豬瘟單克隆抗體純化酶聯(lián)免疫吸附試驗抗原
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本抗原系分別用豬瘟病毒
兔化弱毒株和豬瘟病毒強毒株,分別接種細胞培養(yǎng),收獲培養(yǎng)物,通過親和層析法,利用豬瘟病毒兔化弱毒株特異性單克隆抗體和豬瘟病毒強毒株特異性單克隆抗體純化制成。用于檢測豬瘟兔化弱毒疫苗免疫抗體和豬瘟病毒強毒抗體。 【性狀】本抗原為微乳白色,無異物的透明液體。【作用與用途】用于檢測豬瘟兔化弱毒疫苗免疫抗體和豬瘟病毒強毒抗體的酶聯(lián)免疫吸附試驗!居梅ㄅc判定】(1)用法 a.用包被液將豬瘟弱毒、強毒單抗純化酶聯(lián)抗原分別作100倍稀釋,以100uL分別加到做好標(biāo)記的酶聯(lián)板各孔中,置濕盒于2-8℃過夜。b.倒去孔內(nèi)液體,用洗滌液洗板3次,每次間隔3-5min,拍干。c.用稀釋液將待檢血清作100倍稀釋后,每孔100uL。同時,將豬瘟陽性、陰性血清以100倍稀釋作對照,置37℃1.5-2h。d.重復(fù)b。e.用稀釋液將兔抗豬IgG-
辣根過氧化物酶結(jié)合物作100倍稀釋,每孔加入100uL,置37℃1.5-2h。f.重復(fù)b。g.每孔加入底物溶液(鄰苯二胺5mg+底物緩沖液5mL+30%過氧化氫18.75uL)100uL,室溫中約l0-30min后,觀察顯色反應(yīng)。h.每孔加入終止液50/uL,于酶聯(lián)讀數(shù)儀上測定在490nm波長處的光密度(OD)。(2)判定 在弱毒酶聯(lián)板上:OD≥0.2,為豬瘟弱毒抗體陽性;OD<0.2,為豬瘟弱毒抗體陰性。在強毒酶聯(lián)板上:OD≥0.5,為豬瘟強毒抗體陽性;OD<0.5,為豬瘟強毒抗體陰性。在弱毒與強毒酶聯(lián)板上,陽性對照血清應(yīng)為陽性;陰性對照血清應(yīng)為陰性!举A藏】在-15℃,有效期為1年;在2-8℃為6個月。
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說的再詳細一點
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