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實(shí)用免疫細(xì)胞與核酸:第十五章 自身抗體的免疫組織化學(xué)檢測(cè)方法和應(yīng)用

Friou等(1957)首先用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢查系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人血清中的抗核抗體后,隨后,在多種自身免疫性疾病的診斷中,廣泛應(yīng)用了免疫細(xì)胞化學(xué)方法,為這類疾病的診斷和研究提供了重要的依據(jù)。所謂自身免疫性疾病是指自身免疫反應(yīng)引起組織損傷的疾病。在臨床方面…

Friou等(1957)首先用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢查系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人血清中的抗核抗體后,隨后,在多種自身免疫性疾病的診斷中,廣泛應(yīng)用了免疫細(xì)胞化學(xué)方法,為這類疾病的診斷和研究提供了重要的依據(jù)。

所謂自身免疫性疾病是指自身免疫反應(yīng)引起組織損傷的疾病。在臨床方面,有的自身免疫性疾病已明確是自身抗體直接作用于自身抗原產(chǎn)生的自身免疫應(yīng)答所致;有的則難以證實(shí)自身免疫應(yīng)答是組織損傷的原因。但是,在自身免疫疾病患者中能查出自身抗體,這一點(diǎn)卻是一致的。至今,已無人對(duì)自身免疫現(xiàn)象及自身免疫性疾病的存在發(fā)生懷疑。

Mackay 和Bune從www.med126.com臨床角度提出六點(diǎn)作為自身免疫性疾病的特征:①血清免疫球蛋白在1.5g/100ml以上;②有自身抗體;③病變部分有免疫球蛋白的存在;④病變部位有淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn);⑤用腎上腺皮質(zhì)激素治療有效;⑥在同一個(gè)體與其他自身免疫疾病共存。

根據(jù)上述標(biāo)準(zhǔn)將自身免疫疾病歸納為如下三類:①全身各臟器組織發(fā)生廣泛性進(jìn)行性病變,并可查出自身抗體的疾病,如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)(抗核抗體),類風(fēng)濕關(guān)節(jié) 炎(類風(fēng)濕因子)等;②對(duì)特定臟器發(fā)生局限性自身免疫疾病,并可檢查出特定臟器組織細(xì)胞抗體的同時(shí),出現(xiàn)局限性病變的疾患,如自身免疫性溶血性貧血(抗紅細(xì)胞抗體),橋本氏。ǹ辜谞钕倏贵w)等;③一過性自身免疫疾病。如咽喉,扁體感染在遠(yuǎn)離病灶的器官,由于自身免疫機(jī)制而引起一過性病變,如腎小球腎炎,風(fēng)濕熱等。

不論從臨床診斷,治療和預(yù)后隨訪,或是對(duì)自身免疫疾病的機(jī)理研究,自身抗體及其檢查方法的研究是一個(gè)重要的問題。目前,對(duì)于自身抗體的研究越來越廣泛,現(xiàn)在已有多種自身抗體被發(fā)現(xiàn)。用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法,檢查自身抗體已廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)中,并已列入某些疾病的常規(guī)檢查項(xiàng)目。用免疫熒光技術(shù)間接法檢查病人血清中對(duì)自身某種成分的抗體,其突出的優(yōu)點(diǎn)是抗體和相應(yīng)組織成分結(jié)合后,通過觀察發(fā)現(xiàn)明亮熒光的組織成分的形態(tài)特征而直接查出相應(yīng)自身抗體,對(duì)于自身抗體的定性和定位同時(shí)進(jìn)行,這種準(zhǔn)確簡(jiǎn)便和快速性是其它方法難以達(dá)到的。早年在報(bào)告檢查自身抗體多用人體組織作抗原切片,后來發(fā)現(xiàn)一些動(dòng)物組織如小白鼠和大白鼠的器官組織,也可以和人血清中某些自身抗體結(jié)合,用動(dòng)物組織代替人類組織作抗原更有利于這一檢查方法的開展,F(xiàn)在,更進(jìn)一步制備多種器官和組織的復(fù)合抗原切片標(biāo)本,可以同時(shí)檢出數(shù)種自身抗體,如慢性肝炎病人血清同時(shí)查出抗核抗體(ANA),抗平滑肌抗體,抗線粒體抗體等自身抗體。這樣更有利于過篩初檢,方便病人和檢查人員。

在熒光抗體檢查陽性結(jié)果的基礎(chǔ)上,許多實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步作自身抗體的滴度檢查,對(duì)診斷和鑒別診斷,療效和病情隨訪都有一定的意義。熒光定量法可能具有更好的效果。f1411.cn/pharm/目前,少數(shù)報(bào)告用顯微分光光度計(jì)測(cè)定細(xì)胞的熒光量獲得成功,這項(xiàng)技術(shù)和設(shè)備將促進(jìn)熒光抗體技術(shù)向更精確的新階段發(fā)展。

用熒光抗體法檢查自身抗體的免疫球蛋白屬性的工作已較普遍開展,對(duì)于所得陽性結(jié)果多數(shù)實(shí)驗(yàn)室是先用人γ-球蛋白或IgG熒光抗體檢查所得,隨后再分別用抗人IgA、IgM、IgD、IgE等單價(jià)熒光抗體檢查,鑒別確定自身抗體免疫球蛋白屬性。

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