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咖啡因生物合成體系基因組的聯(lián)合利用

公開(公告)號 CN1495261A  
公開(公告)日 2004.05.12  
申請(專利)號 CN03150243.1  
申請日期 2003.07.22  
專利名稱 咖啡因生物合成體系基因組的聯(lián)合利用  
主分類號 C12P17/18  
分類號 C12P17/18;C12N15/52;A01H1/00  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2002.7.23 JP 213655/2002  
申請(專利權(quán))人 奈良先端科學(xué)技術(shù)大學(xué)院大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計)人 上藤洋敬;佐野浩;小泉望;新名惇彥  
地址 日本奈良縣  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 北京市金杜律師事務(wù)所  
代理人 楊宏軍  
國省代碼 日本;JP  
主權(quán)項 一種生產(chǎn)7-甲基黃嘌呤、可可堿或咖啡因的方法,是在下述酶(a)、(c)、(d)和細(xì)胞提取物(b)的2種或2種以上組合的催化作用下,在生物體外,進行在嘌呤環(huán)7位的黃嘌呤核苷的甲基化、在嘌呤環(huán)9位的7-甲基黃嘌呤核苷的脫核糖化、在嘌呤環(huán)3位的7-甲基黃嘌呤的甲基化、和/或在嘌呤環(huán)1位的可可堿的甲基化,生產(chǎn)7-甲基黃嘌呤、可可堿或咖啡因的方法,(a)是具有催化在嘌呤環(huán)7位的黃嘌呤核苷的甲基化的活性,具有序列表的序列號:1中所示基酸序列的酶,(b)是具有催化在嘌呤環(huán)9位的7-甲基黃嘌呤核苷的脫核糖化的活性,由大腸桿菌得到的細(xì)胞粗提取物,(c)是具有催化在嘌呤環(huán)3位的7-甲基黃嘌呤的甲基化的活性,具有序列表的序列號:4中所示氨基酸序列的酶,(d)是具有催化在嘌呤環(huán)1位的可可堿的甲基化的活性,具有序列表的序列號:7中所示氨基酸序列的酶。  
摘要 提供一種在咖啡因生物合成反應(yīng)體系中,聯(lián)合利用分別催化這些反應(yīng)的酶和分別編碼這些酶的基因的方法。該方法為:將酶a.c.d.和細(xì)胞提取物b.的2個或2個以上組合,在生物體外,通過進行黃嘌呤核苷的甲基化、7-甲基黃嘌呤核苷的脫核糖化、7-甲基黃嘌呤的甲基化和/或可可堿的甲基化反應(yīng),生產(chǎn)7-甲基黃嘌呤、可可堿或咖啡因的方法。a.是催化在嘌呤環(huán)7位的黃嘌呤核苷的甲基化,具有序列1所示氨基酸序列的酶;b.是催化在嘌呤環(huán)9位的7-甲基黃嘌呤核苷的脫核糖化,由大腸桿菌得到的細(xì)胞粗提取物;c.是催化在嘌呤環(huán)3位的7-甲基黃嘌呤的甲基化,具有序列4所示氨基酸序列的酶;d.是催化在嘌呤環(huán)1位的可可堿的甲基化,具有序列7所示氨基酸序列的酶。  
國際公布  
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