如何通過血清學診斷豬
炭疽病?
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血清學診斷 炭疽沉淀反應（Ascoli氏反應)：當病料已經(jīng)腐敗用細菌學診斷得不到可靠結果，以及檢查大量畜產(chǎn)品時，可用炭疽沉淀反應。采取病料以肝、脾、腎以及血液為適宜。將被檢血液或臟器研磨后，用生理鹽水稀釋5-10倍，煮沸15-20min，取浸出液用中性石棉濾過，用毛細管吸取透明濾液，徐徐重積于小試管內(nèi)的沉淀素血清上，于1-5min內(nèi)如接觸面出現(xiàn)清晰的白色沉淀環(huán)（白輪)，為陽性。莢膜腫脹試驗：有莢膜的炭疽桿菌與抗炭疽莢膜血清結合產(chǎn)生抗原一抗體反應，在莢膜表面發(fā)生輕微的沉淀反應，使莢膜增厚，鏡檢時，在炭疽桿菌的周圍可以看到折光性強的莢膜。涂有適當稀釋（每個視野約10個菌的濃度)的純培養(yǎng)物的載玻片或感染7- 8h處死的小鼠腹腔液涂片，滴加一滴抗炭疽莢膜血清，混勻，制成濕片，鏡下觀察，如有大桿菌周圍可見邊緣清晰、肥厚不等的莢膜，即為陽性。也可用熒光抗體莢膜染色法，方法是將病料涂片，干燥，固定后用炭疽莢膜血清（即用異硫氰酸熒光素標記的提純的抗炭疽莢膜血清抗體)染色后，用熒光顯微鏡觀察，則炭疽菌的菌體高度膨大，莢膜呈明亮黃綠色熒光。但應注意類屬反應問題。對炭疽芽孢可用炭凝集試驗，乳膠凝集試驗進行診斷，數(shù)分鐘之內(nèi)即可得出結果。 炭凝集試驗：玻璃板上滴加被檢標本O.lmL（用0.2%
氯化鈉溶液稀釋)，然后加入炭疽炭粉血清0.05mL，混勻，靜置1-5min，凡出現(xiàn)“++”以上凝集者，即使炭粉一半凝集，且液體較透明者為陽性，該反應可檢出每毫升約含78000個以上的炭疽桿菌芽孢標本。乳膠凝集試驗：同一玻板上，分別滴加被檢材料2滴，每滴O.lmL，另一側(cè)分別滴加標準炭疽抗原2滴，每滴也為O.lmL，然后再分別往被檢材料滴及炭疽標準抗原滴中滴加炭疽乳膠血清及正常乳膠血清各0.05mL，分別混勻，室溫下靜置，5min內(nèi)判定結果。當三個對照滴：炭疽乳膠血清加標準炭疽抗原呈“++++"，正常乳膠血清加標準炭疽抗原呈“一”，正常乳膠血清加被檢標本呈“一”，出現(xiàn)上述結果，說明反應條件正常，這時炭疽乳膠血清與被檢標本滴發(fā)生反應者為陽性，不發(fā)生反應者為陰性。除以上所介紹的方法外，協(xié)同凝集反應，酶聯(lián)植物凝集素吸附試驗，瓊脂擴散沉淀反應，酶標
葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)間接染色法等也逐步被應用于炭疽的診斷。
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