究組首先報道了腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（tumorinfiltrating lymphocyte,TIL)。TIL細(xì)胞表型具有異質(zhì)性，一般來說，TIL中絕大多數(shù)細(xì)胞CD3陽性。不同腫瘤來源的TIL細(xì)胞中，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞的比例有差異，大多數(shù)情況下以CD8+T細(xì)胞為主。新鮮分離的TIL中CD25+細(xì)胞百分率較低，隨著體外加IL-2培養(yǎng)時間的延長，CD25+細(xì)胞百分率逐漸升高。NK細(xì)胞的標(biāo)記（CD16，CD56)在TIL體外加IL-2培養(yǎng)過程中有先增高后降低的趨勢。
用機械處理和酶消化方法，從腫瘤局部分離出腫瘤浸潤的淋巴細(xì)胞，加入高劑量IL-2體外培養(yǎng)，殘存的腫瘤細(xì)胞7-13天全部死亡。經(jīng)IL-2活化的TIL與來自PBMC的LAK細(xì)胞比較，其特點是：（1)50-100倍，因此在治療中可以減少效應(yīng)細(xì)胞和IL-2的用量，而且對LAK治療無效的晚期腫瘤仍有一定治療效果；（2)主要由CD8陽性細(xì)胞誘導(dǎo)而來，在動物實驗中發(fā)現(xiàn)TIL殺傷腫瘤作用具有特異性；（3)宿主的抑制狀態(tài)有利于TIL的殺傷作用，因此治療時加用環(huán)磷酰胺（Cy)100mg/kg可明顯提高療效，可能與免疫抑制藥能消除抑制性細(xì)胞或因子，增強過繼免疫治療作用有關(guān)，因而可減少IL-2的用量，降低毒副反應(yīng)；（4)可從手術(shù)切下腫瘤組織、腫瘤引流淋巴結(jié)、癌性胸腹水中獲得淋巴細(xì)胞，經(jīng)加IL-2培養(yǎng)后，其生長、擴增能力強于LAK細(xì)胞。已有報道應(yīng)用TIL治療14例轉(zhuǎn)移性肺癌等晚期腫患者，其中4例腫瘤縮小50%以上，副作用明顯低于IL-2/LAK療法。
應(yīng)用LAK或TIL細(xì)胞治療腫瘤國內(nèi)外進(jìn)展都很快，今后發(fā)展的方向是：（1)提高LAK細(xì)胞的純度，應(yīng)用活化LAK細(xì)胞貼壁的特性，純化粘附LAK（adherent-LAK,A-LAK)細(xì)胞。在IL-2誘導(dǎo)下數(shù)量可增加100倍，而且抗腫瘤轉(zhuǎn)移的作用比LAK強20-50倍。（2)改變繼承轉(zhuǎn)移細(xì)胞在體內(nèi)的分布，如改變注射細(xì)胞途徑和方法，達(dá)到局部/區(qū)域繼承免疫療法的目的。（3)與其它細(xì)胞因子如IL-12、IFN、TNF-α和CSF聯(lián)合治療，增強LAK的殺傷活性，另有報道，抗CD3單抗與IL-2協(xié)同，能顯著提高LAK細(xì)胞的數(shù)量和殺傷活性。應(yīng)用CD3單抗誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞稱為CD3抗體激活的殺傷細(xì)胞（CD3McAb activated killer cells,CD3AK)，抗體含量在10-20ng/ml即可達(dá)到刺激殺傷活性的高峰，體外培養(yǎng)數(shù)天后即可出現(xiàn)明顯的殺傷活性。CD3AK激活需要單核細(xì)胞存在，其增殖速度和細(xì)胞毒活性均高于LAK。所有的D3+CD8+T細(xì)胞和1-6%CD3+CD4+T細(xì)胞可誘導(dǎo)出CD3AK。CD3AK已開支應(yīng)用于臨床。（4)將某些細(xì)胞因子（如IL-2、TNF等)cDNA轉(zhuǎn)染LAK或TIL用于基因治療。
表7-14 影響LAK效應(yīng)的因素及機理
| 影響因素 | 調(diào)節(jié)方式 | 效 應(yīng) | ||
| 促進(jìn)作用 | 抑制作用 | |||
| 細(xì)胞 | 單核-巨噬細(xì)胞 | 雙向 | T、NK產(chǎn)生IL-2，表達(dá)高親和性IL-2r | 產(chǎn)生PGE2，抑制IL-2產(chǎn)生，消炎痛（indomethacin)可解除Mφ抑制作用 |
| 腫瘤細(xì)胞 | 雙向 | f1411.cn/jianyan/腫瘤細(xì)胞及其提取物增強混合淋巴細(xì)胞腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)和體外致敏的LAK活性 | 腫瘤細(xì)胞分泌的因子抑制LAK活性 | |
| 中性粒細(xì)胞 | 負(fù) | 產(chǎn)生超氧化陰離子（O2-) | ||
| 紅細(xì)胞 | 正 | 分泌超氧化物歧化酶，抑制O2-作用，促進(jìn)淋巴細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ和表達(dá)IL-2R | ||
| 細(xì)胞因子 | IL-1 | 正 | IL-2、IFN-γ產(chǎn)生和IL-2R表達(dá)，增強LAK的ADCC效應(yīng) | |
| IL-3 | 正 | + | ||
| IL-4 | 雙向 | +，多為小鼠實驗系統(tǒng) | -，抑制IL-2誘導(dǎo)的LAK活性 | |
| IL-5 | 正 | 協(xié)同IL-2誘導(dǎo)LAK活性 | ||
| IL-6 | 正 | 協(xié)同IL-2誘導(dǎo)LAK活性 | ||
| IL-7 | 正 | 單獨可誘導(dǎo)LAK活性 | ||
| IL-12 | 正 | 協(xié)同IL-2誘導(dǎo)LAK活性 | ||
| GM-CSF | 正 | 促進(jìn)Mφ分泌IL-1、TNF-α | ||
| TNF-α | 正 | 與IL-2有協(xié)同作用，LAK分泌 | ||
| TNF-α直接作用 | ||||
| IFN-γ | 雙向 | 促進(jìn)LAK分化 | 可通過單核-巨噬細(xì)胞分泌PGE2抑制LAK活性 | |
| IFN-β | 負(fù) | 抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生和受體 | 抑制細(xì)胞因子產(chǎn)生和受體表達(dá) | |
| LR | 正 | 促進(jìn)LAK殺傷活性 | ||
| 抗體 | 抗腫瘤細(xì)胞 | 正 | 促進(jìn)LAK的ADCC | |
| 抗CD3 | 正 | 與IL-2聯(lián)合應(yīng)用，促進(jìn)LAK活性，增加LAK數(shù)量 | ||
| 抗Tac，抗TfR | 負(fù) | 封閉細(xì)胞表面結(jié)構(gòu) | ||
| 抗IFA-1 | 負(fù) | 抑制效應(yīng)細(xì)胞-靶細(xì)胞粘附 | ||
| 抗LAK-1 | 負(fù) | |||
| 雙特異性抗體 | 正 | 抗腫瘤和CD3McAb重構(gòu)的雙特異性抗體 | ||
| 多糖激素神經(jīng)肽 | 蘑菇多糖、黃芪 | 正 | ||
| 去甲腎上腺素 | 正 | 激活PKC | ||
| 生長抑素 | 正 | 抑制腺苷酸環(huán)化酶 | ||
| 糖皮質(zhì)激素 | 負(fù) | - | ||
| PGE2 | 負(fù) | |||
| β-內(nèi)啡肽 | 負(fù) | |||
| 環(huán)孢菌素A | 負(fù) | - |
表7-15 生藥活性多糖對細(xì)胞因子產(chǎn)生、淋巴細(xì)胞功能和抗腫瘤的增強作用
| 名稱 | 調(diào)節(jié)作用 | 應(yīng)用范圍 |
| 香菇多糖（Lentinan) | 促進(jìn)IL-1、IL-2產(chǎn)生 | 免疫增強劑抗腫瘤 |
| 提高Th功能 | ||
| 促進(jìn)T細(xì)胞分化和CTL殺傷活性 | ||
| 協(xié)同IL-2激活的LAK殺傷活性 | ||
| 協(xié)同IL-2激活的LAK殺傷活性 | ||
| 枸杞子多糖（Kycium Bsrbarum polysaccharide,LBS) | 促進(jìn)IL-2分泌 | 調(diào)節(jié)免疫功能 |
| 抗衰老 抗腫瘤（動物實驗) | ||
| 刺五加多糖（polysaccharide of Acanthopanax Senlicosus,PAS) | 促進(jìn)淋巴細(xì)胞對絲裂原的 | 抗癌、抗白血病 |
| 增殖反應(yīng) 協(xié)同ConA誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞分泌IL-2誘生IFN促進(jìn)CTL活性 | （動物實驗) | |
| 黃芪多糖（Astragalus polysaccharide,APS) | 促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖 | 治療化療引起 |
| 增強Th功能 | 的免疫抑制 | |
| 增強病毒誘生IFN | ||
| 促進(jìn)IL-1、IL-2產(chǎn)生 | ||
| F3成份增強LAK活性 |
