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雞白血病的預(yù)防和控制措施
雖然雞白血病在我國雞群中將是個(gè)長期問題，但只要采取有力措施，是有可能在2~3年內(nèi)把我國蛋雞中目前很高的白血病/血管瘤死亡淘汰率從現(xiàn)有水平降低60%~70%。鑒于現(xiàn)在沒有預(yù)防ALV的疫苗，近期內(nèi)也很難研制出真正有效的疫苗，對(duì)雞白血病的預(yù)防控制需要采取綜合性的措施（圖1)。這需要在養(yǎng)雞的各個(gè)環(huán)節(jié)的不同層次采取有力措施。
政府主管部門要強(qiáng)化種雞群的監(jiān)控
建議農(nóng)業(yè)部畜牧司和獸醫(yī)局共同制定對(duì)各類種雞場白血病感染狀態(tài)的監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)施經(jīng)常性的監(jiān)控。并將該標(biāo)準(zhǔn)作為種雞場準(zhǔn)入市場經(jīng)營的一項(xiàng)必須的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。該標(biāo)準(zhǔn)可先松后緊，逐漸向發(fā)達(dá)國家早已達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)靠近。對(duì)嚴(yán)重感染的種雞群，應(yīng)暫時(shí)取消其生產(chǎn)許可證。
對(duì)于每年從國外引進(jìn)祖代雛雞的種雞場，也實(shí)施同樣的監(jiān)控。在現(xiàn)階段，對(duì)進(jìn)口種雞不建議實(shí)施海關(guān)檢疫，因?yàn)檫@一做法不現(xiàn)實(shí)，效果也不好。但應(yīng)該要由對(duì)方提供官方的檢疫證明，并由各地獸醫(yī)主管部門對(duì)祖代雞場在飼養(yǎng)過程中作跟蹤檢疫。
對(duì)于各種雞群的監(jiān)控結(jié)果，可以用適當(dāng)?shù)男问皆谛袠I(yè)內(nèi)公布，從而能起到監(jiān)督效應(yīng)并為下游養(yǎng)雞公司選擇苗雞提供有益的參考。各下游養(yǎng)雞公司在選擇苗雞來源時(shí)，應(yīng)以苗雞的健康質(zhì)量為第一考慮因素。也就是說，要選擇多年來信譽(yù)度好的祖代或父母代種雞公司購買父母代或商品代苗雞，千萬不要拘泥于一點(diǎn)點(diǎn)價(jià)格差異。苗雞中有無外源性ALV的垂直感染或其感染的嚴(yán)重程度，對(duì)一批雞生產(chǎn)效益的負(fù)面影響帶來的經(jīng)濟(jì)損失要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于苗雞間的價(jià)格差。養(yǎng)雞行業(yè)內(nèi)應(yīng)該討論一下，種雞場是否需公布雞群對(duì)ALV感染狀態(tài)檢測結(jié)果？從而優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)！
保持種雞群對(duì)ALV的高度潔凈狀態(tài)
需要做好如下幾方面:
（1)從無外源性ALV感染的祖代雞或原種雞公司選購苗雞，這有賴于商業(yè)合同或政府主管部門提供的可靠信息。
（2)一個(gè)雞場只飼養(yǎng)同一品系和同一批（年齡)的種雞。橫向感染都是由近距離引起，同一雞場內(nèi)是無法隔離的。
（3)嚴(yán)格選用沒有外源性ALV污染的活疫苗，并定期檢測血清抗體狀態(tài)。
（4)同一孵化廳只用于同一個(gè)種雞場來源的種蛋，以預(yù)防孵化廳內(nèi)可能的早期橫向傳播。雛雞對(duì)ALV最易感，垂直感染的雛雞出殼后就可排毒。孵化廳內(nèi)雞運(yùn)輸箱內(nèi)高度密集，同一箱內(nèi)有一只感染雛雞，在運(yùn)輸期間可使同箱內(nèi)20%～30%的接觸雞感染。
（5)預(yù)防潛在的昆蟲傳播。
（6)建議種雞群自我檢測。當(dāng)對(duì)AB及J亞群抗體陽性率高于一定限度后自行淘汰，避免在客戶雞場出現(xiàn)問題后再發(fā)生糾紛。
強(qiáng)化弱毒疫苗中ALV污染的檢測和監(jiān)控
弱毒疫苗中外源性ALV污染是蛋雞、三黃雞和其它品系雞中傳播白血病的一個(gè)最可能的現(xiàn)實(shí)原因之一。對(duì)商品代雞群來說，特別要注意一周齡內(nèi)使用的活疫苗，如對(duì)馬立克氏病和禽痘的活疫苗。但是在種雞群，各種活疫苗都要檢測，特別是非口服疫苗。前幾年美國市場上供應(yīng)的馬立克氏病疫苗中還發(fā)現(xiàn)有ALV-A污染，我國生產(chǎn)的疫苗可能會(huì)問題更多。
問題是如何檢測？要檢測疫苗中的ALV污染，一定要區(qū)別內(nèi)源性和外源性ALV，否則會(huì)帶來很大的混亂，即報(bào)告很多的假陽性�？梢愿鶕�(jù)情況依次從如下幾種方法中做一選擇：
（1)經(jīng)典方法（金標(biāo)準(zhǔn))。將一定劑量（相當(dāng)于雛雞用量的3～5倍)活疫苗接種8～10只3～4周齡SPF雞，在隔離罩中飼養(yǎng)4～6周后采血清，隔2周后用商品化的抗體檢測試劑合檢測ALV-AB和ALV-J特異性抗體。同時(shí)在另一隔離罩中飼養(yǎng)同批SPF雞做對(duì)照。隔2周后重復(fù)一次。接種疫苗組中只要有2只或以上表現(xiàn)對(duì)ALV-AB和ALV-J特異性抗體陽性而對(duì)照組全陰性，即可判定疫苗有ALV-AB或ALV-J污染。如為陰性，可隔2周后重復(fù)一次。這一方法成功率高，結(jié)果比較可靠，但周期長，成本高，需要一定飼養(yǎng)條件醫(yī)學(xué)全在線搜集整,理f1411.cn。
（2)在DF1細(xì)胞（對(duì)E亞群ALV有抵抗力)上分離病毒，再用ALVp27試劑合檢測。這一方法適用于在該細(xì)胞上不產(chǎn)生細(xì)胞病變的疫苗病毒。對(duì)但有些疫苗病毒感染后細(xì)胞死亡，無法進(jìn)行。對(duì)細(xì)胞結(jié)合性馬立克氏病疫苗，可先將疫苗細(xì)胞在超聲波處理下裂解或用無菌蒸餾水稀釋裂解后接種DF1細(xì)胞，以此最大限度去處MDV疫苗病毒復(fù)制。對(duì)于禽痘疫苗病毒，可先接種1周齡SPF雞，再在7～10天后采血漿接種DF1 細(xì)胞。
（3)PCR擴(kuò)增囊膜蛋白全基因及其相連的3’-末端序列，測序比較和鑒定亞群。鑒于有些細(xì)胞基因組中可帶有ALV-AB、J的Env基因，單獨(dú)擴(kuò)增出Env基因還不能作為依據(jù)，一定要擴(kuò)增到Env基因的及其相連的3’-末端序列，并證明其3’-末端序列中的LTR也是外源性ALV特異性的，才有較大把握作出判斷。但要下最終結(jié)論，最好還要靠分離到病毒。
由于ALV的橫向傳播能力很弱，除非有嚴(yán)重的垂直感染，一般雞群對(duì)外源型ALV抗體的陽性率是很少會(huì)高于30%的。因此，如果雞群對(duì)ALV-AB 或ALV-J的抗體陽性率高于30%時(shí)，就要懷疑在過去用過的弱毒活疫苗中是否有哪種疫苗有ALV污染。這對(duì)種雞場尤為重要，雖然在使用被ALV-AB 或ALV-J污染的疫苗后的雞群不一定就會(huì)發(fā)生腫瘤（一般不會(huì)，因?yàn)殡u對(duì)ALV的抵抗力有很明顯的年齡依賴性)，但有可能是給下一代造成垂直感染的來源。因此，有必要對(duì)種雞群作定期的血清學(xué)檢測。
原種雞群的凈化
對(duì)我國自行育種并已形成相應(yīng)品系的自繁自養(yǎng)種雞群，應(yīng)該對(duì)外源性白血病感染實(shí)施定期檢測和嚴(yán)格的凈化措施。這項(xiàng)工作在技術(shù)操作上涉及到育種選種和長期病毒感染檢測的諸多方面措施，需要較大的資金投入。作為一個(gè)大國，必須要有自己自繁自養(yǎng)種雞群，但也必須實(shí)現(xiàn)對(duì)白血病的凈化。這需要從國家層次，由政府立項(xiàng)資助幾個(gè)不同類型種雞的龍頭企業(yè)完成凈化并保持凈化狀態(tài)。這一方面是企業(yè)行為，但也要政府在技術(shù)和資金方面資助，并實(shí)施監(jiān)控。
凈化的基本原則：（1)小群孵化小群飼養(yǎng)（20～50只/群)；（2)每只采樣分離病毒或檢測p27，淘汰所有陽性雞及所有同群雞；（3)嚴(yán)格選用弱毒活疫苗；（4)嚴(yán)禁不同種群雞共用孵化廳。
在我國現(xiàn)有條件下原種雞群凈化方案列舉如下（僅供參考)：
方案A （國際金標(biāo)準(zhǔn))完全按美國喬治亞大學(xué)禽病診斷和研究中心現(xiàn)在正在使用的方法。 對(duì)核心群雞全部采血漿接種DF-1細(xì)胞，9天后檢測p27抗原，凡陽性者全部淘汰。分別在68日齡和168日齡至少做二次采血分離病毒。對(duì)保留的核心群種雞的下一代所有剛出殼雞，檢測胎糞中的p27，淘汰所有陽性雞。如此反復(fù)。
這一方案的優(yōu)點(diǎn)是，檢測特異性和檢出率均很高，如嚴(yán)格實(shí)施4～5年，就有可能實(shí)現(xiàn)基本凈化，此后只需抽樣監(jiān)控，不再全面檢測。缺點(diǎn)是，現(xiàn)在就需要投入的資金、設(shè)備和人力較大，而且還沒有足夠數(shù)量的訓(xùn)練有素的有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)隊(duì)伍。方案B 基本原則：根據(jù)泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，陽性者都全部淘汰。
優(yōu)點(diǎn)：方法簡單，成本相對(duì)較低，每次可檢測所有個(gè)體樣品。
方案B 基本原則：根據(jù)泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，陽性者都全部淘汰。
優(yōu)點(diǎn)：方法簡單，成本相對(duì)較低，每次可檢測所有個(gè)體樣品。
缺點(diǎn)：不能區(qū)別內(nèi)源性E亞群ALV將會(huì)把感染了內(nèi)源性E群但外源性ALV陰性雞也淘了。但是當(dāng)陽性率高時(shí)，對(duì)選種不利，很難被育種專家接受。另一方面，單靠泄殖腔棉拭子及蛋清中g(shù)sP27抗原檢測，其靈敏度尚不足以檢測出所有感染雞。因此，只能保持雞群相對(duì)較高的潔凈度，但不能完全凈化。因而，檢測和凈化過程需不斷進(jìn)行醫(yī)學(xué)全在線搜集整,理f1411.cn。
適應(yīng)情況：當(dāng)整個(gè)后備雞群p27陽性率在20%以下或在育種專家可接受全部淘汰的范圍內(nèi)時(shí)，可采取這一方法。具體程序：母雞和公雞：（1)18～20W 棉拭子檢測p27；（2)21～22W 棉拭子檢測p27，如人工授精，最初次2要同時(shí)檢測公母雞；（3)23～25W （開產(chǎn)初期)棉拭子檢測最初第1～3個(gè)，蛋的蛋清中p27；（4)~40W（準(zhǔn)備孵化留種時(shí))，公母雞棉拭子檢測p27，母雞 2個(gè)蛋的蛋清檢測p27；（5)．~43W 孵出小雞，對(duì)每只后備母雞最初孵出的二只小雞，胎糞棉拭子檢測p27。
方案C 這是將前二個(gè)方案結(jié)合起來。基本原則：將對(duì)棉拭子p27陽性和陰性雞分開飼養(yǎng)，p27陽性雞分別取血清或蛋清在DF1細(xì)胞上分離外源性ALV，僅淘汰外源性ALV陽性雞
優(yōu)點(diǎn)：能區(qū)別內(nèi)外源ALV，將僅僅淘汰外源性ALV陽性雞，仍保留內(nèi)源性病毒陽性雞。
缺點(diǎn)：增加了一道鑒別性細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)性要求高，人力成本、試劑成本及實(shí)驗(yàn)室裝備較方案B明顯提高，但顯著低于方案A。
適應(yīng)情況：當(dāng)整個(gè)雞群棉拭子或蛋清中p27陽性率超過20%，非外源性ALV淘汰率過高影響育種而不能為育種專家接受時(shí)。或者說，在我國現(xiàn)在的條件下，但各相關(guān)的原種雞群還沒有條件按方案A實(shí)施凈化時(shí)，這一替代方案是最適合的過度階段。先投入有限的資金和人力，采用這一方案 開始做起來，待有足夠力量時(shí)再采用反案A。
具體程序：基本同方案A，但要把p27陽性和陰性雞群分隔飼養(yǎng)，分別定為陰性和陽性群。僅對(duì)陽性雞群中的每只雞按方案A采血分離病毒。這樣，可暫時(shí)把病毒分離的工作量減少80%。
