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修飾的大腸桿菌內(nèi)毒素Ⅱ信號(hào)肽以及表達(dá)該肽與異源蛋白質(zhì)的融合蛋白的微生物

公開(公告)號(hào) CN1144815C  
公開(公告)日 2004.04.07  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN99810924.X  
申請(qǐng)日期 1999.09.15  
專利名稱 修飾的大腸桿菌內(nèi)毒素Ⅱ信號(hào)肽以及表達(dá)該肽與異源蛋白質(zhì)的融合蛋白的微生物  
主分類號(hào) C07K14/245  
分類號(hào) C07K14/245;C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;//(C12N1/21,C12R1:19)  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1998.9.15 KR 1998/38061  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 韓美藥品工業(yè)株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 權(quán)世昌;鄭圣燁;申勛;崔宰道;;崔基斗;李寬淳  
地址 韓國(guó)京畿道  
頒證日 2004.04.07  
國(guó)際申請(qǐng) PCT/KR1999/000547 1999.9.15  
進(jìn)入國(guó)家日期 2001.03.15  
專利代理機(jī)構(gòu) 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司  
代理人 李悅  
國(guó)省代碼 韓國(guó);KR  
主權(quán)項(xiàng) 一種修飾過的大腸桿菌內(nèi)毒素II信號(hào)肽,其特征在于具有基酸序列Met Lys Lys Asn Ile Ala Phe Leu Leu Ala Ser Met Phe Val Phe Ser Ile Ala ThrAsn Ala Tyr Ala(SEQ ID NO:1)的大腸桿菌內(nèi)毒素II信號(hào)肽中第2、第4、第5、第12、第20和第22個(gè)氨基酸中的至少一個(gè)是如下取代的:第2個(gè)氨基酸Lys未被取代或被Val取代;第4個(gè)氨基酸Asn被Ser、Thr或Lys取代;第5個(gè)氨基酸Ile未被取代或者被Thr或Ser取代;第12個(gè)氨基酸Met未被取代或被Gly或Leu取代;第20個(gè)氨基酸Asn未被取代或者被Val取代;以及第22個(gè)氨基酸Tyr未被取代或被Gln取代。  
摘要 一種如下制備的異源蛋白質(zhì):(i)培養(yǎng)一種轉(zhuǎn)化了表達(dá)載體的微生物以便產(chǎn)生異源蛋白質(zhì)并分泌到周質(zhì)中,其中的表達(dá)載體包含編碼融合在一起的修飾過的大腸桿菌內(nèi)毒素II信號(hào)肽和異源蛋白質(zhì)的基因,所述修飾過的大腸桿菌內(nèi)毒素II信號(hào)肽是通過將氨基酸序列如下(SEQ ID NO:1)的大腸桿菌內(nèi)毒素II信號(hào)肽中第2、第4、第5、第12、第20和第22個(gè)氨基酸中的至少一個(gè)用其他氨基酸取代獲得的,條件是修飾后的肽第2和第4個(gè)氨基酸至少一個(gè)是賴氨酸;(ii)從周質(zhì)中純化所述異源蛋白質(zhì)。  
國(guó)際公布 WO00/15661 英 2000.3.23  
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