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抗犬細小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法

公開(公告)號 CN101062413A  
公開(公告)日 2007.10.31  
申請(專利)號 CN200710040471.5  
申請日期 2007.05.10  
專利名稱 抗犬細小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法  
主分類號 A61K39/395(2006.01)I  
分類號 A61K39/395(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 上海交通大學  
發(fā)明(設計)人 劉永德;唐 峰;葉陳梁;汪 毅  
地址 200240上海市閔行區(qū)東川路800號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 上海交達專利事務所  
代理人 王錫麟;張宗明  
國省代碼 上海;31  
主權項 一種抗犬細小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: 步驟一,采集診斷為細小病毒感染的病死犬的腸道及內容物按重量比1∶1加生理鹽水研磨,離心去除沉渣,上清液離心去除微小顆粒; 步驟二,在去除微小顆粒后的上清液中加入氯仿,劇烈振蕩,離心去除脂溶性物質; 步驟三,取去除脂溶性物質后的上清液,加入醛化、洗滌后的豬紅細胞,搖勻放置進行病毒吸附,離心沉淀豬紅細胞,加入高滲鹽水后放置進行病毒釋放,離心去除豬紅細胞,取病毒釋放液,測HA效價,達1∶4096有效; 步驟四,取上述病毒釋放液經甲醛滅活后加入褐藻多糖,制備成油乳劑犬細小病毒疫苗,將制備的犬細小病毒疫苗免疫20周齡以上經產母雞,用血凝抑制試驗進行效價測定,當卵黃中HI效價達1∶256以上時收集免疫卵,效價低于1∶128時進行第三次免疫; 步驟五,收獲卵黃用無菌蒸餾水對倍稀釋,用乳酸液進行酸處理去除雜蛋白、凍融去脂,抽濾液經硫酸銨鹽析提取IgY,除鹽后稀釋封裝安培瓶中,放水浴箱處理,經口服安全性檢驗及微生物檢驗合格后即成口服生物制劑。  
摘要 一種抗犬細小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法,采集診斷為細小病毒感染的病死犬病料,離心去除沉渣,上清液離心,取上清液加入氯仿,劇烈振蕩,離心取上清液加入醛化洗滌后的豬紅細胞,搖勻放置,離心取沉淀,加入鹽水后放置,離心取病毒釋放液測HA效價,達1:4096有效;取上述病毒釋放液經甲醛滅活后加入褐藻多糖制備成油乳劑犬細小病毒疫苗,將該疫苗免疫經產母雞后用血凝抑制試驗測定免疫卵HI效價,達標后收獲卵黃用無菌蒸餾水對倍稀釋,用乳酸液進行酸處理去除雜蛋白、凍融去脂,抽濾液進行鹽析,除鹽后調整IgY的濃度分裝,放水浴箱處理,即成口服生物制劑,其IgY的得率達95%以上,活性不受任何影響,一個免疫卵一般可得IgY 70-100mg。  
國際公布  
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