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熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)寡核苷酸基因芯片制備方法

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1147592C  
公開(kāi)(公告)日 2004.04.28  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN01139251.7  
申請(qǐng)日期 2001.12.27  
專(zhuān)利名稱(chēng) 熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)寡核苷酸基因芯片制備方法  
主分類(lèi)號(hào) C12Q1/68  
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 上海交通大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 劉喜朋;劉建華;陳潔;林志新  
地址 200030 上海市華山路1954號(hào)  
頒證日 2004.04.28  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專(zhuān)利事務(wù)所  
代理人 毛翠瑩  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)寡核苷酸基因芯片制備方法,其特征在于將寡核苷酸片段兩端預(yù)先用相應(yīng)的熒光基團(tuán)標(biāo)記,一個(gè)是熒光供體基團(tuán),另一個(gè)是熒光受體基團(tuán),片段的中間用生物素標(biāo)記,熒光標(biāo)記的寡核苷酸片段以微點(diǎn)陣的形式固定于鏈親和素包被的玻片表面,具體步驟如下:第一步,將鏈親和素固定于玻片表面;第二步,化學(xué)合成寡核苷酸片段,這種片段的序列特征是5’-末端的序列將與目標(biāo)區(qū)域的3’-序列配對(duì),3’-末端的序列將與目標(biāo)區(qū)域的5’-序列配對(duì),中間序列是寡聚胸腺核苷酸,這種片段的修飾特征是兩個(gè)末端分別用熒光供體基團(tuán)和熒光受體基團(tuán)修飾,中間用生物素修飾,寡核苷酸片斷中間的生物素基團(tuán)用于寡核苷酸片段在鏈親和素包被玻片表面的固定;第三步,修飾過(guò)的寡核苷酸片段微點(diǎn)陣化固定于用鏈親和素包被的玻片表面,制備熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)寡核苷酸基因芯片。  
摘要 本發(fā)明涉及一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)寡核苷酸基因芯片制備方法,采用將寡核苷酸片段兩端分別用不同的熒光基團(tuán)進(jìn)行標(biāo)記,中間用生物素標(biāo)記的方法,將標(biāo)記的寡核苷酸片段以微點(diǎn)陣列的形式固定于鏈親和素包被的玻片表面,從而制備熒光共振能量轉(zhuǎn)移類(lèi)基因芯片。本發(fā)明制備的基因芯片可用于檢測(cè)待測(cè)核酸的種類(lèi)與含量,單核苷酸多態(tài)性分析以及疾病診斷等領(lǐng)域,待測(cè)樣品無(wú)需預(yù)先用熒光標(biāo)記,由于探針?lè)肿記](méi)有莖環(huán)結(jié)構(gòu),因此與目標(biāo)核酸雜交時(shí)沒(méi)有能量障礙,檢測(cè)的靈敏度高,目標(biāo)分子可以是DNA、RNA、單鏈核酸、雙鏈核酸,因此可以提高檢測(cè)通量。  
國(guó)際公布  
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