豬人工授精精液稀釋操作規(guī)程
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一、精液化驗(yàn)室的準(zhǔn)備工作 1、將設(shè)備打開(kāi)備用：空調(diào)、雙重蒸餾水器、預(yù)熱箱、水浴鍋、恒溫載物臺(tái)。檢查恒溫冰箱溫度并檢查保存精液的質(zhì)量�！ �2、所有直接接觸精液的器具用雙蒸水沖洗備用。集精杯、精液瓶放預(yù)熱箱預(yù)熱�！ �3、稀釋液的配制：精液稀釋液宜先用現(xiàn)配。蒸餾水要求必須是雙重蒸餾。根據(jù)需要選擇不同保存時(shí)間的稀釋粉。將稀釋粉放入干凈的容器，按比例加入雙蒸水，放在磁力攪拌器上攪拌。待稀釋粉溶解完全時(shí)，放在水浴鍋中升溫。 二、采精 1、采精頻率：青年公豬和老年公豬每5天采精一次為宜，成年公豬可以每周2次�！ �2、采精方法：徒手采精是目前采用最廣泛、有效最好的一種方法�！ 「共坎料聪荆翰删藛T戴兩層一次性乳膠手套，擠掉包皮積尿后先用0.1%的
高錳酸鉀溶液將公豬包皮極其周圍皮膚洗凈消毒，再用清水擦洗公豬下腹部，最后將水分吸干。有些性欲旺盛的公豬，一進(jìn)入采精室就會(huì)立即爬跨假母豬，所以此操作步驟一定要快�！ ∫龑�(dǎo)公豬爬跨假母豬：一旦公豬爬跨完成，采精員應(yīng)立即蹲到公豬左側(cè)（如果是習(xí)慣左手采精則要選擇公豬右側(cè))稍靠后的位置，并摘掉一層一次性手套，做采精準(zhǔn)備。 公豬陰莖的把握：按摩公豬陰莖刺激，當(dāng)公豬陰莖伸出時(shí)，用右手握住公豬陰莖前的螺旋部，不讓陰莖來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)，固定好陰莖后順勢(shì)輕輕地把陰莖全部拉出包皮外，注意把握陰莖的松緊度。有節(jié)奏調(diào)節(jié)壓力來(lái)刺激性欲公豬，并將小指和無(wú)名指稍微張開(kāi)露出陰莖前端，并用消毒紙將其擦拭干凈�！ 〗泳鹤笫殖旨占�。集精杯必須是保溫的，并且是預(yù)熱好的，杯口用橡皮圈固定交叉兩層過(guò)濾紙過(guò)濾。公豬起初射出的精液多為精清，精子含量很少且�；煊心蛞汉团K物，不宜收集，待射出乳白色精液時(shí)再收集。公豬第一次射精停止，再重復(fù)上述手法促使公豬第二、三次射精，直至射完為止。 3、采精結(jié)束：待公豬射完精后，采精員順勢(shì)用手將陰莖送入包皮內(nèi)，讓公豬自己慢慢地從假母豬上下來(lái)。采集的精液去掉過(guò)濾紙后迅速傳遞進(jìn)入精液稀釋化驗(yàn)室。 三、精液品質(zhì)的檢查 1、采精量：公豬的射精量平均為250毫升�？梢杂弥亓縼�(lái)計(jì)算，1g相當(dāng)于1ml�！ �2、顏色和氣味：正常的公豬精液顏色是乳白色或灰白色，具有一種特殊的腥味。精液乳白色程度越高，表明精子密度越大。顏色和氣味異常的精液不宜使用�！ �3、 PH值：公豬精液正常的PH值在6.8-7.8之間，呈弱堿性，可用試紙進(jìn)行測(cè)定�！ �4、精子密度：是指每毫升精液中所含的精子總數(shù)。目測(cè)誤差較大，一般采用精子密度儀或精蟲(chóng)計(jì)數(shù)器來(lái)測(cè)定�！ �5、精子活力：是指精子的運(yùn)動(dòng)能力，用鏡檢視野中呈直線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)占精子總數(shù)的百分比來(lái)表示。檢查方法是：取一滴精液在載玻片上，加蓋蓋玻片，然后放在顯微鏡下鏡鑒，計(jì)算一個(gè)視野中呈直線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)目，來(lái)評(píng)定等級(jí)。一般分為十級(jí)，100%的精子都是直線運(yùn)動(dòng)為1.0級(jí)，90%為0.9級(jí)，80%的為0.8級(jí)，依次類推�；盍υ�0.6級(jí)以下的精液不宜使用�！ �6、畸形精子率：正常精子形似
蝌蚪，凡精子形態(tài)為卷尾、雙尾、折尾、無(wú)尾、大頭、小頭、長(zhǎng)頭、雙頭、大頸、長(zhǎng)頸等均為畸形精子。畸形精子的檢查方法是：取原精液一滴，均勻涂在載玻片上，干燥1-2分鐘后，用95%的酒精固定2分鐘，用蒸餾水沖洗，再干燥片刻后，用美藍(lán)或紅藍(lán)
墨水染色3分鐘，再用蒸餾水沖洗，干燥后即可鏡檢。鏡檢時(shí)，通常計(jì)算500個(gè)精子中的畸形精子數(shù)，求其百分率，一般豬的畸形精子率不能超過(guò)18%�！ ∷�、精液的稀釋、標(biāo)記、分裝與保存 1、稀釋后要求：稀釋后精液要求活力達(dá)0.6以上，每份精液要求最低有效精子含量在40以上�！ �2、稀釋過(guò)程： 確定稀釋份數(shù)：精子密度x活力x精液量/40億=可稀釋份數(shù) 等倍稀釋：用溫度計(jì)確定稀釋液與精液的溫差，當(dāng)溫差小于1℃時(shí)，經(jīng)行等倍稀釋。將稀釋液沿溫度計(jì)緩緩倒入精液，并攪拌均勻�！ ＄R檢：靜置半分鐘，使精子適應(yīng)后經(jīng)行鏡檢，若精液質(zhì)量沒(méi)有較大變化可經(jīng)行下一步�！ “聪♂尫輸�(shù)稀釋：根據(jù)稀釋份數(shù)一次性將稀釋液加入到精液中，攪拌、靜置、鏡檢。 3、精液的標(biāo)記：為了更好的區(qū)分不同種豬的精液，要將精液進(jìn)行標(biāo)記，如杜洛克用D、大約克用Y、大白用L等，也可以用公豬編號(hào)。 4、精液分裝： 因?yàn)榫旱姆盅b，形勢(shì)多樣，單說(shuō)精液瓶有100ml、80ml、30ml等等。從專業(yè)做人工授精的角度考慮，不建議用30ml的，也不推薦80ml。因?yàn)榫涸谳數(shù)侥肛i體內(nèi)后會(huì)有一定比例的倒流，也就是說(shuō)30ml的精液，單位容積精子密度要高，倒流后流失的有效精液數(shù)要多，所以不建議用小瓶的；還有一個(gè)就是稀釋粉是為精子提供能量的，如果用30ml或者80ml來(lái)分裝，那么相對(duì)100ml的保存時(shí)間要短�！ ∵�有就是，有的人工授精
器械公司生產(chǎn)的精液瓶硬度要稍稍大一點(diǎn)，所以在輸精過(guò)程中匯形成精液瓶負(fù)壓，使精液流淌不順，因此就產(chǎn)生了軟包裝的精液袋。但是如果使用精液袋分裝精液的話需要額外的分裝設(shè)備�！ ≌f(shuō)到這里，再補(bǔ)充一點(diǎn)個(gè)人建議。如果精液在短時(shí)間內(nèi)用不完需要保存的時(shí)候，不要分裝保存，建議在集精袋中保存。這樣的話精液袋的底面積要相對(duì)大于精液瓶，對(duì)于降低精子死亡率是有利的�！ ∪绻捎镁浩勘４婢�，要注意將瓶?jī)?nèi)的空氣盡量排干凈在擰緊瓶蓋。因?yàn)榫河腥�，一怕�?qiáng)烈震動(dòng)、二怕陽(yáng)光（紫外線)、三怕吸煙。 五、精液的保存 1、精液的保存方法：常用常溫保存，但要注意，不能把稀釋完的精液馬上放入恒溫箱，應(yīng)該在室溫下放置一段時(shí)間，讓其慢慢降溫到室溫后再放到恒溫箱進(jìn)行保存。 2、精液的保存時(shí)間：保存時(shí)間除與精液本身有關(guān)系外，還與保存方法、稀釋粉種類有關(guān)系。根據(jù)不同需要選擇不同稀釋粉，達(dá)到保存目的�！ �3、精液的翻動(dòng)與鏡檢：精液在保存期間要經(jīng)行翻動(dòng)來(lái)保證活力，一般中效稀釋粉稀釋的精液每12小時(shí)翻動(dòng)一次；每次精液使用之前必須經(jīng)行鏡檢，保證配種的成功率。
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