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雞病問答:種雞減蛋綜合癥的瓊脂擴(kuò)散試驗是怎樣的

種雞減蛋綜合癥的瓊脂擴(kuò)散試驗是怎樣的
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抗原的制備可將種毒經(jīng)尿囊腔接種于13—14日齡鴨胚,接種后96小時收集鴨胚尿液,經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘,取上清,加入甲醛使終濃度為0.2%。置37度溫箱中作用48小時后,經(jīng)40 000轉(zhuǎn)/分離心2小時,棄上清,沉淀物按原液量的1/20加入滅菌生理鹽水,用注射器充分吹打溶解,再經(jīng)3 000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘,取上清。將沉淀物再加少量滅菌生理鹽水充分吹打離心。將每次離心的上清液混合在一起,用滅菌生理鹽水補充到尿液的1/10量,作為瓊擴(kuò)抗原。瓊脂板的制備,是在100毫升pH5。6~6.4的PBS中加入氯化鈉8克、瓊脂糖1克、10%的硫柳汞0.1毫升,充分煮沸后,每個平皿注入18毫升,待瓊脂自然凝固后,置普通冰箱中保存?zhèn)溆谩T囼灂r打孔經(jīng)4毫米、孔間距3毫米的7孔梅花孔,中心孔加抗原,周圍孔加待檢血清、陰性血清和陽性血清,置3713溫箱中,保持一定濕度,經(jīng)24—48小時觀察結(jié)果。:抗原與待檢血清間出現(xiàn)特異性沉淀線者,判為陽性
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