公開(公告)號(hào)
|
CN1467295A
|
公開(公告)日
|
2004.01.14
|
申請(qǐng)(專利)號(hào)
|
CN03100580.2
|
申請(qǐng)日期
|
2003.01.20
|
專利名稱
|
一種以微生物克隆載體生產(chǎn)治療血管疾病基因藥物血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-2裸DNA的方法
|
主分類號(hào)
|
C12P19/34
|
分類號(hào)
|
C12P19/34;C12N15/12;A61K48/00;A61P9/10;C12Q1/68
|
分案原申請(qǐng)?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(qǐng)(專利權(quán))人
|
甘肅亞盛鹽化工業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公司
|
發(fā)明(設(shè)計(jì))人
|
周長(zhǎng)生;張金文;陳正華
|
地址
|
730030甘肅省蘭州市城關(guān)區(qū)張掖路219號(hào)
|
頒證日
|
|
國(guó)際申請(qǐng)
|
|
進(jìn)入國(guó)家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
甘肅省專利服務(wù)中心
|
代理人
|
田玉蘭
|
國(guó)省代碼
|
甘肅;62
|
主權(quán)項(xiàng)
|
一種包含有人源性VEGF啟動(dòng)子(hVEGF promoter)和鼠源性VEGF-2cDNA(mVEGF-2)的載體,其特征在于:該載體的hVEGF啟動(dòng)子和mVEGF-2定向連接在一起,hVEGF啟動(dòng)子位于mVEGF-2上游,使mVEGF-2基因被hVEGF啟動(dòng)子所驅(qū)動(dòng)。
|
摘要
|
本方法從受孕小鼠胚胎克隆了鼠源性VEGF-2(mVEGF-2)基因,然后從新生兒胎盤克隆人源性VEGF啟動(dòng)子(hVEGF promoter),并使mVEGF-2被hVEGFpromoter所驅(qū)動(dòng),插入哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pEGSH中,構(gòu)建出能夠在原核細(xì)胞中以高拷貝數(shù)產(chǎn)生大量DNA、并能在原核和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中均能表達(dá)的載體pEGVPV。用這載體轉(zhuǎn)化E.coli DH5α后,獲得的DNA拷貝數(shù)有2000個(gè)/細(xì)胞之多,從細(xì)胞培養(yǎng)物中分離的DNA產(chǎn)量能夠達(dá)到1.5mg/L。本發(fā)明還提供了一種以微生物生產(chǎn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-2(vascular endothelial growth factor2,VEGF-2)DNA藥物的方法。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子能特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞,強(qiáng)烈促進(jìn)其增殖和血管形成,并有升高血管通透性的作用。缺血型動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)表明,向局部缺血組織顯微注射該裸DNA可促進(jìn)新生血管形成,增強(qiáng)側(cè)枝循環(huán)的建立,有效地改善了缺血組織的血液供應(yīng)。本方法可提供一種治療血管疾病的新方案。
|
國(guó)際公布
|
|