火雞出血性腸炎
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出血性腸炎（HE)是4周齡或更大火雞的一種急性病毒病，以精神沉郁、血便和死亡為特征。感染群體的臨診發(fā)病通�？梢猿掷m(xù)7～10天，但如果HE引起免疫抑制后，繼發(fā)細菌感染，發(fā)病和死亡的病程可能還要延長2～3周。由HE所造成損失的完整記載未曾保留下來，但估計美國在研制出疫苗之前每年要超過300萬美元。由免疫抑制和繼發(fā)細菌感染所形成的損失可能更高。當前，由于疫苗的廣泛應(yīng)用，在美國高致病力的HE的爆發(fā)極其罕見。但當繼發(fā)細菌感染，特別是繼發(fā)大腸桿菌病，疫苗的保護力可能降低。HE仍然被認為是影響商業(yè)化火雞主要經(jīng)濟價值的一種疫病。1.病原學HEV屬于腺病毒科成員，DNA病毒。通過電子顯微鏡觀察超薄組織切片，發(fā)現(xiàn)HE病毒粒子無囊膜，呈20面體立體對稱，總殼粒數(shù)為252個，呈空的和致密的兩種形態(tài)。它們在細胞核內(nèi)不規(guī)則聚集或呈晶格排列，在每個頂點上僅有一根五鄰體纖絲。HEV由11種不同的結(jié)構(gòu)多肽組成，分子質(zhì)量在14～97kD及9.5～96kD之間，其中的6種已被進一步鑒定。病毒粒子直徑為70～90納米不等，在蔗糖密度梯度研究中，HEV的浮力密度為1.34克/毫升。HEV抵抗力較強。70℃加熱1小時，37℃或25℃下干燥1周，或用0.0086%次氯酸鈉，1.0%十二烷基磺酸鈉，0.4%氯殺螨，0.4%Phenocide，0.4%Wescodyne，或1.0%來蘇兒處理，均可破壞HEV的感染性。2.
流行病學（1)自然和實驗宿主 火雞、
雉雞和雞是僅知的HEV及其關(guān)病毒的自然宿主。
珍珠雞和
鸚鵡也可能被自然感染。關(guān)于野禽，對42種禽類的血清學調(diào)查表明，除雞形目以外未發(fā)現(xiàn)感染的證據(jù)。甚至野生的雞形目成員（例如火雞)，似乎是由于其躲避天性，感染的危險很小。當火雞和雉雞感染時，似乎宿主的遺傳性影響臨床發(fā)病和病變形成的嚴重程度。試驗表明，火雞的HEV分離物能感染雉雞。用HEV實驗感染雞形目的其他禽種（包括金黃色雉雞、孔
雀、雞、北美鶉和石雞)，可以產(chǎn)生病變。但在自然宿主以外的禽種上還沒有死亡的報道。（2)宿主的易感齡期 在疫情報道中，HE發(fā)生于6～11周齡的火雞。最近的野外觀察表明更傾于感染7～9周齡的禽。僅有個別2周齡禽自發(fā)感染HEV的病例被報道，人們認為是由于缺乏母源抗體而引起的。通常認為4周齡以下的雛火雞很難感染HEV，是由于母源抗體的存在。有資料報道，在一定條件下，母源抗體可以持續(xù)到6周齡。最近對孵化24天的SPF火雞胚成功地進行感染似乎推翻了這種說法。在缺乏母源抗體時，雛火雞是易感的。但已報道13日齡和更小一些的雛火雞在缺乏母源抗體的情況下對HEV的感染具有抵抗力，表明所需要的某些種類的靶細胞還沒有成熟。3.傳播途徑HEV可以通過感染性糞便經(jīng)口腔或泄殖腔途徑接種易感火雞進行傳播。病毒在濕潤的各種尸體中或感染性糞便的懸浮液中可保持感染性達數(shù)周。在污染的墊料中已發(fā)現(xiàn)HEV，而且在那些以前發(fā)過該病的房舍中可以再次發(fā)病。還沒有通過蛋傳播的流行病學證據(jù)。在HEV的傳播中，除了機械媒介之外，還沒有牽涉到其他攜帶者和媒介。4.臨診癥狀臨診癥狀在24小時內(nèi)快速出現(xiàn)是HE的特征。這些癥狀包括沉郁、血便和死亡。在瀕死和死亡禽肛門周圍的皮膚和羽毛上常含有血糞便。如果在這些雞的腹部稍加壓力可從肛門擠出相同的血便。5.發(fā)病率和死亡率在野外發(fā)生的疫情，幾乎所有的禽都被感染，而且對實驗性攻擊具有抵抗力。在臨床上受感染精神沉郁的小火雞，通常在24小時內(nèi)死亡，或完全恢復。野外的死亡率范圍從低于1%到略高于60%，平均大約為10%～15%。在實驗室的實驗中，當100%受到感染時，常出現(xiàn)80%的死亡率。6.病理變化（1)眼觀病變 死亡的小火雞通常因失血而外觀蒼白，但其生長良好，且嗉囔中含有飼料。小腸通常擴張，極度變色，腸腔內(nèi)充滿血性滲出物。腸黏膜充血，個別火雞黏膜表面覆蓋有黃色、壞死性纖維素膜。病變通常在近側(cè)小腸更明顯，但在較嚴重的病例也常擴散到遠端。感染禽的脾臟特征性腫大、質(zhì)脆，呈大
理石或斑駁樣。然而，那些死亡雞只的脾臟往往可能因失血隨后收縮導致變得更小。肺也可能充血，但其他的器官呈蒼白色。據(jù)報道，死亡火
雞肝臟腫大，不同組織均有點狀出血，但這些病變很不一致，因而不具有診斷價值。（2)顯微病變 特征性HE的病理學變化大多見于淋巴網(wǎng)狀系統(tǒng)和胃腸道系統(tǒng)。死亡時的脾臟病變包括白髓增生、淋巴樣壞死和淋巴網(wǎng)狀細胞的核內(nèi)包涵體。早在HEV感染后的第3天，脾髓面周圍可見明顯的白髓增生，這導致在感染后的4～5天，肉眼可見斑駁樣且不規(guī)則的白髓融合島。在感染后3～5天，經(jīng)HE和免疫酶、過氧化酶染色，在這些區(qū)域可見大量的核內(nèi)包涵體。從形態(tài)上看，這些細胞呈淋巴樣。同樣，脾臟的單核巨噬細胞中也發(fā)現(xiàn)有核內(nèi)包涵體。到感染后的4～5天，白髓開始出現(xiàn)壞死。到感染后6～7天，已全部擴散，僅在紅髓處偶爾見到一些漿細胞。在感染后3～9天，除了脾臟的變化外，在胸腺的皮質(zhì)和髓質(zhì)部及法氏囊，也可見淋巴樣衰竭。胃腸道典型病變包括腸黏膜嚴重充血，絨毛上皮細胞變性、脫落及腸絨毛頂端出血。由于固有層的血管是完整的，紅細胞通過血細胞滲出而移出血管外，因此，與其說是由內(nèi)皮細胞破壞不如說是崩解導致出血。除乳頭細胞、漿細胞和異嗜細胞外，還在固有層發(fā)現(xiàn)了大量含核內(nèi)包涵體的網(wǎng)狀淋巴細胞。這些組織病理學變化在十二指腸后段到胰導管處最明顯。但腺胃、肌胃、小腸、
盲腸、盲腸扁
桃體和法氏囊中與此相似，但病變程度稍低。另外，在肝臟、骨髓、外周血液白細胞、
肺臟、胰腺、腦和腎小管上皮細胞中也可觀察到含有HEV核內(nèi)包涵體的細胞。7.診斷（1)病毒的分離與鑒定 從死亡或瀕死小火雞的出血性腸內(nèi)容物或脾組織可以發(fā)現(xiàn)大量的HEV。HE血清學陰性的火雞，最好是6周齡的小火雞，采用腸內(nèi)容物經(jīng)口接種，或用搗碎脾臟的生理鹽水粗提物經(jīng)口服接種或靜脈注射接種。靜脈注射強毒分離物后3天和經(jīng)口服接種后5～6天常發(fā)生死亡。那些未死亡的小火雞，脾臟含大量的病毒，通常表現(xiàn)腫脹，呈大理石樣。這時采集的血清內(nèi)也含有病毒。此外還可以采用成淋巴細胞樣的火雞源B細胞傳代系（MDTC-RP19)用作體外分離和培養(yǎng)HEV。通常采用瓊脂擴散試驗（AGP)方法來鑒定HEV及其相關(guān)病毒。將脾組織（新鮮的或冷凍的)用生理鹽水1∶1稀釋，加入多克隆的抗HEV血清。采用免疫熒光和免疫過氧化物酶法可以檢測冰凍或福爾馬林固定組織中的病毒抗原。近來隨著基因組序列數(shù)據(jù)庫，的建立，已經(jīng)可允許采用標準PCR以及巢式PCR檢測新鮮或冰凍組織及組織抽提物中的病毒DNA。由于PCR的應(yīng)用，脾臟原材料或DNA提取物在濾紙上干燥可以用于保存。此外，不常用的檢測技術(shù)；包括抗原捕獲ELISA、原位DNA雜交和限制性核酸內(nèi)切酶指紋技術(shù)。（2)血清學診斷 感染HEV后2～3周康復禽的血漿或血清中，采用AGP法可以檢測到HEV抗體。如果是依據(jù)血清學作出診斷，最好是檢測急性期和恢復期的血清。采用AGP法可以險測到母源抗體，但這種方法一般對1周齡以后的禽敏感性較低。更敏感的ELISA方法已能夠檢測和定量HEV抗體。盡管多數(shù)禽類到3周齡時的血清反應(yīng)仍呈陰性，但約4～6周齡時，這種方法就能夠檢測出火雞中的母源抗體。抗體最早在靜脈注射接種后3天就能檢測出來。（3)鑒別診斷 在火雞中，如果出現(xiàn)大理石樣腫脹的脾臟，用AGP法不能證明有HEV抗原，而又缺少腸道出血現(xiàn)象，則應(yīng)考慮網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥或淋巴增生性疾病。在火雞，增大而充血的脾臟常被誤認為HEV所致，但多數(shù)是細菌性
敗血癥（如大腸桿菌病、沙門氏桿菌病、
丹毒)所造成的結(jié)果。胃腸出血和黏膜充血可能與急性敗血癥、病
毒血癥或毒血癥有關(guān)。但這些很少能被觀察到，因為沒有其他與病因?qū)W相一致的病變或癥狀。此外，也應(yīng)考慮到寄生蟲病如球蟲病和毒性物質(zhì)（如重金屬和化學物質(zhì))。8.防治（1)管理措施感染性墊料和糞便是最普遍的傳播媒介，所以首先要采取良好的生物安全措施來預(yù)防和控制疾病。用0.0086%次氯酸鈉溶液或其他殺病毒制劑，包括酚類衍生物，輔以25℃干燥1周可以清潔和消毒污染了的設(shè)施。但在大多數(shù)商品雞群中，尤其是那些雞齡層次多的雞場，要想對病毒進行全面殺滅是不切實際的。在這種情況下，接種疫苗是控制和預(yù)防臨床發(fā)病的最可行辦法。（2)疫苗HEV的無毒力病毒分離物已經(jīng)成功地被制成飲水型活疫苗。目前有兩種疫苗被廣泛使用：一種是接種了無毒力HEVⅠ（MSD毒株)或HEVⅡ（源于火雞)的4～6周齡火雞的脾臟制成的粗勻漿；另一種是在體外用MDTC-RP19傳代細胞系懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)的。這兩種疫苗好像都能產(chǎn)生足夠的血清抗體和免疫保護，并在美國廣泛使用。但只有后一種疫苗能買到。外周血液白細胞中增殖無毒力病毒的第三種疫苗生產(chǎn)方法也已有報道，并已在加拿大投入使用。其他疫苗，包括一種純化的亞單位殼粒苗及基因工程苗、重組苗均在研制中。最初用禽痘病毒表達HEV殼粒蛋白的重組疫苗來減少火雞死亡率和嚴重的腸道病變。通過試驗證實，重組疫苗可以減少免疫抑制。重組HEV纖絲蛋白基因轉(zhuǎn)基因植物正作為一種疫苗的模式被研制。近來已經(jīng)報道了SPF火雞的OVO疫苗，3.5～6周齡間的健康火雞常用飲水疫苗。水中增加疫苗穩(wěn)定劑（例如奶粉)，消除任何消毒劑，包括水中的氯，這些對疫苗毒的存活和免疫的成功都非常必要。首次免疫實驗雞群的免疫保護率低于100%，它是通過以后2～3周后續(xù)的傳染而獲得保護的。盡管如此，二次免疫也僅是偶爾應(yīng)用。（3)治療：HE疫情爆發(fā)后剛出現(xiàn)癥狀時，可采用恢復期雞群的抗血清0.5～1.0毫升/只進行皮下或肌肉注射治療。由于這些病毒能使機體產(chǎn)生免疫抑制，因此，一定要考慮對繼發(fā)細菌感染的治療，主要是大腸桿菌病。依據(jù)細菌培養(yǎng)和藥敏試驗來選擇一種適宜的抗生素。在商業(yè)化火雞生產(chǎn)中，運用合理的管理措施，對暴露在野外的火雞接種可以加劇本病的其他病原的疫苗（
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