骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構建
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公開(公告)號
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CN1438314A
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公開(公告)日
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2003.08.27
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申請(專利)號
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CN03115725.4
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申請日期
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2003.03.07
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專利名稱
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骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 基因修飾的組織工程化骨的構建
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主分類號
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C12N5/08
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分類號
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C12N5/08;C12N5/10;A61L27/00
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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上海第二醫(yī)科大學附屬第九人民醫(yī)院
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發(fā)明(設計)人
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戴尅戎;湯亭亭;樓覺人;徐小良
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地址
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200011上海市制造局路639號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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上海東亞專利代理有限公司
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代理人
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董梅
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國省代碼
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上海;31
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主權項
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骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構建，涉及種子細胞分離培養(yǎng)與擴增，和載體處理與組織工程化人工骨的構建，其特征在于：所述種子細胞分離培養(yǎng)與擴增是從髂前上嵴上穿刺抽取骨髓，與肝素化的低糖a-MEM完全培養(yǎng)基混勻，接種于培養(yǎng)皿上，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱孵育，3天后半量換液，一周后完全換液，以后每周更換培養(yǎng)基2次，約于12天，貼壁細胞幾乎90％匯合，吸凈培養(yǎng)基，以PBS沖洗2次，加入1ml0.05％胰蛋白酶(含0.02％EDTA)，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱孵育5分鐘，加入9ml低糖a-MEM完全培養(yǎng)基以中和胰蛋白酶的活性，用吸管輕輕吹打細胞使成單細胞懸液，按1∶3進行傳代培養(yǎng)，95％匯合后用攜帶有人BMP-2基因的腺病毒感染；所述載體處理與組織工程化人工骨的構建是利用可吸收雙相煅燒骨為細胞載體材料，其內表面經可溶性膠原涂層，植入前收集BMP-2基因轉染后第3天的自體MSC，取總量為2×108細胞，用2ml無血清α-MEM制成細胞懸液，投入煅燒骨一顆，抽真空，將細胞懸液吸入煅燒骨中，37℃下培養(yǎng)4天。
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摘要
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本發(fā)明為骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構建與應用，涉及生物、醫(yī)學領域。骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構建，涉及種子細胞分離培養(yǎng)與擴增，和載體處理與組織工程化人工骨的構建，以及一種在體內骨生成的方法。裸鼠皮下誘導成骨試驗，復合BMSC的煅燒骨植入后3周，可見煅燒骨內表面有大量新骨形成。尤其適用于醫(yī)學領域各種類型骨缺損的修復。
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國際公布
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