家禽結(jié)核病的細(xì)菌學(xué)檢查方法是怎樣的?
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涂片鏡檢取病、死禽的結(jié)核病灶病料,直接制成抹片,染色,鏡檢。由于該菌具有抗酸染色的特性,多采取萋-尼(Ziehl-Neelsen)氏染色法(簡(jiǎn)稱熱抗酸染色法)和開楊(Kinyoung’s)氏染色法(簡(jiǎn)稱冷抗酸染色法)染色,鏡檢時(shí),見到單個(gè)、成對(duì)、成堆、成團(tuán)的紅色桿菌,可初步診斷為禽結(jié)核病。染色前,涂片應(yīng)用酒精乙醚脫脂30min。熒光染色檢查涂片固定用0.1%的金胺石炭酸液或
黃連素液染色,用熒光顯微鏡檢查結(jié)核桿菌呈黃綠色熒光。分離培養(yǎng)法取病、死禽的病料用5%的草酸處理,或用10%的磷酸三鈉,4%NaOH或20%安替伏明處理,隨之在含
青霉素的Dubos氏固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),Stonbrink氏培養(yǎng)基也適合于分離禽結(jié)核桿菌,于40℃、5%～10%CO2的培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)6～8周后觀察結(jié)果。結(jié)核菌素試驗(yàn)(變態(tài)反應(yīng))結(jié)核菌素對(duì)確定禽群中有無結(jié)核病是一種可靠有效的方法,用禽結(jié)核桿菌制備的結(jié)核菌素要比哺rǔ動(dòng)物結(jié)核桿菌制備的結(jié)核菌素的陽性檢出率高,且反應(yīng)更明顯。用禽型結(jié)核菌素0.1mL,注射于一側(cè)肉髯皮內(nèi),對(duì)側(cè)作對(duì)照,48h后檢查,與對(duì)側(cè)肉髯比較,注射側(cè)出現(xiàn)腫脹和發(fā)紅,則判定為陽性反應(yīng)。
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